麋鹿茸、马鹿茸和梅花鹿茸营养成分的分析比较研究

对麋鹿茸,马鹿茸,梅花鹿茸中的水分,粗蛋白,粗脂肪,膳食纤维,水溶性和脂溶性维生素,氨基酸和无宏量及微量元素进行了测定,和比较,结果表明,麋鹿茸与马鹿茸和梅花鹿茸的化学分成及含量相近,鹿鹿茸中膳食纤维和必需无机元素含量高于其它两种鹿茸,填补了麋鹿研究的空白,为鹿资源的保护,发展,开发和利用提供了营养学依据。     

毛细管区带电泳法测定冬虫夏草及鹿茸制品中核苷和碱基成分

应用毛细管区带电泳法测定分别以冬虫夏草菌丝体粉和鹿茸血为主要原料制品中的多种核苷和碱基成分。对实验条件进行了优化,结果表明,以20mmol/L硼砂-15mmol/Lβ-环糊精为缓冲溶液(pH=9.4),分离电压22kV,检测波长254nm,电动进样为10kV、5s时,在10min内同时分离测定了虫草素、腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶、腺苷、次黄嘌呤、尿苷、鸟苷和肌苷。各组分在0.2～200μg/mL范围内呈线性关系,检出限的范围是0.07～1.67μg/mL。5个批次的冬虫夏草菌丝粉保健品中腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、鸟苷、尿苷5组分的定量结果分别在0.15～0.19mg/g、0.72～0.92mg/g、1.44～1.59mg/g、1.51～2.32mg/g和1.77～2.56mg/g范围内,加标回收率的范围是82.83%～109.21%;2个批次的鹿茸血保健品中次黄嘌呤、尿苷的定量结果在36.55～49.97μg/mL和86.08～108.97μg/mL范围内,加标回收率的范围分别是89.68%～96.79%和99.05%～102.81%。     

鹿茸寡肽的制备及其促成骨细胞的增殖作用

从梅花鹿鹿茸中提取了天然鹿茸总多肽(VATP). 在进一步分离纯化的过程中, 筛选出具有促进成骨细胞增殖的高活性肽组分(VAP-B), 并通过制备型HPLC对其纯化, 得到了分子量分布约为200~600的小肽活性组分(VAP-B2). 细胞周期分析结果表明, 鹿茸肽VAP-B2组分促进了人成骨肉瘤细胞OS-732的周期转化, 使其细胞周期S期细胞指数明显增加, 即表现为S期DNA含量明显提高. 碱性磷酸酶(ALP)活性检测结果表明, 随着鹿茸肽VAP-B2剂量的增加, ALP的活性明显增加. 这与成骨细胞增殖分化及成熟过程中, 细胞的周期性变化和骨形成标志物碱性磷酸酶水平的明显增高相符.     

UPLC法测定不同加工方式鹿茸中的生物胺成分

首次应用超高效液相色谱法(UPLC)同时测定了鹿茸中10种生物胺组分的含量,比较了不同加工方式的鹿茸中生物胺的差异。鹿茸样品中的生物胺用0. 4 mol/L高氯酸浸提,10 g/L丹磺酰氯衍生化,UPLC法定量分析。色谱柱为ACQUITY UPLC@BEH C18(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm),流动相为乙腈-水,柱温为35℃,流速为0. 4 m L/min,检测波长为217 nm。结果显示,10种生物胺在一定浓度范围内呈良好线性关系,其相关系数为0. 997 8~0. 999 9,检出限为10. 87~19. 63μg/L,回收率为71. 6%~101%。煮炸茸和冻干茸蜡片、粉片、纱片、骨片4个部位的生物胺总量依次为312. 33、176. 88、105. 31、55. 674 mg/kg和291. 77、152. 85、114. 49、74. 73 mg/kg;排血茸蜡片、粉片、纱片、骨片4个部位的生物胺总量分别为357. 07、226. 26、125. 18、77. 74 mg/kg,带血茸的分别为343. 42、216. 72、125. 15、76. 16 mg/kg。就生物胺总量而言,冻干茸高于煮炸茸,排血茸高于带血茸,且按蜡片、粉片、纱片、骨片部位依次减少,不同部位之间差异显著(P 0. 05)。     

模型压片固相分光光度法的研究

本文首次采用模型压固相分光光度法，利用氯型阴离子交换树脂做固体吸附剂，测定鹿茸样品中的痕量磷，该法简单，快速，灵敏，测定结果令人满意。     

鹿茸保健品中11种性激素的气相色谱-串联质谱法分析

建立了气相色谱-串联质谱法测定鹿茸保健品中11种性激素的分析方法。鹿茸中的性激素经固相萃取富集和净化,经七氟丁酸酐衍生处理。采用DB-5色谱柱(30 m×0.25 mm, 0.25 μm)、非线性梯度升温程序分离,在串联质谱多反应监测(MRM)模式下检测,外标法定量,实现了11种性激素的有效分离。11种性激素的检出限为1.0～5.0 μg/kg,线性相关系数为0.9916～0.9999,平均回收率为67.4%～99.1%,相对标准偏差为2.6%～13%。该方法准确,可靠,可满足鹿茸保健品中性激素含量的测定和确证。     

微量热法研究鹿茸4个活性部位对肠道特征菌群生长代谢的影响

建立灵敏表征鹿茸中具有补益活性的4个部位对两种肠道特征菌群生长代谢影响的评价方法.采用微量热法,在不同给药条件作用下,以产热功率-时间曲线(热谱曲线)的特征参数(生长速率常数(k)、最大产热功率(Pmax)、达峰时间(tp)及有效率(E)等)为指标,对肠道主要有益菌(青春双歧杆菌)生长代谢程度进行客观地量化评价.挑选鹿茸促菌最强的活性部位,进一步考察该部位对病原微生物(金黄色葡萄球菌)生长抑制的作用规律.结果表明,鹿茸不同活性部位促进青春双歧杆菌生长代谢强弱顺序为:正丁醇乙醚氯仿乙酸乙酯.活性最强的正丁醇萃取液对病原微生物(金黄色葡萄球菌)抑制影响的研究表明,正丁醇萃取液在浓度大于200μg·mL-1时,对金葡菌生长具有抑制作用.且tp随药液浓度的增加而相应地延长;k,Pmax均随浓度的增加而相应地减小.微量热法具有灵敏准确、实时在线、重现性好等特点,可用于名贵药材——鹿茸的活性部位的筛选,也为药效物质的研究提供了一个新的研究思路和方法.     

酶解鹿茸肽的制备、纯化及抗氧化活性

利用一种工业用碱性蛋白酶对新鲜梅花鹿鹿茸进行水解,制备得到生物活性肽.首先,考察了酶用量、底物浓度和反应时间对水解反应的影响,确定了最佳水解条件为酶与底物质量比1:150,底物与溶剂质量比1:13,水解时间60min.其次,利用硫酸胺分级沉淀法制备了鹿茸多肽粗提液,同时采用缓冲液保护其活性,再经SephadexG-25凝胶层析柱进行分离纯化,得到了具有最强抗氧化活性的鹿茸肽组分(VAP-B).最后,利用制备型高效液相色谱柱对VAP-B进一步纯化,得到了分子量在800以内的小肽活性组分(VAP-B1),其蛋白含量为70.45%.在此基础上,对小肽活性组分VAP-B1进行了理化性质分析,检测其抗氧化活性,包括清除超氧阴离子、羟自由基以及抗脂质过氧化的能力和还原能力.实验结果表明,当鹿茸肽VAP-B1浓度为20mg/mL时,对邻苯三酚自氧化的抑制率达到91.9%,有明显的清除超氧阴离子的作用;当浓度为10mg/mL时,对羟基自由基的清除作用达到100%,且在一定的浓度范围内呈剂量依赖关系.此外,鹿茸肽VAP-B1还具有一定的防止脂质过氧化和还原的作用.     

鹿茸中18种性激素的提取技术研究

建立一种高效提取鹿茸中雌二醇、雌三醇和睾酮等18种性激素的方法.采用超声波提取法进行提取,液相色谱-串联质谱定性,以回收率为评价指标,分别考察提取溶剂、提取剂用量和提取时间对18种性激素提取效率的影响,并以提取效率实验对建立的方法加以验证.提取溶剂为甲醇,用量为10 m L,超声波提取时间为20 min时,利用优化的超声提取操作步骤进行提取效率实验,18种性激素回收率为73%~116%,实验结果表明在该条件下的超声波提取法快速、准确,重现性好,可同时有效提取鹿茸中的18种性激素,为鹿茸及其制品中性激素前处理提供参考方法.     

氢化物发生-原子荧光光谱法测定鹿茸中的总砷

研究了氢化物发生-原子荧光光谱法测定鹿茸中总砷的分析方法。采HNO3-HCl O4混合酸(V:V=8:1)消解样品,以2%HCl介质作为载流,样品酸度控制在10%时进行样品分析。方法的线性范围0~10μg/L,相关系数优于0.999,检出限0.04μg/L,相对标准偏差3.2%,加标回收率96.0%~102.0%。