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复制缺陷型人泡沫病毒载体辅助质粒P△GP的构建及转染小肠癌细胞的研究
引用本文:张良,李治,刘万红,刘辉,何小华,李文鑫.复制缺陷型人泡沫病毒载体辅助质粒P△GP的构建及转染小肠癌细胞的研究[J].武汉大学学报(理学版),2003,49(6):756-760.
作者姓名:张良  李治  刘万红  刘辉  何小华  李文鑫
作者单位:1. 武汉大学,生命科学学院,湖北,武汉,430072
2. 武汉大学,生命科学学院,湖北,武汉,430072;广州军区,武汉总医院,湖北,武汉,430070
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30200083);湖北省科技攻关计划资助项目(2002AA304B09)
摘    要:在人泡沫病毒原病毒全长克隆pHRSVl3的基础上,缺失突变gag和pol基因,并且用SV40polyA加尾信号替代人泡沫病毒的3′LTR,构建辅助质粒p△GP.将复制缺陷型人泡沫病毒载体质粒pGPSNI-EGFP和辅助质粒pAGP分别转染和共转染小肠癌HIC细胞系,荧光显微镜检测发现共转染pGPSNI-EGFP和p△GP的HIC细胞能够强烈表达绿色荧光蛋白,转染有复制缺陷型人泡沫病毒载体质粒pGPSNI-EGFP的HIC细胞能够表达少量的绿色荧光蛋白,而转染有辅助载体p△GP的HIC细胞不表达绿色荧光。结果证明复制缺陷型人泡沫病毒载体的构建成功,表明人泡沫病毒env基因3′端的内部启动子IP具有弱启动子的活性,并且bel基因产生的调控蛋白能够反式激活人泡沫病毒内部启动子IP和5′LTR的启动子。

关 键 词:辅助质粒  共转染  启动子  绿色荧光蛋白  人泡沫病毒  小肠癌  癌细胞  复制缺陷型
文章编号:1671-8836(2003)06-0756-05
修稿时间:2003年9月4日

Study on the Transfection of Constrction Replication-Defective Virus Vector Helper Plasmid p△GP to HIC Cell
Abstract:
Keywords:
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