光谱法研究硝苯柳胺与钥孔戚血蓝蛋白的相互作用

采用荧光光谱和紫外吸收光谱研究了不同温度下硝苯柳胺与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)的相互作用.结果发现,KLH的特征荧光峰猝灭,硝苯柳胺对KLH的荧光猝灭机制属于静态猝灭;由Lineweaver-Burk方程计算出不同温度下硝苯柳胺与KLH之间的结合常数K分别为3.81×104 L/mol (25 ℃)和3.01×104 L/mol (37 ℃);由Van′t Hoff方程计算出ΔH和ΔS平均值分别为-15.09 kJ/mol和37.055 J mol -1 K -1,二者之间的作用力主要为静电作用力;该过程是一个熵增加、Gibbs自由能降低的自发分子间作用过程;根据Frster非辐射能量转移机制求得给体与受体间的结合距离r为4.61 nm,能量转移效率为0.0403.同步荧光光谱表明,硝苯柳胺能够被血蓝蛋白存储和转运, 但结合时对蛋白构象有一定影响.     

氯硝柳胺及其衍生物与钥孔戚血蓝蛋白的相互作用

以氯硝柳胺为原料合成了聚乙二醇200基氯硝柳胺. 采用荧光光谱、同步荧光光谱、紫外吸收光谱和圆二色谱研究了氯硝柳胺及其衍生物与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)的相互作用. 结果表明, 两种药物分子对KLH的荧光猝灭机制属于静态猝灭; 由Lineweaver-Burk方程计算出不同温度下结合常数K, 但是聚乙二醇200基氯硝柳胺与KLH的作用相对较弱; 由Van′t Hoff方程计算出ΔH和ΔS平均值, 结合力主要为静电作用力; 热力学函数计算结果表明, 氯硝柳胺及其衍生物与KLH的作用过程是一个熵增加、Gibbs自由能降低的自发分子间作用过程; 根据Förster非辐射能量转移机制求得给体与受体间的结合距离r均小于7 nm; 同步荧光光谱表明, 氯硝柳胺及其衍生物能够被血蓝蛋白存储和转运, 但结合时对蛋白构象有一定影响; 圆二色谱测得加入两种药物后, KLH的α-螺旋含量均降低, 二级结构发生改变. 通过比较氯硝柳胺及其衍生物与KLH的相互作用, 初步探讨了分子结构与其结合能力之间的联系.     

聚乙二醇200基硝苯柳胺与钥孔戚血蓝蛋白的相互作用

采用荧光光谱、紫外吸收光谱和圆二色谱(CD)研究了聚乙二醇200基硝苯柳胺与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)的相互作用。结果表明,聚乙二醇200基硝苯柳胺对KLH的荧光猝灭机制属于静态猝灭;由Lineweaver-Burk方程计算出不同温度下结合常数K,由Van’t Hoff方程计算出△H和△S平均值,结合力主要为静电作用力;根据F rster非辐射能量转移机制求得给体与受体间的结合距离r=5.76 nm;同步荧光光谱表明,聚乙二醇200基硝苯柳胺能够被KLH存储和转运,但结合时对蛋白的构象有一定的影响;圆二色光谱的数据表明相互作用后KLH的二级结构发生了改变:KLH的α-螺旋的含量从43.1%下降到37.8%。