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植物单拷贝短序列的染色体原位杂交的检出率一直很低．水稻ＢＡＣ克隆作为一种大容量载体的基因组克隆因其独特的优点已被应用于水稻基因组研究．用生物素标记了两个水稻ＢＡＣ克隆，这两个克隆分别含与抗稻瘟病基因Ｐｉ－５（ｔ）、抗稻绿叶蝉基因Ｇｌｈ和抗稻黄萎病基因ＲＴＳＶ在连锁图中等位的ｃＤＮＡ标记ＲＺ５６５和ＲＺ２６２，并用其进行了水稻染色体原位杂交．它们分别被定位在水稻第四染色体长臂距着丝粒百分距离４０％和短臂１００％处．由于供杂交ＢＡＣ克隆含与３种抗病基因等位的标记，因此这些克隆的位置也就是供测抗病基因的位置．杂交检出率由迄今沿用的质粒克隆探针杂交的１０％以下提高到了４６．８％和５９．２％．检出染色体的号数与遗传图确定的染色体相符，证实了用ＢＡＣ克隆进行染色体原位杂交的优越性，为广泛利用水稻ＢＡＣ克隆进行单拷贝小片段基因的定位打下了基础． 相似文献
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SARS冠状病毒（SARS-CoV）的S（Spike）蛋白是病毒表面最主要的膜蛋白，在病毒的感染过程中起重要作用，是冠状病毒的主要抗原．以SARS冠状病毒的cDNA为模板，通过PCR得到S△1（151～1200bp）、S△2（1201～2250bp）和S△3（2251～3150bp）3段基因序列，克隆到表达载体pET-32a，在大肠杆菌BL21中诱导表达得到包涵体蛋白，经Western blot检测正确后，将此作为抗原以滴鼻和腹腔注射两种小同的途径免疫BALB／c雌性小鼠，3次免疫之后采集小鼠的血清和肺洗液，经酶联免疫吸附实验（enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA）检测其中的抗体IgG和IgA．结果表明S蛋白通过滴鼻途径既能刺激产生一定的血清IgG，更能诱导肺粘膜产生特异IgA抗体．进一步比较分析发现，诱导粘膜免疫的效应区域主要位于S△2（401～750aa）蛋白区段． 相似文献
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