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微藻高油脂化基因工程研究策略 总被引:1,自引:0,他引:1
石化能源危机与全球气候变化已成为人类的两大重要难题。生物柴油作为可替代普通柴油的环境友好且可再生的能源受到普遍关注。相比植物油和动物脂肪生产,藻类油脂产率高且容易培养,被认为是未来生物柴油发展的重要原料之一。通过转基因技术强化油脂代谢途径,提高富油微藻含油量,已经成为新的研究热点。已有植物研究表明,增强甘油酯酰基转移酶表达,可以提高Kennedy途径代谢中间体通量,从而增加甘油三酯(TAG)的积累。本文综述了微藻油脂代谢途径的国内外研究现状和提高油脂积累的代谢调控策略;详细阐述了基于植物油脂合成强化的成功经验,通过增强微藻Kennedy途径对提高TAG生物合成的重要作用;讨论了当前转基因微藻的遗传转化方法及其需要解决的关键性科学技术问题;分析了基因工程技术调控微藻脂类代谢途径生产高油脂的可能性,并对该研究的发展进行了展望。 相似文献
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利用启动子信号肽探测型质粒pGPB14,从嗜盐碱芽孢杆菌NTT76的总基因组中克隆具有启动子和信号肽功能的NDA片段,共得到41个转化子,其氨苄青霉素抗性水平在1000-12000mg/L之间,从3个不同抗性不平的转化子中提取重组质粒,酶切显示,外源插入片段在100-500bp之间,将重组粒质转化枯草芽孢杆菌,也同样使枯草芽孢杆菌具有分泌β-丙酰胺酶的功能,β-丙酰胺酶活力测定表明,大肠杆菌产生的酶主要积累在周质空间,而枯草芽孢杆菌产生的酶主要分泌在胞外,对外源插入片段进行定列测定发现,所有片段均含有启动子区、核糖体结合位点和信号肽编码区域。 相似文献
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在分离纯化快速开拓系统(AKTA explorer 100)中用凝胶(Sephadex G—50 superfine)纯化人表皮生长因子,并在优化的条件下对人表皮生长因子(hEGF)进行定量测定?与经离子交换柱、SDS—PAGE及凝胶图象扫描分析系统的人表皮生长因子标准品间相互印证。结果表明在优化条件下,在SDS—PAGE上可得到与标准样品hEGF一样清晰的单条带,其产品纯度高于94%,检出限可达1μg/mL。该法不仅对人表皮生长因子的在线检测行之有效,而且对其它蛋白质分离的在线检测也具有参考价值。 相似文献
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人nov基因全长cDNA克隆、测序及其组织表达谱分析 总被引:3,自引:0,他引:3
采用特异性mRNA富集技术,从人早期胚胎中得到人nov基因(novH)的cDNA克隆,序列分析表明,该基因cDNA序列由2389个碱基对组成,包含一段长1071bp的开放阅读框(ORF),3′端含有加尾信号AATAAA和ply(A)尾巴。Northern杂交显示,在Hela细胞和肾上腺组织中有表达的novHmRNA,大小约为2.5kb;多组织RNA点杂交分析结果进一步表明,novH基因在肾上腺和主动脉中的表达水平相对较高,在成人肾、肝、肺和小肠组织中亦有少量的表达。 相似文献
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小分子多肽制备抗体效率很低。我们设计了一种新的制备小肽疫苗的方法——小肽自连疫苗。这种新疫苗无需用其它蛋白质作载体,因此纯度高,单一性强,无其它杂抗原。尤其在需要进行自身免疫时这种疫苗效率较高。根据这种设计,我们合成并克隆了一个多联的生长激素释放抑制因子的基因,经过筛选、鉴定,得到了一个最大为六联体的生长激素释放抑制因子基因。该基因放到大肠杆菌中表达,并做Western检测,得到六联体生长激素释放抑制因子的表达菌株,该菌株的表达产物能与生长激素释放抑制因子的抗体发生免疫反应。 相似文献
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微囊藻毒素是蓝藻水华过程中产生的一类小分子多肽生物毒素,能对人和动物的肝脏造成严重损伤,属于2B类致癌物质。由于全球性工业和生活废水的大量排放以及气候变暖等现实因素,蓝藻水华现象日趋频繁和加剧,使得微囊藻毒素在水体和土壤中大量蓄积,严重威胁生态环境和农产品质量安全。基于"抗体-抗原"识别原理的免疫学检测方法是当前生物毒素快速检测研究的热点,近年抗体创制技术突飞猛进,现已从传统的多克隆抗体和单克隆抗体逐渐发展到了新型的基因工程人工抗体创制阶段。该文系统阐述了微囊藻毒素产生的内外因素及其对生态系统、人和动物的主要危害风险;全面梳理了基因工程抗体创制技术及其在微囊藻毒素检测应用研究上的最新进展;并结合作者及所在科研团队最新研究成果,深入探讨了基因工程抗体在微囊藻毒素检测应用上的发展趋势、存在的问题以及拟解决的对策。 相似文献
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化学发光免疫分析新进展 总被引:6,自引:0,他引:6
本文综述了2007年至今国内外化学发光免疫分析(Chemiluminescence immunoassay,CLIA)的理论研究成果及应用进展,分别从化学发光反应体系、基因工程试剂、新型固相材料、化学发光免疫分析联用检测技术以及多组分化学发光免疫检测技术等方面进行了阐述,并对化学发光免疫分析技术的发展趋势进行了展望.引用文献113篇. 相似文献
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酶法合成L-4-甲砜基苯丙氨酸 总被引:1,自引:0,他引:1
以4-甲砜基苯丙酮酸和L-天冬氨酸为底物,利用重组大肠杆菌DM204(pGEX-KG-aspC/BL21)表达的天冬氨酸转氨酶酶法转化得到了L-4-甲砜基苯丙氨酸,优化得到的酶法最佳转化条件为:转化温度37℃,反应体系pH=8,底物4-甲砜基苯丙酮酸质量分数8%,质量分数0.6%的吐温80和10-4mol/L Mg2+对酶活有促进作用.在最佳工艺条件下经过12 h酶促反应,4-甲砜基苯丙酮酸摩尔转化率达95%.本研究利用化学生物法制备了L-4-甲砜基苯丙氨酸,为制备其它天然氨基酸衍生物提供了新思路. 相似文献