猪IL-18成熟蛋白在大肠杆菌中的表达及生物学活性鉴定

以含猪IL-18全基因的重组质粒pGEM-IL-18为模板,PCR扩增猪IL-18成熟蛋白基因.将IL-18成熟蛋白片段定向插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-IL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达融合蛋白(His-IL-18),并进行融合蛋白的纯化、生物学活性鉴定.结果表明,SDS-PAGE可检测到相对分子质量约为2.1×104的融合蛋白,westem blot证实His-IL-18能与猪IL-18单克隆抗体发生特异性反应.重组猪IL-18经纯化后,能明显刺激猪脾脏T淋巴细胞增殖反应,在Marc-145细胞上抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性为2.50×103IU/mg,在PK-15细胞上抗猪伪狂犬病毒、猪细小病毒的活性分别为2.00×103和2.24×103IU/mg.表明建立的表达系统能够表达重组猪IL-18,表达的重组猪IL-18具有一定的生物学活性.     

四个产地丹参种质根中微量元素含量的分析比较

近年来对中药材中微量元素的研究,以及微量元素在药效中的作用和对人体健康的影响越来越引起人们的重视。文章借助ICP-MS/ICP-AES技术分析比较了4个产地丹参种质同地种植根中微量元素的含量。结果发现,实验的4个丹参种质中,以山东白花丹参根中微量元素含量较高,钙、铁、锌、锰、铜、钡、锂、钴、镍、汞等10种微量元素含量是最高的,且锌、锰、铜、镍、汞等微量元素含量显著高于其他3种紫花丹参;相比紫花丹参和白花丹参根中微量元素含量的差异,3种紫花丹参之间,除了陕西商洛紫花丹参根中铷和钼的含量较低、镍的含量较高外,其他19种微量元素含量都较为接近。4个产地种质丹参根中微量元素含量的测定,为了解各自根中药效成分的含量及其疗效差异提供了重要参考。