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罗丹明染料荧光猝灭法测定超痕量辣根过氧化物酶
引用本文:麻文胜,黄国霞,梁爱惠,蒋治良.罗丹明染料荧光猝灭法测定超痕量辣根过氧化物酶[J].光谱学与光谱分析,2009,29(3):759-761.
作者姓名:麻文胜  黄国霞  梁爱惠  蒋治良
作者单位:1. 广西师范大学环境与资源学院, 广西 桂林 541004
2. 桂林工学院材料与化学工程系, 广西 桂林 541004
3. 广西职业技术学院, 广西 南宁 530226
基金项目:国家自然科学基金,广西自然科学基金 
摘    要:在HAC-NaAC缓冲液中,辣根过氧化物酶催化H2O2氧化KI生成I2,过量的I-可与I2结合形成I-3,而I-3分别与罗丹明S(RhS), 罗丹明G(Rh6G), 罗丹明B(RhB)和丁基罗丹明B(b-RhB)反应导致四体系在580,580,554和554 nm处的荧光强度降低。在选择条件下,对于RhS,Rh6G,RhB,b-RhB四体系,辣根过氧化物酶的浓度分别在8~6 400,40~4 000,32~3 200,40~6 400 pg·mL-1范围内与其荧光猝灭强度成线性关系,其检出限分别为3.2,3.0,2.4,3.7 pg·mL-1。其中RhS催化体系较好,用于酶联免疫乙肝试剂盒中辣根过氧化物酶活力的测定,结果比较满意。

关 键 词:辣根过氧化物酶  罗丹明染料  荧光猝灭法  
收稿时间:2007-11-16

Fluorescence Quenching Assay of Ultratrace Horseradish Peroxidase Using Rhodamine Dye
MA Wen-sheng,HUANG Guo-xia,LIANG Ai-hui,JIANG Zhi-liang.Fluorescence Quenching Assay of Ultratrace Horseradish Peroxidase Using Rhodamine Dye[J].Spectroscopy and Spectral Analysis,2009,29(3):759-761.
Authors:MA Wen-sheng  HUANG Guo-xia  LIANG Ai-hui  JIANG Zhi-liang
Institution:1. School of Environment and Resource, Guangxi Normal University, Guilin 541004, China2. Department of Material and Chemical Engineering, Guilin University of Technology, Guilin 541004, China3. Guangxi Polytechnic Institute, Nanning 530226, China
Abstract:In acetate buffer solution,the reaction of H2O2 with KI was catalyzed by horseradish peroxidase(HRP) to form I-3.The I-3 combined respectively with rhodamine S(RhS),rhodamine 6G(Rh6G),rhodamine B(RhB) and butyl-rhodamine B(b-RhB) to form RhS-I3,Rh6G-I3,RhB-I3 and b-RhB-I3 association particles,resulting in the fluorescence quenching at 580,580,554 and 554 nm,respectively.The effect of pH value,rhodamine dye concentration,KI concentration,H2O2 concentration,reaction temperature and time on the fluorescence q...
Keywords:Horseradish peroxidase  Rhodamine dye  Fluorescence quenching assay  
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