痕量甲胎蛋白的免疫纳米金催化-氧化亚铜微粒共振散射光谱分析

用粒径15nm的纳米金标记单克隆羊抗人甲胎蛋白（GAFP）,制备了甲胎蛋白（AFP）的免疫纳米金探针（AuGAFP）．纳米金及AuGAFP均对葡萄糖还原铜（Ⅱ）生成Cu2O微粒这一慢反应具有较强的催化作用,Cu2O微粒在620nm处产生1个较强的共振散射峰．将AFP—AuGAFP免疫反应与离心分离技术结合,建立了超痕量AFP的免疫纳米金催化-Cu2O微粒共振散射光谱新方法．随着AFP浓度的增大,AFP-AuGAFP免疫复合物微粒增多,离心液中AuGAFP浓度降低,620nm处的共振散射光强度I620nm线性降低,其降低值△IRS与AFP质量浓度P（AFP）在0．10～16．0．g／mL范围内呈现良好的线性关系,其回归方程为△IRS=4．27P（AFP）＋1．28,检出限为0．05ng／mL．本方法所用试剂易得,反应易控制,灵敏度高,选择性好,用于定量分析人血清中的AFP,结果令人满意．     

基准试剂BaCl2纯度的测定

采用EDTA络合滴定法对BaCl2基准试剂的纯度进行测定.在滴定过程中加入EDTA-Mg,通过置换反应,以EDTA滴定Mg2 指示滴定终点,用ICP-MS法对该试剂中主要杂质如Fe、Eu、Yb、Lu等元素进行测定.EDTA络合滴定法结果与ICP-MS、GDMS杂质扣除法测定结果基本一致.该方法操作简单、快速,滴定时变色灵敏,测定结果精确度高.     

4,7-(氯磺酸基苯基)-1,10-菲啰啉-2,9-二羧酸-铕标记甲胎蛋白抗体

在合成BCPDA基础上 ,对甲胎蛋白抗体与BCPDA连接及与铕离子螯合条件进行了研究。BCPDA与甲胎蛋白抗体反应后 ,分离纯化最佳淋洗液为pH 9.1的 0 .1mol/L碳酸盐缓冲溶液 ,BCPDA用量为甲胎蛋白抗体量 (mol)的 12 0～ 16 0倍 ;反应时间为 30min。讨论了Eu3 + BCPDA AFP抗体螯合物的荧光光谱 ,最佳温育时间为6 0min ,体系pH值为 7.8的Tris HCl溶液。当Eu3 + 浓度为 10 -6mol/L时 ,BCPDA的检出限为 4 .3× 10 -11mol/L。     

基体分离-电感耦合等离子体质谱法测定高纯硒中13种杂质元素

采用基体分离-电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定高纯硒中13种痕量杂质元素含量，优化了试验条件.利用二氧化硒在真空条件下升华温度低的特点挥发基体硒，选择合适的内标元素，考察基体效应的影响.结果表明，选择Cs作为待测元素的内标更合适.测定硒残留量小于100 μg/mL的样品，不影响各待测元素.方法检出限为0.007~0.033 μg/g，RSD为5.7%~19%，加标回收率在90.2%~115%之间，可以满足高纯硒中痕量杂质元素含量的测定.     

高灵敏甲胎蛋白夹心免疫传感器的制备

构建了新型甲胎蛋白(AFP)夹心免疫传感器.采用金纳米粒子-氧化石墨烯-普鲁士蓝纳米立方体(AuNP-GO-PBNCs)纳米复合材料标记甲胎蛋白(AFP)二抗,将制备的金-聚多巴胺-四氧化三铁(Au-PDA-Fe3O4)磁性纳米复合物固定在自制的磁性电极表面,通过吸附作用固定AFP一抗,用牛血清白蛋白(BSA)封闭电极上的非特异性吸附位点.在37℃下与AFP抗原溶液孵育50 min,最后将电极放入AuNP-GO-PBNCs纳米复合材料标记的二抗溶液中孵育,基于此建立了采用普鲁士蓝(PB)标记的的夹心免疫传感器检测AFP的方法.在最佳实验条件下,PB催化H2O2氧化的响应电流与AFP的浓度表现出两段线性关系,线性范围分别为0.005~1.000 ng/mL和1~20 ng/mL, 检出限(LOD, S/N=3)为1.0 pg/mL.本方法具有灵敏度高、选择性好的特点.     

基于聚吡咯修饰膨胀石墨电极的甲胎蛋白电化学免疫传感器

构建了测定人血清中甲胎蛋白(AFP)的电化学免疫传感器。此免疫传感器的制备采用恒电位法在膨胀石墨(EG)电极表面合成聚吡咯(PPy),再以戊二醛(GA)作为交联剂,固定辣根过氧化酶标记的AFP抗体(HRP-anti-AFP)。此免疫传感器在含AFP的溶液中于35℃温育50 min后,再在传感器表面修饰普鲁士蓝(PB)作为电子介体,抗原抗体免疫结合产生的免疫复合物会导致HRP对PB催化氧化的效率降低。在优化条件下,AFP的浓度在0.01～300μg/L范围内呈线性关系,检出限为6.25 pg/mL(S/N=3)。这种基于PPy修饰EG电极的免疫传感器制备简单,灵敏度高且价格低廉,有望成为一次性电化学免疫传感器。     

聚氨酯泡沫塑料吸附-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定地球化学样品中的痕量金

探讨了聚氨酯泡沫塑料的预处理、样品浓度、水洗条件、基体元素对金吸附率的影响等因素。结果表明,用泡沫塑料吸附含金量为5 ng~500μg的溶液,吸附率均在90%以上。影响聚氨酯泡沫塑料吸附率的重要条件是振荡前要用水充分浸透,水洗基体元素,矿渣宜在酸性环境下进行。铁、钛等离子可以提高吸附率,钠、钙、锌、矿渣等影响不显著,铝离子有微弱的抑制作用。ICP-MS的灵敏度与介质的雾化率有一定的相关性,应当使用硫脲介质的工作溶液作工作曲线,内标元素可用103Rh或185Re,但是对于高含量W样品,只能使用103Rh作内标。用金矿石国家标准物质做精密度与准确度验证,测定值与标准值无显著差异,相对标准偏差(RSD)均小于10%,精密度能满足地球化学样品中痕量金的分析要求。     

基体匹配—电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定萤石精矿中痕量有害元素

为向萤石精矿质量检测和环境监管提供可靠的数据支撑，采用基体匹配—电感耦合等离子质谱法测试萤石精矿中痕量有害元素铜、锌、砷、镉和铅的含量。利用硝酸溶解分析纯碳酸钙后，经ICP-MS测试溶液中钙元素含量与理论值偏差约6%。钙溶液经不同倍率稀释后配置基体浓度为1000、2000和5000mg/L多元素标准溶液，在ICP-MS测试不同基体浓度混合标准溶液的内标回收率稳定性和IF/BK压降情况后，确定了1000 mg/L的最佳基体浓度。在传统四酸消解法基础上，通过改变加酸顺序、用量和温控水平，实现对萤石精矿的完全消解。消解实验中，同步设置消解加标、过程空白和空白加标实验。萤石精矿在消解定容及适度稀释后，溶液中离子浓度与复杂基体标准溶液的最佳基体浓度接近。在复杂基体标准溶液及样品消解液测试中，采用He模式的碰撞反应池技术，选用72Ge、115In和175Lu作为内标元素。结果显示：各元素标准曲线线性大于0.9995，各样品内标回收率在80%-110%范围波动，表明基体匹配联合内标校正，有效消除了复杂样品测试中的非质谱和质谱干扰。消解实验中未产生过量的元素沉淀或挥发损失，加标样品各有害元素回收率在90%-120%。质控样品各元素含量测试误差在15%以内。此测试方法中铜、锌、砷、镉和铅的检出限分别为4.81、8.65、17.91、0.49和2.84 μg/L，可满足复杂基体样品中痕量元素含量的准确测试需求。     

聚氨酯泡沫塑料吸附ICP-MS测定地球化学样品中的痕量金

探讨了聚氨酯泡沫塑料的预处理,样品浓度,水洗条件,基体元素对金吸附率的影响。结果表明,用泡沫塑料吸附含金量为5ng-500μg的溶液,吸附率均在90%以上。影响聚氨酯泡沫塑料吸附率的重要条件是振荡前要用水充分浸透,水洗基体元素,矿渣宜在酸性环境下进行。铁、钛等离子可以提高吸附率,钠,钙,锌,矿渣等影响不显著,铝离子有微弱的拟制作用。ICP-MS的灵敏度与介质的雾化率有一定的相关性,应当使用硫脲介质的工作溶液作为工作曲线,内标元素可用103Rh或185Re,但是对于高W样品,只能使用103Rh。用金矿石国家标准物质做精密度与准确度验证,测定值与标准值无显著差异,标准偏差（RSD）均小于10%,精密度能满足地球化学样品中的痕量金的分析要求。     

铕-芦氟沙星的氧化产物- EDTA 配合体系的敏化荧光

提出了测定人体尿液中芦氟沙星的 Eu3＋敏化荧光法,研究了芦氟沙星在 HAc介质中被 H2O2氧化的反应机理。在近中性 HAc－ NaAc缓冲溶液中芦氟沙星的氧化产物与 Eu3＋、 EDTA形成三元络合物,产生 Eu3＋的特征荧光（λ em 617 nm、λ ex 352 nm）,其荧光强度与芦氟沙星的浓度成线性关系。尿液标准曲线线性范围 5.0× 10－ 8～ 2.5× 10－ 6 mol/L,检出限 1.5× 10－ 8 mol/L。方法简单、快速、灵敏。     

癌胚抗原毛细管电泳-化学发光均相免疫分析

建立了一种测定人血清中癌胚抗原的毛细管电泳-化学发光检测的均相免疫分析新方法.采用四苯硼钠增强luminol-H2 O2-HRP体系化学发光的原理,化学发光检测经毛细管电泳分离的,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的癌胚抗体及免疫复合物.测定癌胚抗原的线性范围2.0～80.0 μg/L(R=0.9921),检出限为0.1 μg/L(绝对检出限为0.75 fg).     

电感耦合等离子体质谱法测定镁合金中的多种元素

用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定了镁合金中的Be、Al、Ca、Fe、Mn、Ni、Cu、Zn、Ag、Cd、Sn、La、Ce、Pb14种元素,进行了稳定性实验以及Cu、Zn、Ni、Mg、Al基体实验,考察了共存元素的干扰.镁合金标准物质测定值与参考值符合较好,方法检出限为0.0002～0.3346 μg/g,相对标准偏差RSD＜10%.     

基于聚(3,4-乙烯二氧噻吩)/天青Ⅰ复合物薄膜和纳米金修饰的电流型甲胎蛋白免疫传感器的研究

研制了一种基于聚(3,4-乙烯二氧噻吩)(PEDOT)与天青Ⅰ(AzureⅠ)为基体的电化学免疫传感器,可灵敏检测甲胎蛋白(AFP)。在铂盘电极表面,电化学聚合PEDOT为基体,利用静电组装技术固定AzureⅠ和纳米金颗粒(nanoAus),将甲胎蛋白抗体(anti-AFP)组装到nanoAus的表面。采用辣根过氧化物酶(HRP)封闭非特异性吸附位点,制得电流型AFP免疫传感器。采用循环伏安、扫描电镜技术研究组装过程及电极性质,探讨了影响免疫传感器性能的因素。在优化实验条件下,电极响应与AFP的浓度在0.01~120μg/L的范围内呈线性关系,检出限为0.003μg/L。取临床血清样品用本方法检测AFP含量,得到的结果与临床常用的ELISA法得到的结果无显著性差异。     

微量乙醇对59种无机元素ICP-MS行为的影响

探讨了在相同测试条件下,不同含量乙醇(0.4%~2.0%)作为基体改进剂对59元素ICP-MS信号的影响,测定了最大增敏效果下各元素的检出限。结果表明,微量乙醇对元素ICPMS行为的影响随元素种类或乙醇浓度不同而不同。相同乙醇浓度下,大多数元素的抑制效应随元素质量数增加而减弱,增敏趋势随质量数增加而增强,尤其对电离能大于8 eV的元素,增敏效果更明显;相同元素质量数下,乙醇浓度愈高,抑制作用趋强或增敏趋弱。乙醇作为基体改进剂不同程度降低了除~7Li,~(27)Al及~(232)Th外其余56种元素的检出限,为扩展ICP-MS应用领域提供了更多可能。     

基于一维DNA组装磁性纳米探针的夹心型安培免疫传感器研究

采用Fe3O4(核)/ZrO2(壳)纳米磁珠(ZMPs)标记待测物识别抗体,并用HRP酶封闭和DNA链接,建立了一类新型的"珠链状"一维磁性纳米探针制备方法。将甲胎蛋白(AFP)一抗固定于纳米金修饰的玻碳电极表面,构建了免疫电极(GCE?AFP Ab1)。基于该电极和上述合成探针,通过双抗体夹心法测定免疫产物上HRP酶对过氧化脲(CP)氧化对苯二酚反应的催化电流,研制了一类基于一维纳米结构组装的夹心型安培免疫传感器。研究表明:此一维纳米结构探针不仅大大增加了酶在电极表面的富集量,成倍扩增了催化电流,显著提高了传感器的灵敏度,而且易于通过外磁场与背景液可控分离,简化了分析步骤,并提高了结果的重复性。此传感器对AFP检测的线性范围为0.01~25 mg/L;检出限达4 ng/L(3σ),并被用于人血清中痕量AFP的测定,结果满意。     

膜去溶-ICP-MS法测定高纯Eu_2O_3中14种痕量稀土杂质

研究了不需基体分离,膜去溶-ICP-MS法直接测定高纯Eu2O3中的14种痕量稀土杂质的分析方法。讨论了Eu基体产生的多原子离子对被测元素的质谱干扰。使用膜去溶后,待测元素灵敏度提高3倍左右,EuO/Eu产率从去溶前的0.016%降低为0.0007%。建立了Tm的数学校正方程,通过膜去溶结合数学校正可将Eu基体对Tm干扰完全消除。14种稀土杂质的检出限和(∑RE)为70 ng/L,测定下限和(∑RE)为0.54μg/g。对6N高纯Eu2O3样品进行了分析,样品回收率为96%~109%,RSD小于10%。所建立的方法对Eu2O3标准样品的测定结果与国家标准方法测定结果相一致。     

离子色谱-电感耦合等离子体质谱法测定面粉及其制品中溴酸盐残留量

面粉样品用水分散,含油脂高的样品需另加石油醚,用超声提取和离心分离.分取一定量的上层清液流经On-GuardⅡRP柱除去部分有机杂质,所得流出液用于离子色谱-电感耦合等离子体质谱法(IC-ICP-MS)测定其溴酸盐含量.为尽可能提高ICP-MS检测的灵敏度,选用了仪器高功率工作参数,质谱干扰主要是多原子干扰,选用同位素<'79>Br作为测量同位素.由于经过了色谱柱分离,消除了多原子干扰,在离子色谱分析中采用硝酸及氨水作为流动相,溴酸盐工作曲线的线性范围为100 μg·L-1以内,方法的检出限(3σ/b)为0.6 μg·L-1.应用此方法分析了两种样品,测得平均回收率为97%,测定值的相对标准偏差(n=8)在3.3%～8.3%之间.     

4.0代树枝状分子-卟啉标记伴刀豆凝集素亲和吸附固体基质室温磷光法测定人血清中甲胎蛋白异质体

提出一种4．0代树枝状分子（4.0G-D）-卟啉（P）双发光分子新的磷光标记试剂（4．0G-D-P）．基于4．0G-D-P标记伴刀豆凝集素（ConA）的产物（4.0G-D-P-Con A）能在聚酰胺素膜（PAM）上发射强而稳定的室温磷光（RTP）,而且该标记产物能与甲胎蛋白异质体（AFP-V）发生特异性的亲和吸附（AA）反应,其反应产物保持了4．0G-D-P双发光分子RTP的优良特性,且△Ip值与AFP-V的含量呈线性关系,加入Tween-80可以提高△Ip值,据此建立了Tween-80—4．0G-D-P双发光分子标记Con A亲和吸附固体基质室温磷光法（AA-SS-RTP）测定人血清中AFIP-V的新方法．直接法的检出限为0．31pg／mL（4．0G-D）和0．43pg／mL（P）,灵敏度较高．无论用4．0G-D或P的激发／发射波长测定人血清中AFP-V的含量,结果与酶联免疫法（ELISA）相吻合．     

茜素绿-蛋白质体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用

基于蛋白质对茜素绿共振瑞利散射的增强作用,建立了一种测定水溶性蛋白质的新方法.在酸性BR缓冲溶液中,茜素绿在365 nm处的共振光散射增强与蛋白质浓度呈线性关系.对人血清白蛋白、牛血清白蛋白、γ-人球蛋白、卵白蛋白测定的检出限均低于14 ng/mL.该方法灵敏、稳定、选择性好,适用于人血清、尿液中总蛋白质的测定.     

基于磁性Fe_3O_4/Au-Pt纳米复合物构建甲胎蛋白免疫传感器的研究

制备了磁性Fe3O4/Au-Pt纳米复合物,将该纳米复合物修饰在玻碳电极表面,用牛血清蛋白封闭电极表面非特异性吸附位点。通过循环伏安法对电极的制备过程以及响应性能进行表征。实验结果表明,该修饰电极对甲胎蛋白(AFP)有良好的电流响应,在甲胎蛋白浓度为0.05~1.0ng/mL和1.0~100.0ng/mL两个范围内,分别呈良好的线性,检出限为0.01ng/mL。该免疫传感器制备方法简单,灵敏度较高,有望应用于临床医学中检测人体血清中甲胎蛋白含量。