2-氯化-n-氨基葡萄糖乙酰基三苯基季膦盐与DNA作用的荧光光谱研究及其应用

本文合成了2-氯化-n-氨基葡萄糖乙酰基三苯基季膦盐(2-GATPC)。利用荧光光谱法研究了2-GATPC与DNA的作用。实验结果表明,在pH3左右,DNA以静态猝灭的方式使2-GATPC的荧光强度显著降低。DNA的浓度在1.6×10-6~4.8×10-5mol.L-1的范围内,对2-GATPC的荧光有良好的线性猝灭关系,据此可以测定DNA,检出限可达8.4×10-7mol.L-1。方法简便快速,背景干扰小,对合成样品中DNA的测定,结果令人满意。     

热敏电阻温度计代替贝克曼温度计应用一例

用热敏电阻温度计代替贝克曼温度计,在量热实验中应用已有先例,但由于其阻值与温度为非线性关系,故实验手续复杂,应用受到限制。我们在“凝固点下降测分子量”实验中,所用热敏电阻在0-10℃间阻值与温度呈直线关系,简化了实验手续,效果令人满意。做法如下:     

流动注射荧光法测定羟基自由基

研究Sn2 + 催化H2 O2 产生的·OH的反应 ,·OH与Ce3+ 作用后氧化生成无荧光的Ce4 + 。通过测定Ce3+ 的荧光强度的变化可间接测定所产生的羟自由基 ,并结合流动注射技术 ,确定了体系最佳实验条件。测定抗氧化剂清除羟自由基的实验 ,证明该体系可作为在线筛选抗氧化剂的方法之一。     

二氧化钛光催化体系中的羟基自由基的测定

通过ESR光谱测定表明TiO2悬浮液在紫外光照射下产生羟基自由基氧化物种.羟基自由基氧化酸性桃红(sulforhodamine B,SRB)使其褪色,在565 nm处用分光光度法测定其吸光度值的变化,可间接测定羟基自由基的生成量.确定了体系的最佳实验条件pH为2.5;SRB浓度为2.0×10-5mol/L;TiO2浓度为0.1 g/L;光照时间为12 min.采用抗坏血酸为羟基自由基清除剂,测定了其自由基清除率,表明拟定该体系可作为筛选抗氧化剂的方法之一.     

La-phen-邻苯二甲酸混配化合物与DNA作用的共振光散射光谱及分析应用

本文研究了镧的混配物LaL1L2·3H2O(L1为邻苯二甲酸,L2为邻菲咯啉)与DNA作用的共振光散射光谱。加入DNA后,在pH6.5～7.5的范围内,LaL1L2·3H2O在DNA分子表面发生长距离自组装,在470nm处产生了增强的共振光散射峰,其发光强度与DNA的浓度成线性关系。该方法的线性范围为23～1870ng·mL-1,检出限(3σ)为23ng·mL-1,可用于测定纳克级的DNA。     

荧光素共振光散射法测定脱氧核糖核酸

研究了咕吨类染料荧光素Fluorescein(FL)与DNA作用的共振光散射光谱。加入DNA后,在pH6～8的范围内,荧光素在DNA分子表面发生长距离自组装,在400nm处产生了增强的共振光散射峰,其发光强度与DNA的浓度呈线性关系,线性范围为0．04～3．1mg／L;检出限为16μg／L。考察了影响因素和最佳反应条件,建立了用RLS光谱测定ng级DNA的新方法。     

重组HEV衣壳蛋白截短体的表达及鉴定

戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)感染引起的肠道病毒性传染病. HEV是一种无囊膜的单股正链RNA病毒, 其编码区由3个开放阅读框(ORF)组成, 属戊型肝炎病毒科. HEV衣壳蛋白由ORF2编码. 本研究根据编码HEV ORF2 aa382~aa674的核苷酸序列克隆了p293基因, 并将其克隆入原核表达载体pET28a, 利用大肠杆菌BL21(DE3)对HEV衣壳蛋白截短体(p293)进行了表达. SDS-PAGE和Western blot检测结果表明, 在优化的表达条件下(1 mmol/L IPTG, 250 r/min, 37℃, 5 h), 重组蛋白p293能够在大肠杆菌内有效表达, 目的蛋白约占总蛋白的66.15%. TEM检测结果显示, 原核表达的p293能够在体外形成约30~40 nm的病毒样颗粒. 免疫印迹和免疫荧光检测结果表明, p293与HEV标准阳性血清具有良好的反应原性和反应特异性. 实验结果表明, p293可应用于HEV宿主吸附和病毒装配研究, 为HEV的预防与诊断研究奠定了基础.     

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 H.B.Jayaraman在20世纪80年代推导的悬链线索元有限元 法计算精度高，特别适用于精度要求比较高的大型索结构. 但是， 当索原长Lu的取值与悬索两节点之间的直线长度相近时，迭 代不易收敛，甚至发散. 提出了当该迭代不收敛时，应采用的迭 代策略. 计算结果表明，该方法准确，计算精度高，可供悬索结 构设计、施工时参考.     

LED结温与光谱特性关系的测量

采用恒定驱动电流改变环境温度和恒定环境温度改变驱动电流两种方法分别对直径5 mm封装的AlGaInP型红光和黄光LED,InGaN型绿光和蓝光LED,以及InGaN蓝光+荧光粉的白光LED的结温与其光谱特性进行了测量,得到了不同条件下LED结温与光谱特性的关系.结果表明;AlGaInP LED的峰值波长与结温有良好线性关系,InGaN LED的峰值波长则与结温没有明显对应关系;但白光LED发射光谱的白、蓝功率比与结温有良好线性关系;对AlGaInP LED及蓝光激发的白光LED,通过光谱特性测量可快速、准确地确定光源系统中各LED的结温继而预测光源系统的有效寿命.     

抗肿瘤双特异免疫导向治疗制剂CAtin的表达及活性分析

结合生物信息学方法与已知癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen, CEA)特异性单链抗体(Single chain Fv fragment, scFv)核苷酸序列, 经分子设计和密码子优化后, 通过化学方法合成CEA二硫键稳定性单链抗体(Disulfide stabilized single chain Fv fragments, scdsFv)基因片段. 将凋亡素基因(Apoptin)通过一段柔性连接肽(Linker)连接在CEA scdsFv基因下游, 并克隆入大肠杆菌表达载体质粒pET28a, 转化BL21感受态菌后经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导, 表达融合蛋白CAtin. SDS-PAGE和Western-Blot分析表明, 目的蛋白得到良好表达, 经条件优化后表达量最高可达44.1 mg/L. 融合蛋白经分步洗涤法和谷胱甘肽对表达的目的蛋白进行初步纯化和复性后, 利用人肝癌细胞(HCC)对所制备融合蛋白进行亲和力测定、细胞结合活性测定和特异性细胞杀伤活性分析. 结果显示, 所制备融合蛋白不仅能够有效地与上述肿瘤细胞结合, 并对其具有明显的杀伤活性, 表明成功制备了具有特异性识别和特异性杀伤活性的双特异抗肿瘤免疫导向制剂.