基于抗肿瘤活性化合物MED烟酸类衍生物的设计及作用靶点

通过变性荧光素酶的再复性实验发现真菌环氧二烯(Mycoepoxydiene,MED)对热休克蛋白(Heat shock protein 90,Hsp90)具有抑制作用.Western Blot实验结果表明,MED影响人宫颈癌细胞株HeLa中Hsp70及Hsp90的客户蛋白质(Akt,Raf-1)的表达,表明MED是Hsp90的抑制剂.通过靶向对接技术预测了MED与人Hsp90 N端ATP结合位点的结合情况,并在此基础上发现,MED的烟酸类衍生物4-NDM与Hsp90的结合具有比MED与Hsp90更强的亲和作用.体外实验结果证明,MED的烟酸类衍生物4-NDM及3-NDM对HeLa细胞表现出比MED更强的细胞毒活性;可通过上调Hsp70,并下调Akt和Raf-1而影响HeLa细胞中Hsp90相关蛋白质的表达.由此推测,MED及其烟酸类衍生物可以通过抑制Hsp90,而使其客户蛋白Akt或Raf-1发生降解,发挥其抗肿瘤作用.     

姜黄素对酵母细胞影响的荧光分析

以最简单的真核生物——酿酒酵母为材料,利用姜黄素的荧光性质,借助荧光光谱法和荧光显微镜研究了姜黄素在酵母细胞中的定位及其对酵母生长的影响.结果表明,姜黄素可以进入酵母细胞中并抑制酵母生长,初步得到了姜黄素对酵母作用的量效关系和时间效应结果,证明了姜黄素可以与酵母细胞线粒体结合.本文结果为以酵母为模型研究姜黄素通过线粒体影响细胞代谢及其与细胞凋亡的关系奠定了基础.     

姜黄素对食管癌KYSE410细胞的生长抑制与氧化调节

通过四氮唑蓝盐化合物(MTS)和重要氧化还原酶及其代谢物的试剂盒检测等方法, 考察了姜黄素对食管癌KYSE410细胞生长以及对细胞氧化还原状态和代谢的影响. 结果表明, 姜黄素对KYSE410细胞具有较强的抑制作用, 其IC₅₀=17.9 μmol/L. 进一步研究发现, 姜黄素可引起细胞培养上层清液中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平发生变化. 当姜黄素浓度为40 μmol/L时, MDA水平比对照组提高了125.1%, 而SOD水平则降低了43.2%; 同时, 乳酸水平降低了44.4%, 乳酸脱氢酶的活性下降了58.2%, 丙酮酸激酶的活性升高了216.7%. 姜黄素可能通过干扰氧化还原途径, 致使发生脂质过氧化反应, 并抑制肿瘤细胞糖酵解作用, 进而抑制食管癌KYSE410细胞增殖.     

二色补血草多糖的结构表征及其对Hela细胞的抑制作用

从中药二色补血草中分离提取到一种水溶性多糖(LP).¹HNMR,¹³CNMR,IR,HPLC和GC-MS等方法分析表明,LP是以α-D-[GlcA(1→6)Glc]二糖为结构单位,每个重复的二糖单位彼此以α-(1→4)糖苷键连接成直链多糖.荧光光谱显示LP的荧光谱峰出现在460nm附近,Zn²⁺,Ca²⁺通过与LP络合,其荧光强度增加.MTT实验表明,LP具有抑制肿瘤细胞活性,对Hela细胞抑制的IC₅₀为62.2μg/mL.     

Rugulosin对N-Hsp90的抑制与结合作用

经Docking模拟发现Rugulosin能与Hsp90N端的ATPase活性结构域结合,体外实验表明,其抑制Hsp90的ATPase活性的IC50为22.77μM。应用荧光,圆二色,紫外－可见吸收等光谱法及SPR技术研究Rugulosin与Hsp90N端蛋白（N-Terminal of Hsp90,NHsp90）的相互作用机制．荧光光谱实验结果表明Rugulosin对Hsp90的内源荧光具有较强的猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭。热力学计算得知,Rugulosin通过静电引力与NHsp90结合, 解离常数为22.4±0.17μM。圆二色光谱检测发现, Rugulosin会影响NHsp90的α-螺旋数, Rugulosin浓度的增加,NHsp90蛋白的α-螺旋减少。本研究结果表明Rugulosin可以与Hsp90结合,进而抑制其ATPase活性。Ruglulosin可能是潜在的Hsp90的抑制剂。     

锌(Ⅱ)没食子酸的配位行为及其与DNA的相互作用

用紫外光谱，荧光光谱以及高效液相色谱法．研究了没食子酸(GA)、Zn^2-在接近生理条件下的配位行为及其与DNA的作用．探讨了溶液的pH值对配位行为的影响．计算了GA和Zn^2-在溶液中的配位数，推测了二元配合物与DNA的作用方式．以及DNA对GA-Zn^2-体系的荧光淬灭常数．结果表明GA单独存在时，几乎不与DNA发生作用．当GA与Zn^2-按1：1形成配合物后．可以与DNA发生作用．三元复合物的形成，使体系的吸收光谱红移，荧光强度降低．HPLC的保留时间改变．GA任Zn^2-介导下与DNA发生了较强的相互作用．