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生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法
引用本文:张红蕾,徐志栋,李玮,杨瑜涛,杜洁,韩孟楠,王烁康.生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法[J].分析测试学报,2016,35(9):1181-1184.
作者姓名:张红蕾  徐志栋  李玮  杨瑜涛  杜洁  韩孟楠  王烁康
作者单位:1. 河北大学化学与环境科学学院,河北保定,071002;2. 河北大学化学与环境科学学院,河北保定071002;河北博伦特药业有限公司,河北石家庄052263
基金项目:2014年河北省高等学校高层次人才科学研究项目(GCC 2014013 );国家国际科技合作专项项目(2013DFB30190)
摘    要:以芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)为柱前衍生剂,四硼酸钠为缓冲溶液,建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定微生物转化L-脯氨酸生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的定量分析方法。优化了衍生反应条件,当衍生反应体系中水和乙腈的比例为66∶34,p H值为9.9时衍生效果最佳。采用Agilent Extend C-18柱进行分离,以0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈作为流动相,梯度洗脱,检测波长263 nm。L-脯氨酸和反式-4-羟基-L-脯氨酸均在0.01~5.00 mg/m L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限为5.00~7.00 ng/L,不同浓度下的平均回收率分别为98.9%~102%和97.9%~100%。该方法重现性好,精密度高,为定量分析微生物发酵液中的L-脯氨酸和反式-4-羟基-L-脯氨酸提供了有效方法。

关 键 词:柱前衍生  反相高效液相色谱  反式-4-羟基-L-脯氨酸  L-脯氨酸  微生物转化

Quantitative Analysis of trans-4-Hydroxy-L-proline by Microbial Conversion of L-Proline
ZHANG Hong-lei,XU Zhi-dong,LI Wei,YANG Yu-tao,DU Jie,HAN Meng-nan,WANG Shuo-kang.Quantitative Analysis of trans-4-Hydroxy-L-proline by Microbial Conversion of L-Proline[J].Journal of Instrumental Analysis,2016,35(9):1181-1184.
Authors:ZHANG Hong-lei  XU Zhi-dong  LI Wei  YANG Yu-tao  DU Jie  HAN Meng-nan  WANG Shuo-kang
Abstract:
Keywords:pre-column derivation  RP-HPLC  trans-4-hydroxy-L-proline  L-proline  microbial conversion
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