原核表达过程中非目标蛋白质识别与确认的方法:NRSF/REST蛋白功能结构域ZnF2-8原核表达过程中β-内酰胺酶的确认 |
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作者姓名: | 张岩 赵玢 杨中正 申杰 胡伟 蓝文贤 吴厚铭 曹春阳 |
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作者单位: | 中国科学院 上海有机化学研究所,生命有机国家重点实验室,上海 200032 |
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摘 要: | 大肠杆菌常被用来大量快速制备重组蛋白质。但是,在原核表达目标蛋白质时非目标蛋白质经常会意外表达。有时这些非目标蛋白质也非常有使用价值,但是最终确认这些非目标蛋白质的过程昂贵又及其耗时。基于此,该文发展了一个新的基于二维核磁共振波谱技术、X-单晶衍射技术、结合其他生物化学方法,确认在原核表达神经限制性沉默因子 NRSF/REST 蛋白(该蛋白能够特异性识别神经限制性沉默因子 RE1 dsDNA及神经限制性激活因子dsRNA,以调节神经元干细胞的发育)功能结构域ZnF2-8时非目标蛋白b-内酰胺酶(b-lactamase)。
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关 键 词: | NRSF/REST ZnF2-8 核磁共振(NMR) β-内酰胺酶 意外表达 |
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