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1.
我们组建了带有痘苗病毒胸腺嘧啶核苷激酶(TK)基因的痘苗病毒载体,并将乙型肝炎(以下简称乙肝)表面抗原(HBsAg)基因(adr亚型)插入载体质粒,置于痘苗病毒早期启动基因的调控下。通过感染与转染相结合的方法,得到了带有乙型肝炎表面抗原基因的重组痘苗病毒。它保持了原有的感染性,并能有效地表达乙肝表面抗原。当病毒接种量为每个细胞1PFU(空斑形成单位)时,每1×10~6细胞感染后24h可产生2—3μg HBsAg,其中大部分释放于细胞培养液中。每升培养液可以产生0.5—1mg HBsAg。表达产物HBsAg能形成颗粒,其大小、浮力密度,多肽组份等都与病人血清中的HBsAg颗粒相同。用重组痘苗病毒免疫家兔,可以产生抗乙肝表面抗原的专一性抗体。实验结果表明,利用本文组建的重组痘苗病毒不仅可以提供一个生产乙肝表面抗原的系统,而且这种重组痘苗病毒就可作为活疫苗使用,来预防乙肝病毒感染。  相似文献   
2.
A cDNA clone, p14--6, which has an antioncogene activity on the v--Ki--Ras oncogene-transformed malignant cell line DT, was found. This clone was recovered from the revertantR14 cells, which had been isolated by transfections of DT cells with a normal human fibro-blast cDNA library cloned in pcD2, an Okayama-Berg vector. When transfected into DT cells,p14--6 clone gave rise to phenotypical flat reversion in 5--15% of DT transfectant colo-nies. The p14--6--transfected flat cell line, RR, was proven to be a true revertant with signif-icantly reduced malignancy by in ritro and in riro malignancy tests. All other clones recov-ered from R14 cells were unable to cause this reversion. Molecular hybridizations showedthat the p14--6 was inserted into RR genome as tandem repeats, and no structural changewas found in the D--Ki--Ras oncogene in RR genome. These facts suggest that the antioncogeneactivity of the p14--6 clone on the DT cells may be exerted through expression of thecDNA contained in this clone. Possib  相似文献   
3.
具有抗癌基因活性的一个cDNA克隆   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文发现了一个对受v-Ki-Ras基因恶性转化的小鼠成纤维细胞株DT具有抗癌基因活性的cDNA克隆p14-6。该cDNA克隆系从用正常人cDNA库转染DT造成的回复突变细胞株R14中回收得到的。用p14-6再次转染DT细胞株时,可使约5—15%的DT细胞发生形态回复突变。p14-6所造成的形态回复细胞系RR经体内和体外的恶性检验,证明其确为恶性程度较DT有显著降低的回复突变系。从R14中回收的其它cDNA克隆均不能产生此种回复突变。分子杂交显示p14-6以线形多聚体整合入RR基因组;v-Ki-Ras基因结构无可检出的变化。这些事实提示cDNA克隆p14-6对DT细胞的抗癌基因作用可能是由其cDNA的表达所引起。 对部分DT细胞被p14-6质粒转染后恶性不变的可能原因进行了讨论。  相似文献   
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