甲醇-磷酸氢二钾-水双水相萃取-高效液相色谱检测肉类产品中四环素类残留

以甲醇-无机盐-水双水相体系,建立了一种高效的用于液相色谱法检测肉类产品中四环素类抗生素残留的样品前处理方法。实验考察了双水相的形成条件以及对四环素类药物的提取效率,用液相色谱法与瑞利散射法研究了蛋白质对甲醇-无机盐-水双水相体系萃取四环素的影响。结果表明,只有加入适量的磷酸氢二钾才能形成甲醇水双水相体系,该双水相体系对极性较强的四环素类药物具有较高的萃取效率;体积分数为70%的甲醇水溶液作为萃取液可以使肉类产品中的蛋白质基质发生缓慢而彻底地变性,有利于释放与蛋白质结合的药物。由于甲醇-K_2HPO_4-水双水相体系的上相萃取液中水溶性蛋白等杂质较少,样品净化步骤大大简化,在上相中加入少量PSA与C_(18)固体吸附剂,离心后取上清液即可进行HPLC分析。该方法用于肉类产品牛肉、鱼肉中四环素残留的萃取测定,回收率为76.8%~98.2%,检出限为0.039~0.084μg·g~(-1)。