基于微量热法的板蓝根提取方法和活性部位挑选

应用TAM Air微量热系统, 采用微量热法, 考察不同提取方法的板蓝根水煎液及其化学萃取部位在37 ℃时, 对大肠杆菌生长代谢的影响. 结合中医药理论, 分析板蓝根水煎液及其化学萃取部分的药效作用及其差异, 挑选板蓝根药材最佳的提取方法和抑菌最强的活性部位, 并采用试管稀释法求出抑菌活性最强部位的最小抑菌浓度(MIC). 结果表明微量热法可用于常用中药——板蓝根的提取方法和活性部位的挑选, 为进一步研究中药的药性基础提供了一种新的、快速灵敏的技术和方法.     

微量量热法研究黄连中小檗碱类生物碱对金黄色葡萄球菌生长代谢的影响

采用微量量热法研究中药黄连中具有抑菌作用的3种小檗碱类生物碱成分对金黄色葡萄球菌生长代谢的影响．在不同给药条件下,以表达功率．时间曲线（热谱曲线）的特征参数生长速率常数k、半数抑菌浓度（IC50）、最大输出功率（Pmax）及达峰时间（tp）和总产热量（Qt）为指标,对3种小檗碱类生物碱成分抑制金黄色葡萄球菌生长代谢程度进行客观地量化评价．结果表明,k、Pmax和Qt均随3种小檗碱类生物碱成分浓度的增加而相应的减小;tp随3种小檗碱类生物碱成分浓度的增加而相应的延长;其IC50分别为小檗碱101．4μg／mL、巴马汀241．0μg／mL和药根碱792．3μg／mL,即抑菌活性大小顺序为小檗碱〉巴马汀〉药根碱．初步构效关系研究提示,位于苯环的C2、C3上的亚甲二氧基或甲氧基较羟基更有助于提高其抑菌活性．     

黄连-吴茱萸药对不同配伍方式的红外光谱研究

中药复方配伍规律是中医药研究的重点,该文将红外光谱技术特有的宏观指纹特性与中医辨证施治的整体理论相结合,旨在建立一种既能反映中医药整体观的整合调节作用,又具有普遍适用于中药复方和快速、经济特点的研究模式。左金丸与其类方反左金、甘露散和茱萸丸是寒热配伍的经典方剂,它们都是由黄连和吴茱萸以不同比例组成的对药。文章通过分析比较单味药黄连、吴茱萸及其以不同配伍方式组成的黄连-吴茱萸类方的红外光谱图,对这4个药对复方的红外谱图进行特征峰指认,结果发现单味药黄连不仅在左金丸和甘露散中占绝对优势,而且在茱萸丸的水提物中贡献率也比吴茱萸大;此外,在茱萸丸和反左金的醇提物中,黄连亦表现出高于吴茱萸的整体贡献率。     

左金丸及类方HPLC指纹图谱与生物热活性的“谱-效”关系研究

HPLC法建立左金丸及类方水提液的特征指纹图谱, 计算各特征峰的相对峰面积, 并采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版(2004 A)计算类方间的相似度; 微量热法测定大肠杆菌在左金丸及类方水提液作用下的热谱曲线, 得到相应的热动力学参数, 如生长速率常数k, 最大产热功率Pm, 最高峰的出峰时间tm和总产热量Qt等, 并对这些热动力学参数进行主成份分析. 典型相关分析法对左金丸及类方HPLC 指纹图谱中特征峰的相对峰面积与其类方作用下大肠杆菌生长代谢的主要热动力学参数相关联, 研究“谱-效”相关性. 结果表明, HPLC 指纹图谱与生物热活性存在很好的相关性, 类方中吴茱萸次碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量差异是导致其生物热活性不同的主要原因.     

微量热法研究鹿茸4个活性部位对肠道特征菌群生长代谢的影响

建立灵敏表征鹿茸中具有补益活性的4个部位对两种肠道特征菌群生长代谢影响的评价方法.采用微量热法,在不同给药条件作用下,以产热功率-时间曲线(热谱曲线)的特征参数(生长速率常数(k)、最大产热功率(Pmax)、达峰时间(tp)及有效率(E)等)为指标,对肠道主要有益菌(青春双歧杆菌)生长代谢程度进行客观地量化评价.挑选鹿茸促菌最强的活性部位,进一步考察该部位对病原微生物(金黄色葡萄球菌)生长抑制的作用规律.结果表明,鹿茸不同活性部位促进青春双歧杆菌生长代谢强弱顺序为:正丁醇乙醚氯仿乙酸乙酯.活性最强的正丁醇萃取液对病原微生物(金黄色葡萄球菌)抑制影响的研究表明,正丁醇萃取液在浓度大于200μg·mL-1时,对金葡菌生长具有抑制作用.且tp随药液浓度的增加而相应地延长;k,Pmax均随浓度的增加而相应地减小.微量热法具有灵敏准确、实时在线、重现性好等特点,可用于名贵药材——鹿茸的活性部位的筛选,也为药效物质的研究提供了一个新的研究思路和方法.     

乌头类双酯型生物碱对嗜热四膜虫生长代谢的微量热学研究

建立灵敏表征乌头类双酯型生物碱(DDA)对嗜热四膜虫生长代谢影响的评价方法. 采用微量热法, 在不同给药条件下, 以表达功率-时间曲线(热谱曲线)的特征参数生长速率常数(k)、半数抑制浓度(IC₅₀)、最大输出功率(P_max)及达峰时间(t_p)和总产热量(Q_t)为指标, 对嗜热四膜虫生长代谢程度进行客观地量化评价. 结果表明, 随着3种DDA浓度的增加, 达峰时间t_p延长, 生长速率常数k、最大输出功率P_max等随之降低, 且生长速率常数k与相应的浓度间呈现良好的线性关系: r_乌头碱＝0.9910 (IC₅₀＝207.7 μg•mL^－1); r_新乌头碱＝0.9923 (IC₅₀＝412.5 μg•mL^－1); r_次乌头碱＝0.9977 (IC₅₀＝1497 μg•mL^－1). 同时由半抑制浓度IC₅₀得到3种DDA毒性的大小顺序: 乌头碱＞新乌头碱＞次乌头碱. 初步构效关系研究表明, 在化合物C(3)上引入羟基(OH)以及N原子上引入乙基(CH₂CH₃)均可明显增加双酯型生物碱对嗜热四膜虫的毒性作用.     

清开灵注射液中10种有效成分的同时测定及其质量相关性研究

采用HPLC-DAD-ELSD法,在最优波长(255 nm)下同时测定了清开灵注射液的10种有效成分,测定了不同厂家的15个批次清开灵注射液样品,进行了质量相关性分析.所建立的分析方法符合规定标准,所测样品中,不同厂家及同厂家不同批次样品间各组分的含量差异悬殊(RSD值范围为2.17%～65.54%).方法简便可靠,可用于清开灵注射液的质量控制.尽量多地控制这些已知的主要有效成分是保证清开灵注射液质量的关键.     

微量热法比较黄连中四种生物碱的抗菌作用

采用微量热法研究和比较中药黄连中四种生物碱(BAs)的抗菌(大肠杆菌)作用。这四种生物碱分别为小檗碱、黄连碱、巴马汀和药根碱。用LKB-2277生物活性检测系统,以停留法测定了37 ℃时大肠杆菌在BAs作用下的热流功率-时间曲线,并记录生长速率常数k, 指数生长期和稳定期的最大热功率Pm, log、Pm, stat, 生长抑制率I, 传代时间tg,指数生长期的总产热量Qt, log,半数抑菌浓度IC50等热动力学参数。结果显示这四种生物碱具有相异的抗大肠杆菌生长代谢的作用,k, Pm, log和Qt, log值随BAs浓度的增加而相应的减少。综合分析k, Pm, log, Qt, log, I 和IC50值可以看出,BAs抑制大肠杆菌生长代谢强度按小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱的顺序依次减弱。构效关系研究表明,母环C-2和C-3上连接的亚甲二氧基比甲氧基更能显著增强相应化合物的抗菌作用,而C-9和C-10上连接的亚甲二氧基或甲氧基对这种抗菌作用影响不大。     

基于微量热法和主成分分析的盐酸巴马汀抗白色念珠菌作用的研究

采用LKB-2277生物活性检测系统, 测定了37 ℃时白色念珠菌在巴马汀作用下生长代谢的热谱曲线, 并获得9个相应的定量热动力学参数, 经主成分分析综合评价巴马汀的抗白色念珠菌作用. 结果表明巴马汀的抗白色念珠菌作用主要受热谱曲线第二指数生长期的生长速率常数k2和最大产热功率 的影响, 通过分析这两个主要参数的数值变化, 能更方便、快捷和准确地评价巴马汀的抗白色念珠菌作用, 为进一步评价其它药物和化合物的抗菌作用提供了有用的方法和基础.     

微量量热法研究增溶性辅料吐温80对红细胞生理活性的影响

建立灵敏、专属性较好地表征增溶性辅料吐温80对红细胞生理活性影响的评价方法.采用微量量热法以生命体能量代谢特征参数衰亡速率常数(k)、最大热功率(Pmax)、总发热量(Q)、衰亡时间(t)为评价指标,考察增溶性辅料吐温80作用下红细胞的能量动态变化过程.结果表明,随着吐温80浓度(C)的增大,红细胞生长代谢特征参数总发热量(Q)降低、最大热功率(Pmax)增强、衰亡时间(t)减小、衰亡速率常数(k)减小,Q,k与ln C间量效关系良好(相关系数r>0.95);不同厂家吐温80作用于红细胞的总发热量(Q)存在显著性差异(P<0.05).与肉眼观察法、分光光度法、细胞计数等常规方法比较,微量量热法较能实时在线、全息地监测增溶性辅料对红细胞生理活性的动态过程,尤其是对亚致死效应细胞测定的分辨能力.该法可用于增溶性辅料吐温80质量标准的生物测定,亦为红细胞能量代谢等相关研究提供了实验参考.