高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定人尿中硒形态

采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP/MS)测定人尿中硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)、亚硒酸盐［Se(Ⅳ)］、硒代蛋氨酸(SeMet)、硒酸盐［Se(Ⅵ)］5种硒形态。样品经超纯水稀释后,采用HamiltonPRP-X100色谱柱(250mm×4mm,10μm)分离,以40mmol/L磷酸氢二铵(含1%甲醇,pH5)为流动相进行等度洗脱,13min内可将5种硒形态分离。5种硒形态的线性范围为0~300.0μg/L,相关系数(r)均大于0.999,检出限为0.2~0.5μg/L。除SeCys2的加标回收率为37.7%~70.4%外,MeSeCys、Se(Ⅳ)、SeMet、Se(Ⅵ)的加标回收率为80.0%~123%;5种硒形态的相对标准偏差(RSD)均不大于7.8%。应用该方法测定实际样品,结果显示人尿中硒形态主要以SeCys2为主,同时含有少量MeSeCys、SeMet、无机硒及未知含硒化合物。