在线固相萃取-液相色谱-串联质谱法检测蘑菇中毒患者尿液中痕量α -鹅膏毒肽

建立了在线固相萃取-液相色谱-串联质谱（online SPE-LC-MS/MS）测定蘑菇中毒患者尿液中痕量α -鹅膏毒肽的分析方法。样品经甲酸酸化的乙腈-甲醇（5：1,v/v）沉淀蛋白质,反相液液微萃取去除样品提取液中的有机溶剂,毒素经ODS微柱（5 mm×2.1 mm,5 μm）在线SPE净化,XBridge^TM BEH C₁₈ 色谱柱（150 mm×3.0 mm,2.5 μm）分离,MS/MS测定。采用基于定量环的快速阀切换技术作为在线SPE和LC-MS/MS模块的接口,使得两个分离模块互相独立,无论是流动相还是压力,都不会互相干扰,保证了系统的稳定性;在线系统的精准净化,有效消除了后续质谱检测的基质效应,确保了尿液中痕量水平α -鹅膏毒肽的定性定量检测。尿液中α -鹅膏毒肽在0.1~50 μg/L范围内线性关系良好,相关系数（r ² ）为0.9983;检出限（LOD）为0.03 μg/L;α -鹅膏毒肽的加标（0.1、2.0和20 μg/L）平均回收率为84.3%~91.7%,相对标准偏差（RSD）为3.8%~7.2%。体内鹅膏毒肽代谢迅速,生物基质中痕量水平毒素的检测是其中毒实验室鉴定的主要难题,通过实际样品检测,证明该法操作简单,准确、灵敏;溶剂沉淀蛋白质和反相液液微萃取去除有机相和脂溶性基质的简单操作,可以作为水溶性毒素在线SPE-LC-MS/MS检测时快速且有效的配套前处理方法;基于在线SPE精准净化技术,可以实现尿液中α -鹅膏毒肽的高灵敏度测定（LOD为0.03 μg/L）,解决了中毒时患者体内痕量水平α -鹅膏毒肽定性确证的难题,部分患者α -鹅膏毒肽中毒实验室鉴定的时间可以扩展到90 h以上;同时,痕量水平的定量检测技术,可以为中毒后迅速代谢的α -鹅膏毒肽在体内的剂量反应关系研究提供可靠的技术支撑。     

用于SERS检测的二氧化钛薄膜制备研究

利用溶胶-水热法成功在金属铝片上生长了TiO₂膜。该材料作为SERS基底稳定性好,合成简单,成本低,且能实现快速检测。通过测试XRD、 SEM、以及UV-Vis-NIR吸收光谱等实验对薄膜进行表征,并系统研究了钛酸四丁酯含量对TiO₂薄膜形貌结构、 SERS性能的影响。以4-MBA为探针分子,研究了这些薄膜基底的SERS性能。结果表明,钛酸四丁酯的含量对TiO₂薄膜的微观结构和对SERS性能都有显著影响。     

草鱼巨噬细胞活化的生理生化指标研究

采用Percoll密度梯度离心等技术，对处于两种不同活性状态的草鱼头肾和腹腔巨噬细胞（Macrophage,Mφ）进行了分离纯化，并对两者的生理生化代谢作了比较分析，证实活化Mφ的体积增大，O^-2,H2O3,ACP活性和RNA、蛋白质含量显著升高，吞噬杀菌力明显增强，5′ND活性显著下降，这些变化规律与高等脊椎动物Mφ相一致，说明鱼类和高等脊椎动物Mφ存在相同的活化机制，O^-2，H2O2，ACP，RNA，蛋白质和5′ND活性和含量以及吞噬杀菌力均可作为反映鱼类Mφ活性水平的生理生化指标。     

通用高速数据采集及测试平台设计

64B/66B编码和8B/10B编码为高速数据收发器的常用编码方式,64B/66B编码相对于8B/10B编码效率更高,速度更快,应用更广泛。本文介绍了一种新型高速数据采集测试平台,该平台采用64B/66B编码,同时兼容8B/10B编码。该平台使用光纤作为传输介质,采用高性能FPGA为处理器实现高速数据收发。测试证明,采用64B/66B编码方式的平台相较于采用8B/10B编码方式的平台能够在大幅提高传输效率的同时减少数据冗余率。该平台可以为超高速数据采集提供更为高效的硬件支撑。     

基于拉曼频移检测胰岛素自身抗体

胰岛素自身抗体(IAA)是1型糖尿病(T1DM)的重要生物标志物。IAA早在患者出现临床表现之前就存在于血清中,因此对早期筛查T1DM具有重要的意义。然而,目前现有的检测方法耗时长,缺乏敏感性和特异性。在此背景下,设计了一种基于IAA的表面增强拉曼散射(SERS)免疫芯片。随着IAA浓度的增加,对巯基苯甲酸(MBA)在～1 074 cm^-1处的特征峰会逐渐发生谱峰位移,因此利用特征峰拉曼位移的变化可实现对IAA的定量分析。实验结果表明该方法在临床应用中具有快速、敏感和准确早期筛查T1DM的潜力。