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1.
本文用聚合酶链反应(PCR)构建了四对preS区有缺失突变的乙型肝炎病毒表面抗原基因。对这些突变体及我们以前构建的缺失突变体在哺乳动物细胞中的表达和产物性质进行了比较,结果表明,preS区的部分缺失并不影响羧端S区的基本结构和氨端preS区的表面分布性。当缺失preS1区滞留顺序(a.a.2—19)后,preS区对S区带主要抗原决定簇的区域的掩蔽明显减弱。我们发现过长的preS区严重影响表面抗原蛋白从哺乳动物细胞中的分泌,除已知的滞留顺序外,preS1的另一区域(a.a.48—65)可能也有阻滞表面抗原蛋白分泌的作用,而preS2区对LS蛋白分泌的阻滞不起主要作用。preS1的肝细胞受体结合区(a.a.21—47)和S区直接融合所得蛋白性质稳定,分泌良好,有很强的抗preS1抗原性,是值得发展为新型疫苗的带preS1肝细胞受体结合区的表面抗原蛋白。  相似文献   
2.
The expression and secretion of preS containing hepatitis B surface antigen in vaccinia virus system was investigated. The human TK~- 143 cells were infected with the recombinant vaccinia viruses vTMS-1 or vTLS-1. Cells infected with vTMS-1, which contains the preS2+S gene, produced preS2 containing middle HBsAg proteins. Similarly, cells produced preS1 containing large HBsAg proteins upon infection with vTLS-1, which carries the preS1+preS2+S gene. The expression products could be secreted and form 22 nm particles. They reacted specifically with anti-preS1 and/or anti-preS2 monoclonal antibodies, and exhibited pHSA-receptor (for polymerized human serum albumin) activity. In addition, the major S components of hepatitis B surface antigen were also present in the products expressed by vTMS-1 and vTLS-1.  相似文献   
3.
我们组建了带有痘苗病毒胸腺嘧啶核苷激酶(TK)基因的痘苗病毒载体,并将乙型肝炎(以下简称乙肝)表面抗原(HBsAg)基因(adr亚型)插入载体质粒,置于痘苗病毒早期启动基因的调控下。通过感染与转染相结合的方法,得到了带有乙型肝炎表面抗原基因的重组痘苗病毒。它保持了原有的感染性,并能有效地表达乙肝表面抗原。当病毒接种量为每个细胞1PFU(空斑形成单位)时,每1×10~6细胞感染后24h可产生2—3μg HBsAg,其中大部分释放于细胞培养液中。每升培养液可以产生0.5—1mg HBsAg。表达产物HBsAg能形成颗粒,其大小、浮力密度,多肽组份等都与病人血清中的HBsAg颗粒相同。用重组痘苗病毒免疫家兔,可以产生抗乙肝表面抗原的专一性抗体。实验结果表明,利用本文组建的重组痘苗病毒不仅可以提供一个生产乙肝表面抗原的系统,而且这种重组痘苗病毒就可作为活疫苗使用,来预防乙肝病毒感染。  相似文献   
4.
本文对带preS2的乙肝病毒表面抗原基因以及带preS1和preS2的乙肝表面抗原全基因的重组痘苗病毒vTMS-1和vTLS-1的表达和分泌进行了研究。在人TK-143细胞中它们能表达各自所编码的蛋白——乙肝表面抗原中分子蛋白和大分子蛋白。产物是可分泌的,并能形成22nm颗粒。分泌在培液中的表达产物能分别与抗preS2和抗preS1的单抗反应,并保持了天然表面抗原大分子和中分子蛋白所具有的多聚人血清白蛋白的受体活力。它们的表达产物中都还合有乙肝表面抗原主蛋白的成分。  相似文献   
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