固相萃取/液相色谱-质谱/质谱法测定山银花中5种主要黄酮苷元的含量

该文通过含有盐酸的乙醇溶液回流水解并提取,HLB固相萃取柱净化,液相色谱-质谱/质谱法检测,建立了山银花中槲皮素、木犀草素、山萘酚、芹菜素和黄芩素5种黄酮苷元含量的测定方法。实验以芦丁、木犀草苷、紫云英苷、野漆树苷和黄芩苷5种黄酮苷为代表开展研究,山银花样品经50%的乙醇溶液(含10%浓盐酸)回流2 h水解黄酮苷,同时对黄酮苷元进行提取,HLB固相萃取柱净化,采用Mightysil RP-18色谱柱分离,液相色谱-质谱/质谱法检测(电喷雾离子源、多反应监测模式、负离子扫描),外标法定量测定水解后的5种黄酮苷元含量。方法的定量下限(S/N=10)为0.005 g/kg(槲皮素),0.01 g/kg(木犀草素和芹菜素)和0.05 g/kg(山萘酚和黄芩素)。在0~1.0 g/kg范围内,5种黄酮苷元的线性相关系数均大于0.995;在山银花样品中对待测物进行3种加标水平的回收实验(加标水平相当于水解后槲皮素和木犀草素含量为:0.10、0.20、0.40 g/kg,山萘酚、芹菜素和黄芩素含量为:0.05、0.10、0.20 g/kg),方法的平均回收率70.4%~104%;相对标准偏差为4.0%~12%。该方法实现了山银花中多种主要黄酮苷元含量的同时测定,且对研究山银花药效及与黄酮类化合物的关系具有重要意义。     

基于黄酮的长波长荧光探针用于检测体外和体内生物硫醇（英文）

半胱氨酸(Cys)、同型半胱氨酸(Hcy)和谷胱甘肽(GSH)等生物硫醇在生理和病理过程中起着至关重要的作用,尤其是GSH在肿瘤细胞中过度表达,可以作为肿瘤的生物标志物.然而,同时区分活的正常细胞和肿瘤细胞存在着困难和挑战,因此设计并合成了一种基于N,N-二甲氨基萘黄酮(3)的肉眼可见“关-开”型长波长荧光探针(4).该探针对生物硫醇具有较高的选择性和较低的检测限,机理研究表明,生物硫醇催化探针的酯键断裂,生成了强荧光的黄酮3.该探针可用于活细胞和小鼠体内生物硫醇成像,并且对正常肝细胞HL-7702和肝癌细胞HepG2进行选择性成像.     

基于黄酮骨架的“关-开”型荧光探针用于检测活细胞内丁酰胆碱酯酶

以间苯二酚为起始原料，设计合成了一种基于N,N-二甲胺基萘取代的黄酮母核(3)为荧光报告基团的“关-开”型丁酰胆碱酯酶(BChE)荧光探针(4a)，并通过核磁共振波谱(NMR)和高分辨质谱(HRMS)进行了结构表征。结果表明，探针4a能够快速地对BChE产生特异性响应，在pH=8.0的磷酸盐缓冲液(PBS)中，574 nm处荧光强度明显增强，同时肉眼可见溶液颜色的改变。通过高效液相色谱(HPLC)和HRMS对响应机理进行了探讨，发现BChE可使探针的酯键发生断裂，生成具有强荧光的黄酮母核(3)。此外，探针4a可用于检测人肝癌细胞(HepG2)中的BChE并进行荧光成像。     

黄酮药物分子的高效合成

“中药槐花米中芦丁的提取”是基础有机化学实验中经典的植物提取黄酮药物的实验。分析一系列植物提取的黄酮药物分子结构，可看出它们均由2-苯基色原酮(又称黄酮)分子衍生而来。实验中，发现黄酮药物的提取率偏低，不能满足目前人们对黄酮药物的需求，因此尝试用具有高效性的化学方法合成黄酮，并进一步合成其相应的衍生物。本实验分两步合成黄酮，首先利用羟醛缩合合成2’-羟基查尔酮，然后碘催化分子内的环合得到黄酮，实验时长约为6 h，既可作为教学实验，也可作为课后的探索开放性实验。本改进实验具有安全、易操作、重复性好，特别是相对于植物提取具有产率高的优点。此外，通过本次实验的改进，引导学生采用与本实验类似的方法，设计并合成了黄酮的衍生物——乙氧黄酮(治心绞痛药物立可定中的主要活性成分)。本实验丰富了有机化学实验的教学内容，提高了分析和解决问题的能力，潜移默化地培养了学生的科学探索精神。