双链、三链、四链DNA与溴乙锭相互作用的荧光研究

寡聚核苷酸在不同的介质条件下可形成双链、三链、四链等多种不同结构 ,它们都能与溴乙锭发生相互作用使其荧光强度发生变化 .通过荧光光谱和静态荧光技术的研究发现这些相互作用存在着不同的作用机制 ,其中B型双链和三链与溴乙锭的作用主要是一种嵌入式的 ,能量转移效率较高 ,荧光强度增加较大且不易被猝灭剂猝灭 ;平行双链与溴乙锭的作用主要是一种外挂式的 ,能量转移效率极低 ,荧光强度和猝灭常数几乎与自由溴乙锭相等 ;而四链与溴乙锭的作用机制较为复杂 ,从能量转移和荧光猝灭实验上看可能同时存在上述两种方式     

三链λ－DNA的UV，CD，Raman及荧光光谱分析

本文报道了λ－ＤＮＡ三链结构水溶液的ＵＶ，ＣＤ，荧光及Ｒａｍａｎ等光谱特性。比较该三链新结构与单，双链ＤＮＡ不同的光谱性质，确证了前者不同寻常的结构特征。     

λ-DNA/Hind Ⅲ,pBR322质粒DNA及变性DNA与酶复合物AFM研究

探索了DNA在云母表面的展层方法。采用低分子量的阳离子去垢剂苯二甲基苄基溴化胺(BAB)和甲酰胺混合溶液,建立了无蛋白微量展层技术,不仅可重复获得适合于原子力显微镜(AFM)观察的DNA样品,而且该方法适合于蛋白质-DNA相互作用的AFM研究。研究发现将)~-DNA/Hind Ⅲ,PBR322质粒DNA在35℃水浴中保温30min以上,再用BAB展层,可使盘绕在一起的DNA链在云母表面完全展开;采用AFM获得了双链DNA和质粒DNA的高分辨图象,并首次观察到了体外变性后的DNA与核酸酶(DNase Ⅰ)所形成复合物的结构。     

荧光猝灭研究溴乙锭与三链DNA的相互作用

荧光猝灭研究溴乙锭与三链ＤＮＡ的相互作用方晔，白春礼，张平城，曹恩华，何裕建，唐有祺（中国科学院化学研究所，北京１０００８０；中国科学院生物物理所，北京００１０１）三链ＤＮＡ作为ＤＮＡ结构多样性的一个主要研究方向，由于越来越多的证据表明：它能在细胞内...     

Fluorescence studies on the interaction of ethidium bromide with duplex, triplex and quadruplex DNA structures

Under different conditions, oligonucleotides can form several alternative DNA structures such as duplex, triplex and quadruplex. All these structures can interact with ethidium bromide (EB) and make its fluorescence intensity change. The fluorescence spectra and other related parameters provided by static fluorescence techniques showed that the interaction mechanisms between EB and these structures were not always the same. Among them, B type duplex and triplex DNA adopt an intercalative mode when binding to the EB, which has a relatively high efficiency of energy transfer and the fluorescence of EB cannot be quenched easily. While for the parallel duplex DNA, the interaction mode is an outside binding in which energy transfer can hardly happen and its fluorescence intensity as well as Stern-Volmer constant is almost the same to the free EB. For the quadruplex, the binding mechanism to EB is more complex. Results from the energy transfer and quenching studies indicate that the two interaction modes note     

三链DNA d(A)10·2d(T)10-溴乙锭的能量转移

在水溶液中,由两条互补的单链DNA 构成的双螺旋沿着大沟有额外的氢键受体和给体,这些给体和受体暴露于周围环境,从而可以和专一性的结合分子(如蛋白)发生相互作用,形成特异性的复合物,也可以与另外的单链DNA 分子结合形成三链DNA.近年来,由于越来越多的证据表明:三链DNA 能在细胞体内形成,并具有多种生物学功能而引起了人们的广泛关注,成为生物化学、分子生物学和基因工程领域的一个前沿课题.通过三链DNA的形成,寡聚核酸可以参与基因转录过程,但是在生理条件下,三链DNA 的稳定性似乎是     

一种使用高灵敏度荧光显微镜系统进行活细胞研究的方法

利用显微镜进行细胞观察和实验，一般的做法都是将细胞做成切片，细胞难免会受到损伤，从而影响实验及观察结果。为了使细胞研究更为准确，便于临床应用，开发、研制活细胞的观察工具是必由之路。以高灵敏度荧光显微镜为基础，合理设计了一种新型暗场照明器。这种新型暗场照明器的工作距离可达３００ｍｍ，完全可以满足为活细胞滴加试剂的需要，已采得经过荧光染色的活细胞图像。这一设计解决了一个非常实际的问题，为活细胞的医学研究奠定了坚实的基础。     

图像融合方法在细胞图像处理中的应用

图像融合作为一项先进技术被引入到生物细胞图像处理中，可实现图像的信息融合，完成图像配准，提高图像置信度，改善检测性能和空间分辨能力，最大限度地发掘细胞图像的信息资源，本文采用像素级的图像融合方法，将细胞荧光图像和透射图像信息融为一体，操作简便，能准确地判断细胞内部荧光位置，有利于分析其生物机理和含义。     

三链DNA dA_(10)·2dT_(10)与溴乙锭相互作用的研究

本文报道了双螺旋dA_(10)·dT_(10)和三螺旋dA_(10)·2dT_(10)的合成以及在适当的缓冲溶液中,双螺旋和三螺旋DNA的形成条件、稳定性以及与溴乙锭——一种常见的双螺旋DNA嵌入剂间的相互作用。荧光光谱研究表明溴乙锭能作为一种有效检测三链DNA形成的荧光探针,并且三链和双螺旋DNA都能增加溴乙锭的荧光,但前者增加较少。热变性实验证实溴乙锭能增加三螺旋的稳定性。荧光能量转移研究表明存在从DNA向溴乙锭的能量转移现象,但三螺旋DNA的转移效率要比双螺旋的低。阴离子猝灭剂[Fe(CN)_6]~(4-)并不能降低溴乙锭-三螺旋DNA复合物的荧光强度。这些实验结果表明:该三螺旋DNA和溴乙锭间存在明显的亲合性,且溴乙锭通过一种嵌入机理与该三螺旋发生相互作用,并由此增加它的稳定性。     

原子力显微镜针尖和变性DNA链间相互作用

通过原子力显微镜适时记录扫描针尖对变性ＤＮＡ的搬移和切割作用。发现不同扫描范围，影响程度并不一样。针尖对ＤＮＡ链的破坏程度亦与扫描时间有长短有关。由此讨论了ＡＦＭ成象时各种作用力的影响，以及通过控制针尖对ＤＮＡ的作用在结构生物学研究中的意义。