| 重组人干扰素-γ的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 吴丹,高栋,白泉,耿信笃.重组人干扰素-γ的制备与鉴定[J].色谱,2008,26(2):206-211. |
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| 作者姓名： | 吴丹 高栋 白泉 耿信笃 |
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| 作者单位： | Institute of Modern Separation Science, Key Laboratory of Modern Separation Science in Shaanxi Province, Key Laboratory of Synthetic and Natural Functional Molecule Chemistry of Ministry of Education, Northwest University, Xi’an 710069, China |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相色谱、离子交换色谱、固定化镍离子亲和色谱上的保留行为也进行了研究。色谱柱纯化的rhIFN-γ收集液经排阻色谱除盐和冷冻干燥得到rhIFN-γ干粉。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对rhIFN-γ干粉进行了测定,rhIFN-γ单体的相对分子质量为17184.0,二聚体的相对分子质量为34204.4。用细胞病变抑制法(CPEI)测定rhIFN-γ干粉的比活性为9.5×108 IU/mg。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定rhIFN-γ干粉的纯度高于95%。用色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ的质量回收率达到93.7%,纯度高于95%,比活性为4.3×107 IU/mg。结果表明,采用PEG200-STHIC色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ是一种十分高效的方法。
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| 关 键 词： | 纯化 蛋白折叠液相色谱法 复性 高效疏水色谱 重组人干扰素-γ |
| 文章编号： | 1000-8713(2008)02-0206-06 |
| 收稿时间： | 2007-12-3 |
| 修稿时间： | 2007年12月3日 |
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