苏云金芽胞杆菌含不同质粒和不同基因工程菌的生长代谢

用微量热法研究了世界上产量最大的微生物杀中心剂苏云芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis)野生菌株YBT－1463,无晶体突变株BMB160和无质粒、无晶体突变株BMB171以及含量不同杀虫蛋白基因工程菌BMB－304－171－A和BMB－304－171－B的生长代谢动力学变化。结果是,含有14个质粒的野生菌株YBT－1463的生长代谢热比无晶体含6个质粒的变株BMB160和无晶体、无质粒突变株BMB171低;将杀虫晶体蛋白基因vryⅠAc和cryⅠC分别转入受体菌BMB171中后,两个工程菌BMB－303－171－A和BMB－304－171－B生长代谢热与受体菌BMB171相比也吸显降低;表明质粒形成一个耗能过程,当受体菌BMB171转入杀虫晶体蛋白基因后,工菌比受茶杯菌的放热大幅度减少,表明基因编码杀虫晶体蛋白也是一个耗能过程,但是含基因cryⅠAc和cryⅠC工程菌BMB－304－171－A和BMB－304－171－B之间的生长代谢没有明显差异。首次报道这些热动力学变化,对杀虫剂发酵生产过程的代谢控有重要指导意义。     

苏云金芽胞杆菌AiiA蛋白对魔芋软腐病菌的抗病活性

AiiA蛋白通过破坏病原菌的信号分子来阻断病原菌的群体感应调节系统,达到抗病的目的,是一种新型的抗病蛋白.根据蜡状芽胞杆菌ATCC14579基因组中aiiA序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌中成功扩增出aiiA基因,其ORF为753bp,测序后经blast检测与已发表的序列相似性均在95%以上.将此基因克隆到pET28a表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,超量表达的蛋白在菌体中以包涵体形式存在,纯化的AiiA蛋白经SDS PAGE电泳检测,表达产物分子量为28×103,致病性测定表明该蛋白对魔芋软腐病菌CZY具有较强的抗病活性.     

气相色谱法测定多糖样品中单糖的含量北大核心CSCD

提出了测定多糖样品中单糖含量的气相色谱法。10.00 mg多糖样品经0.4 mL4mol·L-1三氟乙酸溶液于100℃水解5h变为单糖,再进行乙酰化。所得溶液采用气相色谱法进行分离测定。以DB-5色谱柱为固定相,采用分流比为10∶1的分流模式进样。6种单糖的质量浓度在2.00～100.00mg·L-1内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.11～0.18mg·L-1。按标准加入法进行回收试验,回收率为88.0%～110%,峰面积的相对标准偏差(n=6)为1.3%～2.3%。     

苏云金芽胞杆菌含不同质粒和不同基因工程菌的生长代谢

用微量热法研究了世界上产量最大的微生物杀中心剂苏云芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis)野生菌株YBT－1463,无晶体突变株BMB160和无质粒、无晶体突变株BMB171以及含量不同杀虫蛋白基因工程菌BMB－304－171－A和BMB－304－171－B的生长代谢动力学变化。结果是,含有14个质粒的野生菌株YBT－1463的生长代谢热比无晶体含6个质粒的变株BMB160和无晶体、无质粒突变株BMB171低;将杀虫晶体蛋白基因vryⅠAc和cryⅠC分别转入受体菌BMB171中后,两个工程菌BMB－303－171－A和BMB－304－171－B生长代谢热与受体菌BMB171相比也吸显降低;表明质粒形成一个耗能过程,当受体菌BMB171转入杀虫晶体蛋白基因后,工菌比受茶杯菌的放热大幅度减少,表明基因编码杀虫晶体蛋白也是一个耗能过程,但是含基因cryⅠAc和cryⅠC工程菌BMB－304－171－A和BMB－304－171－B之间的生长代谢没有明显差异。首次报道这些热动力学变化,对杀虫剂发酵生产过程的代谢控有重要指导意义。     

有机添加剂柠檬酸与乙二胺四乙酸吸附在Mg(0001)表面的计算模拟研究

镁及镁合金具有良好的生物降解性, 生物相容性和优异的力学相容性, 作为新一代理想的可降解医用金属材料具有巨大的潜力, 但植入人体后, 极易腐蚀和降解. 本工作用密度泛函理论计算模拟方法研究了有机添加剂柠檬酸与乙二胺四乙酸在Mg(0001)表面的吸附. 通过吸附能, 分态密度, 差分电荷密度及布居电荷分析发现柠檬酸与乙二胺四乙酸在Mg(0001)表面存在强烈的Mg-O“单齿”和O-Mg-O“双齿”共价相互作用, 而乙二胺四乙酸平躺于Mg(0001)表面有最强的相互作用. 研究结论有望为在有机添加剂改善镁及镁合金生物医用材料的腐蚀及降解方面提供有用的理论指导.     

Inhibition of Model Compound of Purple Acid Phosphatases on Growth of Aerobacter aerogenes Investigated by Microcalorimetry

Ironisoneofthefourteentypesofessentiallybiologi caltraceelements .Ironplaysanimportantroleinlivingbodyanditwasregardedastherequiredtraceelementforlife .Manystudiesindicatethatdeficiencyorexcessofironmaybethecauseofmanydiseases .Furthermore ,ironisactivecenterofpigmentoxidase ,andsuccinicdehydroge nase ,etc .Consequently ,thestudyoftheinfluenceofironanditscompoundsonmicroorganismissignificantforun derstandinglifephenomenon .1Inhibitoryorantibioticactionofpurpleacidphos phatases (PAPs)hasnotbe…     

顶空固相微萃取-气相色谱/质谱法分析鉴定畜禽粪便中的挥发性有机化合物

采用顶空固相微萃取(HS-SPME)-气相色谱/质谱法(GC/MS)测定了牛粪、猪粪以及鸡粪中的挥发性有机化合物(VOCs)。在优化HS-SPME条件的基础上,通过GC/MS分析,从牛粪中分离鉴定出44种VOCs,从猪粪中分离鉴定出40种VOCs,从鸡粪中分离鉴定出41种VOCs。HS-SPME-GC/MS具有简单、快速、无需有机溶剂等特点,适合于畜禽粪便中挥发性有机化合物的分析与鉴定。同时,该研究揭示了畜禽养殖场臭味物质的来源,为治理其环境污染提供了科学依据。     

苯丙烯酸对松节油转化水合萜二醇的作用研究

本文对苯丙烯酸在松节油转化成水合萜二醇反应中的作用进行了对比研究。结果表明，在传统的２７％Ｈ２ＳＯ４催化，平平加，ＯＰ－１０，吐温－８０及吐温－８０￣吐温－２０混合剂分别作乳化剂的松节油水合反应中，加入苯丙烯酸可使水合萜二醇的收率提高８￣１０％，反应时间缩短４－７小时，本文还对产物及副产物作了质谱分析。     

Microcalorimetric Study of the Biological Effects of Zn~(2+) on Bacillus thuringiensis Growth

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＣａｌｏｒｉｍｅｔｒｙｈａｓｂｅｅｎｕｓｅｄｉｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｃｅｌｌｕｌａｒｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｂｙｍｅａｎｓｏｆｈｅａｔｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｓ ,ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｉｎｓｔｕｄｙｉｎｇｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｃｅｌｌｓａｎｄｗｈｏｌｅｏｒｇａｎｉｓｍ .1,2 Ｍｉ ｃｒｏｃａｌｏｒｉｍｅｔｒｙｉｓａｌｓｏｕｓｅｄｉｎｍｅａｓｕｒｉｎｇｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｖａｒ ｉｏｕｓｓｕｂｓｔａｎｃｅｓａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ .Ｍｉｌｅ…     

W544F定点突变提高苏云金杆菌Cry1Ac蛋白的稳定性

W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸, 它与F578和F604一起组成一个“螺旋桨状”的疏水簇, 通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定. 本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸, SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对紫外照射、胰蛋白酶处理和室温存贮的稳定性相对于野生Cry1Ac都有一定程度的提高; 经原子力显微镜观察, 发现W544F产生的晶体两个顶点间的垂直距离比野生型Cry1Ac约长0.6 μm, 且晶体表面不及野生型光滑; 此外, W544F与野生Cry1Ac的杀虫活性相似, 但经过紫外光照射9 h后, 其保留的杀虫活性比野生型高4倍以上. W544F突变较好地解决了Cry1Ac毒素蛋白田间应用不持久的问题, 具有重要的应用价值.