超高效液相色谱－串联四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法测定豆类中的硒代蛋氨酸

该研究利用超高效液相色谱－串联四极杆静电场轨道阱高分辨质谱（UHPLC/ESI－Q－Orbitrap）技术,对硒代蛋氨酸（SeMet）的色谱信息、分子离子质荷比和碎裂片段的质荷比进行采集,并对特征离子碎裂途径进行解析,建立了豆类中硒代蛋氨酸的检测方法。样品用三羟甲基氨基甲烷－盐酸（Tris－HCl）缓冲溶液溶解后,涡旋混匀,超声提取,在恒温水浴条件下酶解,离心后取上清液过0.22μm滤膜后上机检测。采用HypersilGOLDHILIC（50mm×2.1mm,1.9μm）色谱柱进行分离,以0.2%（体积分数,下同）甲酸6mmol/L甲酸铵水溶液和0.2%甲酸6mmol/L甲酸铵乙腈溶液为流动相梯度洗脱,采用电喷雾正离子模式电离,在全扫描/数据依赖扫描模式（FullMS/dd－MS²）下进行检测,基质匹配标准校正法定量。结果表明,硒代蛋氨酸的基质效应为15.75%,在0.05～0.5mg/L范围内线性关系良好,相关系数（r²）为0.9976,方法检出限（LOD）为0.015mg/kg,定量下限（LOQ）为0.05mg/kg;空白样品在0.1、0.2、0.4mg/kg3个加标水平下的平均回收率为77.6%～83.2%,日内相对标准偏差（RSD_r）为2.8%～4.8%,日间相对标准偏差（RSD_R）为4.1%～6.5%。将方法应用于实际样品的检测,得富硒黑豆、富硒红豆、富硒绿豆中硒代蛋氨酸的含量分别为0.252、0.163、0.184mg/kg。该方法具有前处理操作简单、结果准确、重复性好等优点,适用于豆类中硒代蛋氨酸的检测。