铈诱导悬浮培养的东北红豆杉细胞发生凋亡

以悬浮培养的东北红豆杉（Taxus cuspidata)细胞为材料,加入一定浓度的Ce^4 ,在不同培养时间取样,超薄切片透射电镜观察发现细胞核膜完整,染色质凝聚,趋边化,核酸电泳显示DNA发生特异性降解并形成阶梯状电泳条带（DNA ladder); 应用TUNEL检测方法发现DNA的3′－OH断端可被特异性标记。Ce^4 能诱导东北红豆杉细胞发生凋亡。     

酵母对抑制剂耐受的系统分析

纤维素生产乙醇的关键问题之一是水解产生的抑制性物质对乙醇发酵具有明显的抑制效应,因而引起了国内外研究者的广泛关注。研究发现,在抑制剂存在下,酵母在基因表达水平,蛋白水平和代谢物水平都有相应的耐受响应,且这些响应错综复杂。从系统角度运用组学的方法研究这一体系将有助于全面深入了解酵母的耐受机制。本文综述了系统研究的思路和方法在酵母对抑制剂耐受方面的研究状况;对主要研究手段和成果进行了回顾;并对酵母发酵乙醇系统分析的前景进行了展望。     

HIV蛋白酶抑制剂——利迪链菌素的分子对接研究

用分子对接的方法, 对利迪链菌素的抗HIV蛋白酶活性进行了研究. 为了更准确地反映利迪链菌素分子与酶蛋白结合的情况, 充分考虑受体活性部位的柔性, 采用了FlexX(初步对接)和Flexidock(精确对接)分两步将配体与受体进行对接. 在初步对接中, 设计了不同的受体活性部位来考察是否有结合水分子参与抑制剂与酶的结合. 对一种作用方式已知的非肽类HIV蛋白酶抑制剂Aha006进行的对接研究显示, 分子模拟的结果与实际情况吻合得较好, 证明了本文所采用的方法的可靠性. 利迪链菌素与蛋白酶活性部位的对接结果显示, 配体分子与受体之间的结合没有结合水分子的参与, 两者通过5对氢键作用结合成为稳定的复合物. 利迪链菌素占据结合腔, 覆盖了蛋白酶的活性三联体Asp25-Thr26-Gly27, 从而起到抑制其生物活性的作用.     

酵母对抑制剂耐受的系统分析

纤维素生产乙醇的关键问题之一是水解产生的抑制性物质对乙醇发酵具有明显的抑制效应,因而引起了国内外研究者的广泛关注.研究发现,在抑制剂存在下,酵母在基因表达水平,蛋白水平和代谢物水平都有相应的耐受响应,且这些响应错综复杂.从系统角度运用组学的方法研究这一体系将有助于全面深入了解酵母的耐受机制.本文综述了系统研究的思路和方法在酵母对抑制剂耐受方面的研究状况;对主要研究手段和成果进行了回顾;并对酵母发酵乙醇系统分析的前景进行了展望.     

东北红豆杉提取物吸附法脱色的初步探讨

本文采用８种树脂对东北红豆杉提取物进行脱色研究．结果表明，带碱性基因的树脂吸附能力比较好，其中以ＰＡ－Ｃ性能最优，在用于纯化紫杉醇的研究中有良好的前景．     

铈诱导东北红豆杉凋亡细胞蛋白质的双向凝胶电泳分析

应用蛋白质双向凝胶电泳方法，研究了Ce^4 诱导悬浮培养红豆杉细胞凋亡过程中蛋白质的表达，分析了凋亡细胞与正常细胞的蛋白质组差异。发现在Ce^4 诱导4d后的凋亡样品中有13个新的蛋白质点出现，而在对照组细胞样品中未检测到，此外，还发现凋亡细胞中有一些蛋白质的含量明显高于对照组。表明Ce^4 诱导的红豆杉细胞凋亡过程中有新蛋白质的合成及原有某些蛋白质量的改变。说明Ce^4 诱导了某些功能蛋白的表达，红豆杉细胞凋亡的发生可能与这些新蛋白质的合成有关。     

紫杉二烯生物合成模块与不同底盘的适配简

以酿酒酵母BY4742及其单敲菌株作为底盘细胞,优化底盘细胞甲羟戊酸途径,上调并融合表达牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(GGPP)合成的相关基因,引入人工合成的外源GGPP合成酶基因与紫杉二烯合成酶基因,构建了多载体紫杉二烯生物合成模块;还利用酵母组装技术,通过对紫杉二烯合成路径相关基因进行模块化设计组装,构建了依托单一着丝粒(CEN)质粒的紫杉二烯生物合成模块. 将构建的2个模块与不同底盘细胞进行适配,使紫杉二烯产量获得了数倍提升,最高产量可达74.84 mg/L.     

合成生物学展望

近年来,合成生物学快速发展成为一个新兴交叉学科领域,研究重点逐渐由基因线路、简单元件和模块的设计构建转向设计与构建复杂的人工生物系统.本文阐述了合成生物学与化学工程学科的内在联系,并从基因组的人工设计合成与编辑、人工细胞的设计合成、人工合成多细胞体系及其应用等方面展望了未来合成生物学的发展趋势.     

稀土对红豆杉细胞中紫杉烯合成酶基因转录的影响

采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ和高效液相色谱,对稀土作用后紫杉烯合成酶基因的转录以及紫杉醇量的变化进行分析,红豆杉细胞于对数生长期紫杉烯合成酶基因转录水平最高。（ＮＨ４）２Ｃｅ（ＮＯ３）６能有效提高紫杉烯合成酶基因的转录,并促进紫杉醇的合成。     

水溶性紫杉醇前药研究进展

紫杉醇是具有良好抗癌活性的天然药物。但由于极差的水溶性,大大地限制它在临床上的应用。为此开发水溶性的紫杉醇前药越来越受到人们的重视。本文总结了近十几年来水溶性紫杉醇前药的研究状况,表明2'-羟基成酯是前药设计最有前景的方法,其中水溶性高分子支载的紫杉醇前药是最有前景的种类。