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| 测定化学物对萤光素酶抑制毒性的微板发光法研究 | |
| 引用本文： | 葛会林,刘树深,陈浮,罗金辉,吕岱竹,苏冰霞. 测定化学物对萤光素酶抑制毒性的微板发光法研究[J]. 光谱学与光谱分析, 2013, 33(10) |
| 作者姓名： | 葛会林 刘树深 陈浮 罗金辉 吕岱竹 苏冰霞 |
| 作者单位： | 1. 中国热带农业科学院分析测试中心,海南省热带果蔬产品质量安全重点实验室,海南海口571101;同济大学环境科学与工程学院,长江水环境教育部重点实验室,上海200092 2. 同济大学环境科学与工程学院,长江水环境教育部重点实验室,上海200092 3. 中国热带农业科学院分析测试中心,海南省热带果蔬产品质量安全重点实验室,海南海口571101 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，国家高技术研究发展计划课题专题，农业公益性行业科研专项经费项目 |
| 摘 要： | 基于萤火虫萤光素酶生物发光反应体系,以SpectraMax M5酶标仪为发光强度测试设备,建立了测定化学物对萤光素酶抑制毒性的微板发光测试薪方法.系统地研究了萤光素酶浓度、萤光素浓度、ATP浓度、pH、温度、反应时间等实验条件对发光强度的影响.发现ATP对发光呈现双相响应关系,最大发光度出现在ATP浓度为1.1×10-4 mol·L-1.应用该方法成功地测定了NaF,NaC1,KBr和NaBF对萤光素酶的发光抑制毒性效应,基于非线性最小二乘法拟合化学物对萤光素酶毒性的剂量-效应曲线(DRC),拟合效应与实验结果之间的决定系数(R2)均大于0.99.通过拟合的DRC参数,准确地计算了化学物的半数效应浓度EC50.对比有关文献方法,萤光素酶毒性测试的微板发光法具有更简便快捷,节省试剂药品,便于多次平行测定从而提高准确度等优点. |
| 关 键 词： | 萤光素酶 微板发光法 最小二乘法 剂量-效应曲线 ATP双相响应 |
Microplate Luminometry for Toxicity Bioassay of Chemicals on Luciferase |
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| GE Hui-lin , LIU Shu-shen , CHEN Fu , LUO Jin-hui , L Dai-zhu , SU Bing-xia. Microplate Luminometry for Toxicity Bioassay of Chemicals on Luciferase[J]. Spectroscopy and Spectral Analysis, 2013, 33(10) | |
| Authors: | GE Hui-lin LIU Shu-shen CHEN Fu LUO Jin-hui L Dai-zhu SU Bing-xia |
| Affiliation: | GE Hui-lin , LIU Shu-shen , CHEN Fu , LUO Jin-hui , L(U) Dai-zhu , SU Bing-xia |
| Abstract: | |
| Keywords: | Luciferase Microplate luminometry Least square Dose-response curve ATP biphasic response |
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