高纯度烟草过氧化物酶（TOP I）光谱特性研究

采用交换吸附脱色及柱层析新技术，成功地从烟叶中分离和纯化了一种烟草过氧化物酶同工酶(TOP I)，并对其进行了一系列光谱特性研究。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测得TOP I分子量为21888．5，等电点pI为3．5；氨基酸组成分析表明TOP I为一含血红素的酸性蛋白酶。光谱学分析揭示，在402nm处有一典型的Soret带，在498和636nm处有特征吸收峰(α，β带)，酸度和变性剂对TOP I在紫外可见区的特征吸收峰均产生一定的影响，TOP I的荧光光谱测定结果说明TOP I分子中含有Trp残基和Tyr残基以及其自身的独特的光谱学特性。     

高纯度烟草过氧化物酶(TOPⅠ)光谱特性研究

采用交换吸附脱色及柱层析新技术,成功地从烟叶中分离和纯化了一种烟草过氧化物酶同工酶(TOPⅠ),并对其进行了一系列光谱特性研究.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测得TOPⅠ分子量为21 888.5,等电点pI为3.5;氨基酸组成分析表明TOPⅠ为一含血红素的酸性蛋白酶.光谱学分析揭示,在402 nm处有一典型的Soret带,在498和636 nm处有特征吸收峰(α,β带),酸度和变性剂对TOPI在紫外可见区的特征吸收峰均产生一定的影响,TOP Ⅰ的荧光光谱测定结果说明TOPⅠ分子中含有Trp残基和Tyr残基以及其自身的独特的光谱学特性.     

Cu2+与烟草多酚氧化酶相互作用研究

本文通过酶活性测定，荧光光谱和紫外光谱研究了外加Cu²⁺与烟草多酚氧化酶(简称PPO)的相互作用。结果表明，微量铜的加入能增加酶的活性，[Cu²⁺]/[PPO]为0.20左右时酶活性最大，[Cu²⁺]/[PPO]为0.91时，Cu²⁺开始表现出对PPO活性的抑制;Cu²⁺对PPO内源荧光的猝灭机制属于形成络合物所引起的静态猝灭，猝灭常数K_sv为8.0375×10³L·mol^-1;Cu²⁺的加入使PPO蛋白质分子构象发生变化，α-螺旋含量增加，多肽链及Trp和Tyr残基的芳杂环进一步向分子内收缩，疏水基团之间的疏水作用增强。     

外源镧(Ⅲ)对辣根过氧化物酶的结构的影响

运用荧光光谱、傅立叶变换红外光谱以及曲线拟合等技术研究了镧离子对辣根过氧化物酶的结构的影响．结果表明荧光增强的原因是由于镧离子的加入使镧离子和酶结合，酶的二级结构发生变化，导致荧光发色基团所处的微环境也相应变化；并运用它推测了镧离子对该酶的激活作用机制．     

烟草CuZnSOD同工酶的分离纯化与鉴定

利用硫酸铵盐析分级分离、乙醇-氯仿沉淀除杂、丙酮再沉淀分级得到含铜锌超氧化物歧化酶(cuZnSOD)的粗酶液,通过DEAE-52离子交换层析实现了3种CuZnSOD同工酶的拆分;进一步通过G-75凝胶层析对3种同工酶分离纯化得到2种电泳纯产品CuZnSOD I和CuZnSODⅢ;SDS—PAGE实验发现CuZnSOD I由两个不等亚基组成,亚基相对分子质量分别为15050、20950;CuZnSOD Ⅲ存在一种亚基,亚基相对分子质量为22950;实验检测到2种纯酶分子含有不等量的cu和zn,酶学特性实验也证实了2种蛋白酶都是CuZnSOD。     

二甲苯蓝FF指示催化光度法测定烟草中微量锰

本文以二甲苯蓝ＦＦ作吸光物质，使用分光光度法研究了烟草中的微量元素锰的简易测定方法。     

氰根与烟草过氧化物酶作用的傅里叶变换红外光谱研究

应用傅里叶变换红外光谱以及曲线拟合等技术,研究了氰根与烟草过氧化物酶同工酶Ⅱ(TOP Ⅱ)作用前后的二级结构的变化情况,定量地分析了各个二级结构的变化情况。结合氰根对TOPⅡ活性的抑制情况,从二级结构的角度解析了烟草过氧化物酶的结构与活性之间的关系。     

烟草中氨、钾组分的离子色谱法快速分析

 采用稀硝酸浸提、离子色谱法 (IC)快速分析烟草中的钾及游离态氨。该法制样简便、测定快速 ,两种物质的标准曲线线性关系良好。方法的最低检测浓度 :K+,0 0 5mg/L ;NH3,0 0 3mg/L。回收率 :K+,92 7%～10 6 7% ;NH3,96 5 %～ 10 9 0 %。整个分析过程仅需 5min ,样品测试结果令人满意。     

酸性染料与吐温-80相互作用的研究

通过对铬天青S（CAS）、麝香草酚兰（TB）等与吐温－80（Tween-80)的相互作用的研究,测定了二者之间的络合常数K和结合比N,证明了这二者之间有很强的相互作用力,并通过比较染料在不同溶剂的吸收光谱,推断了表面活性剂与染料相互作用点的位置,证明了极性较大的CAS位于聚氧乙烯链的外围“栅栏”中,而极性较小的TB则位于胶束的烷基“内核”。     

自动化色谱谱图解析——谱峰的自动识别与快速解析

结合基于高阶导数的谱峰识别方法和面积重现法,建立了一种完全自动化的对色谱曲线进行分割、识别与快速解析的方法。其中,DW(Durbin-Watson)测试的引入和区分信号与噪声判据的采用减少了在色谱解析过程中的人为干预,降低了对操作人员专业知识和经验的要求,为实现色谱解析的自动化奠定了基础。通过对模拟色谱和实验色谱的比较,验证了该方法是一个很有用的工具,可以为色谱分析工作提供有力的帮助。