畜禽肉及饲料中氟苯尼考残留免疫分析方法研究

针对动物源性食品及饲料中氟苯尼考的残留问题,通过抗原制备、动物免疫和细胞融合筛选,成功得到可高特异性识别氟苯尼考的单克隆抗体,并建立了氟苯尼考的间接竞争酶联免疫分析（icELISA）方法。经单因素实验优化策略,确定最佳反应条件为：包被抗原质量浓度0.05 μg/mL,抗体质量浓度为0.1 μg/mL,最佳药物、抗体和二抗稀释液均为磷酸缓冲液（PBST）,抗体稀释液吐温－20含量0.05%,竞争反应时间30 min,二抗质量浓度为0.167 μg/mL,二抗反应时间30 min。在该条件下,建立了氟苯尼考的icELISA 检测方法,其IC50为9.48 ng/mL,线性检测范围为1.75 ~ 51.36 ng/mL,检出限（LOD）达0.64 ng/mL,且与氯霉素等结构及功能类似物均无明显交叉反应,特异性良好。实际样品的加标回收率为88.1% ~ 107%,相对标准偏差（RSD）< 15%。将所建立的方法用于畜禽肉及饲料样品的检测,结果与HPLC－MS/MS判定结果一致,说明该方法适用于畜禽产品及饲料中氟苯尼考的残留检测。