基于香豆酮并色酮生物硫醇荧光探针的合成及应用研究

为监测具有高度生物学活性的谷胱甘肽(GSH),半胱氨酸(Cys)和高半胱氨酸(Hcy)等生物硫醇的生物功能,基于丙烯酸酯对生物硫醇的识别,通过三步反应设计合成香豆酮并色酮的荧光探针JA检测生物硫醇。探针JA具有反应快(10 min响应Cys)、抗干扰性强(Stokes位移150 nm)、毒性低和生物相容性好等特点,能对活细胞内外源性的生物硫醇进行荧光成像。探针JA为生物硫醇的灵敏检测提供了一种简单有效的方法。     

基于InP@ZnS QDs/Dured纳米荧光探针的DNA检测

利用巯基丙酸包覆的InP@ZnS量子点（QDs）与Dured构建了一种检测DNA的荧光探针。在该探针中,以环境友好型带负电的InP@ZnS量子点为荧光团,与带正电的Dured通过静电结合,构建了InP@ZnSQDs/Dured纳米荧光探针。通过荧光共振能量转移（FRET）机理,量子点荧光被猝灭;当DNA存在时,Dured与DNA的特异性结合使Dured从InP@ZnSQDs表面脱附,FRET过程被打断,InP@ZnSQDs荧光恢复,以荧光“关-开”方式检测DNA。该探针检测DNA的线性范围为2.0~275.0ng·L^-1,检测限为1.0ng·L^-1,并可用于模拟生物生理条件下的DNA检测。

     

高效液相色谱指纹图谱结合化学计量学方法分析不同产地侗药四块瓦药材质量

取1 g四块瓦粉末置于圆底烧瓶中,加入75%(体积分数,下同)甲醇溶液50 mL,回流提取1 h,过滤,滤液用75%甲醇溶液定容至50 mL,经0.45 µm有机相滤膜过滤,在Agela Promosil C18色谱柱上进行分离,在柱温35℃条件下以不同体积比的0.2%(体积分数)甲酸溶液-乙腈混合溶液为流动相进行梯度洗脱,在波长290 nm处检测,记录色谱图.根据中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004版)建立了四块瓦的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并采用IBM SPSS Statistics 25.0统计学软件和SIMCA软件(12.0版)进行主成分分析和偏最小二乘法判别分析.结果显示:11批四块瓦指纹图谱中有14个共有峰,与齐墩果酸对照品比对,确认12号峰对应齐墩果酸,11批四块瓦指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.833～0.979;主成分分析共得到3个主成分,累计方差贡献率达到92.258%;偏最小二乘法判别分析筛选出影响不同产地四块瓦药材质量的8个差异性标志物.     

氧化石墨烯/适配体-量子点荧光探针用于ATP检测EI北大核心CSCD

利用量子点标记技术,通过生物偶联方式,以无毒的In P/Zn S表面标记上ATP适配体(ABA-QD)为荧光团,氧化石墨烯(GO)为猝灭剂,二者组装成GO/ABA-QD纳米荧光探针,QD与GO之间产生长程共振能量转移(LrRET),量子点荧光猝灭。当ATP存在时,ATP适配体与其特异结合,构象改变,量子点从GO表面分离,二者之间的荧光共振能量转移被打断,量子点荧光恢复,通过荧光"开"方式检测ATP,检测ATP的检测限为40 nmol/L,线性范围为0.1~30μmol/L。该新型检测ATP的方法对肿瘤的发生、疾病的诊断以及活细胞原位成像等具有重要的意义。     

量子点-卟啉纳米复合体系在肿瘤细胞成像中的应用

本文合成了高荧光量子产率、单分散性好的水溶性CdTe量子点(quantum dots,QDs),并与α,β,γ,δ-四(1-甲基吡啶嗡-4-基)卟吩对甲苯磺酸盐(TMPyP)组装成QDs-TMPyP纳米复合物,研究了该复合物检测DNA的机理以及肿瘤细胞成像。结果显示,QDs-TMPyP纳米复合物通过光致电子转移机制检测DNA,当CdTe QDs和CdTe QDs-TMPyP浓度低于1.0μmol/L时,HeLa肿瘤细胞存活率达92%以上,表现出低的细胞毒性。0.2μmol/L CdTe QDs-TMPyP作用于肿瘤细胞时,细胞生长状态良好,对细胞内能谱分析发现细胞内含有Cd和Te原子。CdTe QDs-TMPyP复合物比CdTe QDs更易被HeLa细胞摄取,利用量子点荧光成功实现了细胞核内成像,为宫颈癌细胞药物输送和细胞成像的深入研究打下基础。     

二肽基肽酶-Ⅳ有机小分子荧光探针的研究进展

二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ)是一种重要的跨膜糖蛋白水解酶,与各种生理过程和疾病密切相关,检测DPP-Ⅳ的有机小分子荧光探针被相继报道,是当前研究生物酶检测的热点.首次综述了用于DPP-Ⅳ体外和体内检测及成像的 3 类有机小分子荧光探针,分别是非近红外荧光探针(λem<650 nm)、近红外荧光探针(λem>650 nm)和双光子荧光探针,对比并总结了三种探针的设计原理、结构特点、生物应用情况及其在DPP-Ⅳ相关疾病诊断中的应用,并探讨了DPP-Ⅳ活性检测在未来发展方向上所面临的挑战.     

宣肺败毒方高效液相色谱指纹图谱的建立

按照处方量制备宣肺败毒方,武火煮沸后,文火煎煮60 min,纱布过滤,文火浓缩煎煮至400 m L,滤纸过滤,再用0.45μm水系滤膜过滤,在Agela Promosil C₁₈色谱柱上进行分离,在柱温30℃条件下以不同体积比的0.1%（体积分数）磷酸溶液-甲醇混合溶液为流动相进行梯度洗脱,在波长220 nm处检测,记录色谱图。根据中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004 A版）建立了宣肺败毒方的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱。结果显示,11批宣肺败毒方指纹图谱中有24个共有峰,与大黄素对照品比对,确认24号峰对应大黄素,11批宣肺败毒方指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.988～1.000。     

基于近红外光谱法建立的模型快速预测苗药水冬瓜叶中金丝桃苷和异槲皮苷北大核心CSCD

基于近红外光谱法建立的定量分析模型快速预测苗药水冬瓜叶中金丝桃苷和异槲皮苷。样品经甲醇水浴回流提取后,采用近红外光谱仪以透射法采集其1100~2300 nm波长范围内的光谱信息,同时用高效液相色谱法测定金丝桃苷和异槲皮苷的含量,结果作为参考值。分别以标准正态变量交换法-平滑法(SNV-Smoothing)和一阶微分法(S-G first derivative)预处理金丝桃苷和异槲皮苷的原始光谱,以偏最小二乘法(PLS)分别在1100~2300 nm和1100~1400 nm波段内构建金丝桃苷和异槲皮苷的定量分析模型,并以相关系数、校正均方根误差(RMSEC)、预测均方根误差(RMSEP)、预测相对偏差(RSEP)来考察模型性能。结果显示:金丝桃苷定量分析模型的RMSEC、RMSEP与RSEP值分别为0.2414,0.2705,0.1775,相关系数为0.9136;异槲皮苷定量分析模型的RMSEC、RMSEP与RSEP值分别为0.0791,0.0208,0.0339,相关系数为0.9077;用所建金丝桃苷和异槲皮苷的定量分析模型预测验证集样品中的金丝桃苷和异槲皮苷含量,预测值与参考值的相对误差分别为-2.8%~2.9%、-5.1%~5.9%;对实际样品重复分析6次,金丝桃苷和异槲皮苷的预测值的相对标准偏差分别为2.7%,3.3%;将样品溶液放置0,1,2,3,6,12 h后进样,预测值的RSD分别为2.9%,3.4%.     

微波一步法制备氮掺杂碳点及其用于多巴胺的检测研究

以柠檬酸为碳源,尿素为氮源,采用微波一步法制备得到稳定性高,水溶性好的蓝色荧光的氮掺杂碳点。并将该氮掺杂碳点经透射电子显微镜(TEM)、原子力显微镜(AFM)、X-射线光电子能谱(XPS)和红外光谱(IR)表征,发现其粒径为0.5~5nm,平均粒径2.6nm,富含羟基、羧基和氨基等官能团。在优化实验条件下,多巴胺浓度在2.5~37.5μmol/L范围内与N-CDs的荧光猝灭效率(IF/IF0)呈良好的线性关系,方法的检出限为0.08μmol/L。采用该方法对正常人尿液中的多巴胺进行测定,其加标回收率为99.5%~106%,RSD为1.8%~2.3%,方法准确度高,结果满意。