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建立用分光光度法测定重组水蛭素(rH)在大鼠尿中含量的方法,并用该法研究静脉给药后,rH在大鼠尿中的排泄。以甲苯磺酰基-氨基乙酰基-脯氨酰基-精氨酰-对-硝基苯胺(Chromozym TH)为底物,凝血酶能水解Chromozym TH释放出对-硝基苯胺(pNA),pNA在405nm波长处有特异性吸收,通过测定反应体系中未被rH抑制的凝血酶的量,间接测定rH的含量。结果表明,分光光度法能有效的测定大鼠尿中rH的含量,rH的浓度在6.25～75ng.mL-1范围内呈线性关系(R2=0.999 6);日间和日内精密度RSD均<10%,方法回收率>95%,稀释回收率>93%。应用上述方法测定大鼠iv 0.5,1.0及2.0mg.kg-1 rH后尿药浓度及排泄动力学,0～12h累计排量分别为(116.850±57.160),(235.544±39.375)和(474.986±85.426)μg.kg-1,与给药剂量成正比;三种剂量的累计排泄率均为给药量的23%左右,与剂量无关,说明rH在大鼠体内的消除方式为一级线性动力学。本方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可用于尿中rH的测定。 相似文献
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