HPLC法测定鸡精中谷氨酸钠的含量

以邻苯二甲醛与谷氨酸钠中的氨基进行柱前在线衍生化反应,采用C18色谱柱分离、荧光检测器（激发340nm,发射450nm）进行测定,建立了柱前衍生反相高效液相色谱测定鸡精中谷氨酸钠含量的方法。该方法相对标准偏差为0．69％,加标回收率为99．1％～101％,在0．10~50．0mg／L范围内,谷氨酸钠的峰面积和浓度之间的相关系数为0．9999,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为1．22％和0．71％,鸡精中谷氨酸钠定量下限为0．2μg／g。     

柱前衍生化HPLC法测定酵母细胞壁中的甘露聚糖与β-葡聚糖

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立了同时测定酵母细胞壁中甘露聚糖和β-葡聚糖的方法。样品中的多聚糖经盐酸高温水解得到甘露糖和葡萄糖,经PMP衍生后,以0.02 mol/L乙酸铵-乙腈(80.5∶19.5)为流动相等度洗脱,反相C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,紫外检测器(波长250 nm)检测,所测2种单糖的含量通过换算后得到甘露聚糖和β-葡聚糖的含量。结果表明,甘露糖和葡萄糖在10.0~1 000 mg/L质量浓度范围内与对应峰面积呈良好的线性关系,相关系数(r2)大于0.999。样品在28.0~80.0 mg范围内加标水平的平均回收率为88.1%~91.0%,相对标准偏差(RSD)小于3%,甘露糖和葡萄糖的检出限(LOD)分别为0.10 mg/L和0.08 mg/L。该方法灵敏度高、准确性好、实用可靠,适用于酵母细胞壁样品中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的分析测定。     

高效液相色谱-质谱联用测定婴幼儿配方奶粉中的左旋肉碱

建立了婴幼儿配方奶粉中左旋肉碱含量的高效液相色谱-质谱联用测定方法。采用C4色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm)进行分离,以甲醇-水(10∶90)为流动相,柱温25℃,流速1.0 mL.min-1,进样量为10μL,柱后分流比为1∶3,质谱采用多离子反应监测(MRM)方式进行检测,正离子模式,定量离子为m/z 162.2→103.1。在优化条件下,样品在10 min内完成分析,左旋肉碱在0.40～10.0 mg.L-1范围内线性关系良好(r=0.999 3)。方法的加标回收率为87%～106%,检出限(S/N=3)和定量下限(S/N=10)分别为39.0、116.9 ng。该方法操作简便、灵敏度高、重复性好,可用于婴幼儿配方奶粉中左旋肉碱的测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定食品中胆固醇含量

建立了可满足各类食品（包括动物性食品、动植物混合食品）中胆固醇的HPLC—ELSD快速测定方法。样品经50％（w）KQH直接皂化和石油醚萃取后进行色谱分析。色i普柱为ODS柱,流动相为乙醇和乙脯,通过优化梯度洗脱条件,在20min内实现了胆固醇与干扰物质（如植物甾醇）的有效分离,分离度月大于1．5。胆固醇色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系（r〉0．9996）,检出限（LOD）为0.20μg（S／N=3）,定量下限（LOQ）为0．56μg（S／N=10）,回收率为93％-96％（n=6）,重复性RSD〈3．0％（n=6）。     

HPLC／FLD法测定环境样品和食品中的苯并[a]芘

样品用环已烷提取,提取液经硅镁型吸附剂-氧化铝柱净化后上机分析。色谱条件：Ultimate—C18柱,梯度洗脱,A相为水-乙腈（体积比40：60）,B相为乙腈,荧光检测器（λex=350nm,λem=430nm）。在此色谱条件下,比较了Waters—PAHs（多环芳烃）柱与Ultimate—C18柱分离16种PAHs（多环芳烃）的异同,发现苯并[a]芘在Ultimate—C18柱上与其他多环芳烃同样有良好的分离效果。仪器检出限为2pg,方法检出限：气体样品0．1ng／m^3;水样0．2ng／L;食用油0．2μg／kg;海洋生物、陆地生物、家禽等生物样品为0．02μg／kg。     

血浆游离氨基酸的柱前衍生反相高效液相色谱分析及其在临床检测中的应用

用邻苯二甲醛(OPA)-9-芴基甲氧基羰酰氯(FMOC)柱前衍生反相高效液相色谱法测定了婴幼儿血浆中的游离氨基酸。衍生由自动进样器在线自动完成;氨基酸的衍生物用Hypersil ODS反相柱分离,荧光检测器检测;流动相A为10 mmol.L-1pH 7.2的磷酸盐溶液(PB),含0.5%(φ)四氢呋喃;流动相B为PB-甲醇-乙腈(体积比50∶35∶15);用二元线性梯度程序洗脱,0 min时A为100%,B为0%;25 min时A为0%,B为100%。本法在25 min内使22种氨基酸全部得到良好分离,分离度大于1.5,最小检出限为1 nmol.mL-1,在20~300 nmol.mL-1浓度范围内,22种氨基酸的峰面积和浓度之间的线性相关系数在0.982~0.999之间,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.05%~0.50%和0.7%~2.9%,回收率为98%~101%。用本法在医院送检的血浆样品中检出了高甘氨酸血症、苯丙酮尿症、精氨琥珀酸血症、胍氨酸血症、同型半胱氨酸尿症、枫糖尿症和酪氨酸血症等氨基酸遗传代谢缺陷症。     

高脂肪食品中合成着色剂的检测

建立了高脂肪食品中合成着色剂的高效液相色谱检测方法。在碱性溶液中用正己烷萃取食品中的脂肪,分层后移除脂肪层,从剩余溶液中提取的柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝七种水溶性合成着色剂经高效液相色谱分离后,用二极管阵列检测器(DAD)检测,与标准溶液的保留时间、吸收光谱的特征及峰面积比较进行定性、定量;在优化的萃取pH值与色谱分析条件下,平均回收率在92.8%~102.1%之间,检出限为0.1 mg/kg。该法前处理简单,回收率高,操作简便,测定结果令人满意。     

HPLC/FLD法测定环境样品和食品中的苯并[а]芘

样品用环己烷提取,提取液经硅镁型吸附剂-氧化铝柱净化后上机分析.色谱条件:Ultimate-C18柱,梯度洗脱,A相为水-乙腈(体积比40 : 60),B相为乙腈,荧光检测器(λex=350 nm,λem=430 nm).在此色谱条件下,比较了Waters-PAHs(多环芳烃)柱与Ultimate-C18柱分离16种PAHs(多环芳烃)的异同,发现苯并[a]芘在Ultimate-C18柱上与其他多环芳烃同样有良好的分离效果.仪器检出限为2 pg,方法检出限:气体样品0.1 ng/m3;水样0.2 ng/L;食用油0.2 μg/kg;海洋生物、陆地生物、家禽等生物样品为0.02 μg/kg.     

保健酒中氨基酸的HPLC法测定

保健酒去乙醇处理后用盐酸溶液将其中的蛋白质和肽类化合物水解成游离态氨基酸,以避免酸水解过程中产生的不溶性气体导致水解管爆裂问题.采用柱前衍生反相高效液相色谱法测定游离氨基酸含量.在10 ～250 μmol·L-1浓度范围内,16种氨基酸的峰面积和浓度之间的线性相关系数为0.982 ～0.999,16种氨基酸的定量下限 (S/N=10)为0.5 mg·L-1,加标回收率为94% ～101%,除蛋氨酸外,其它氨基酸的RSD均小于3.0%.     

柱前衍生高效液相色谱法对动物组织中胶原蛋白的测定

动物组织中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用邻苯二甲醛（OPA）与其中的一级氨基酸衍生,再用9-芴基甲氧基羰酰氯（FMOC）与其中的羟脯氨酸衍生,用反相高效液相色谱法测定羟脯氨酸含量。羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量计算胶原蛋白含量。在0.01-50 mg.L^-1范围内,羟脯氨酸的峰面积和质量浓度之间的相关系数为0.9993,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.30%和2.9%。该法选用FMOC与氨基酸衍生产物的特征波长检测,能够完全屏蔽一级氨基酸衍生物的干扰,可快速、准确、高效地测定羟脯氨酸及胶原蛋白的含量。