复制缺陷型人泡沫病毒载体辅助质粒P△GP的构建及转染小肠癌细胞的研究 |
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引用本文: | 张良,李治,刘万红,刘辉,何小华,李文鑫.复制缺陷型人泡沫病毒载体辅助质粒P△GP的构建及转染小肠癌细胞的研究[J].武汉大学学报(理学版),2003,49(6):756-760. |
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作者姓名: | 张良 李治 刘万红 刘辉 何小华 李文鑫 |
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作者单位: | 1. 武汉大学,生命科学学院,湖北,武汉,430072 2. 武汉大学,生命科学学院,湖北,武汉,430072;广州军区,武汉总医院,湖北,武汉,430070 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30200083);湖北省科技攻关计划资助项目(2002AA304B09) |
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摘 要: | 在人泡沫病毒原病毒全长克隆pHRSVl3的基础上,缺失突变gag和pol基因,并且用SV40polyA加尾信号替代人泡沫病毒的3′LTR,构建辅助质粒p△GP.将复制缺陷型人泡沫病毒载体质粒pGPSNI-EGFP和辅助质粒pAGP分别转染和共转染小肠癌HIC细胞系,荧光显微镜检测发现共转染pGPSNI-EGFP和p△GP的HIC细胞能够强烈表达绿色荧光蛋白,转染有复制缺陷型人泡沫病毒载体质粒pGPSNI-EGFP的HIC细胞能够表达少量的绿色荧光蛋白,而转染有辅助载体p△GP的HIC细胞不表达绿色荧光。结果证明复制缺陷型人泡沫病毒载体的构建成功,表明人泡沫病毒env基因3′端的内部启动子IP具有弱启动子的活性,并且bel基因产生的调控蛋白能够反式激活人泡沫病毒内部启动子IP和5′LTR的启动子。
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关 键 词: | 辅助质粒 共转染 启动子 绿色荧光蛋白 人泡沫病毒 小肠癌 癌细胞 复制缺陷型 |
文章编号: | 1671-8836(2003)06-0756-05 |
修稿时间: | 2003年9月4日 |
Study on the Transfection of Constrction Replication-Defective Virus Vector Helper Plasmid p△GP to HIC Cell |
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