基于纳米生物条形码和杂交链式反应构建电化学生物传感器用于蛋白激酶活性分析

该文结合纳米生物条形码和杂交链式反应(HCR)双重信号放大策略构建了一种电化学生物传感器用于蛋白激酶A(PKA)的活性分析。以MoS₂/AuNPs纳米复合材料作为玻碳电极修饰材料，半胱氨酸修饰的底物肽链通过Au-S键自组装到修饰电极表面。当存在目标物PKA时，底物肽链被磷酸化，可与纳米生物条形码(S1-AuNPs-Ab)特异性结合，以S1-AuNPs-Ab探针中S1链作为引发链，可诱导发夹DNA(H1和H2)发生杂交链式反应。HCR产物吸附亚甲基蓝(MB)电活性分子，产生放大的电化学响应信号，实现对PKA活性的定量分析。该电化学传感器检测PKA的线性范围为10^-3～20 U/mL，检出限(S/N=3)为3×10^-4 U/mL。构建的电化学传感器具有良好的选择性、重现性和稳定性，可用于实际样品细胞裂解液中PKA的活性测定和蛋白激酶抑制剂的筛选及激酶相关药物的发现。