Comparison of Pretreatment Methods of β-Agonists Residues in Pig Liver and Their Simultaneous Determination

比较了乙酸铵提取法(即农业部1025号公告- 18 - 2008方法)、乙腈直接提取法及10％碳酸钠-乙腈溶液提取法对猪肝脏中9种β-受体激动剂残留的提取效果.结果表明,乙酸铵提取法对非诺特罗和喷布特罗等药物的回收率较低(小于20％);乙腈直接提取法可有效提取出喷布特罗,其回收率达79％,但对非诺特罗的回收率仅为32％;而10％碳酸钠-乙腈溶液提取9种药物的效果明显好于其他两种方法,除了非诺特罗的回收率为72％外,其他8种药物的回收率均在80％以上.基于此,建立了猪肝脏中9种β-受体激动剂残留检测的高效液相色谱-串联质谱法.在优化条件下,9种药物在0.50 ～ 25 μg/kg范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99;在0.50、2.0、10 μg/kg3个加标水平的回收率为71％ ～ 105％,相对标准偏差均小于15％;9种药物的检出限均达0.2μg/kg.方法的准确度和精密度达到残留分析要求.     

UPLC–MS/MS测定动物源食品中9种β-受体激动剂

建立超高效液相色谱–串联质谱法检测动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、氯丙那林、西马特罗、菲诺特罗、妥布特罗、喷布特罗等9种β-受体激动剂的方法。样品经β-葡萄糖醛苷酶酶解,用0.2mol/L乙酸铵溶液(pH 5.2)提取,阳离子固相萃取柱净化,以乙腈–0.2%甲酸水溶液作为流动相进行洗脱,用Eclipse Plus C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱分离,采用多反应监测(MRM)模式进行定性和定量分析。9种β-受体激动剂的质量浓度在0.1~10.0 ng/mL范围内与定量离子丰度呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999,检出限为0.1μg/kg。平均回收率为85.0%~101.2%,测定结果的相对标准偏差为2.8%~9.5%(n=6)。该方法精密度好,灵敏度高,能简便、快速、准确地测定动物源食品中的9种β-受体激动剂。     

液相色谱-电喷雾串联质谱测定猪组织中β-兴奋剂残留的基质效应

系统评价了液相色谱-电喷雾串联质谱测定猪肌肉与肝脏组织中氯丙那林、西马特罗、特布他林、妥布特罗、沙丁胺醇、克伦特罗、喷布特罗、莱克多巴胺及非诺特罗9种β-兴奋剂残留的基质效应及其影响因素.以甲醇、乙腈及乙酸乙酯提取猪肝脏,9种分析物的基质效应分别为13.4％～47.0％、19.9％～63.2％及33.5％～69.6％.多因素方差分析表明,提取溶剂及猪组织来源是引起基质效应的主要因素;固相萃取小柱净化后,分析物浓度对肌肉与肝脏中β-兴奋剂(除莱克多巴胺)的基质效应影响显著;3种SPE小柱对猪组织中喷布特罗的基质效应影响差异显著.     

超高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中残留的9种β-受体激动剂

建立了动物源性食品中特布他林、西马特罗、沙丁胺醇、非诺特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克仑特罗、妥布特罗和喷布特罗等9种β-受体激动剂残留检测的超高效液相色谱-串联质谱方法。样品经酶解后,用高氯酸去除蛋白质等杂质,调节上清液的pH值后,分别用乙酸乙酯和叔丁基甲醚进行萃取,再用MCX固相萃取柱净化,然后用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)分离,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,外标法定量。结果表明:9种β-受体激动剂在0.25～5 μg/kg的空白添加浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.990;特布他林等8种药物的检出限为0.1 μg/kg,定量限为0.25 μg/kg;喷布特罗的检出限为0.25 μg/kg,定量限为0.5 μg/kg。从0.5,1和2 μg/kg共3个添加浓度的检测结果可以看出,9种药物的平均回收率为87.1%～108.6%,批内、批间相对标准偏差(RSD)均小于20%。该方法具有简便快捷、灵敏度高、定性准确等特点。     

超高效液相色谱-串联质谱测定畜肉中14种β-受体激动剂

在动物饲养过程中使用β-受体激动剂类药物可以显著提高猪、牛、羊等动物的瘦肉率。但是残留β-受体激动剂的食物被消费者食用后会危害身体健康。该文建立了超高效液相色谱-串联质谱快速检测畜肉中14种β-受体激动剂(克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、氯丙那林、特布他林、妥布特罗、溴布特罗、班布特罗、齐帕特罗、马布特罗、非诺特罗、福莫特罗、西马特罗、西布特罗)的方法，并对样品前处理和色谱条件进行了优化。样品加入乙酸铵缓冲液(pH 5.2)和β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶，在(36±2)℃水浴中酶解16 h后，放置至室温。经0.5%甲酸乙腈提取，加入NaCl粉末使乙腈和水相分层，取5 mL上层乙腈，使用一步式净化固相萃取柱进行净化，50℃氮气吹干后用0.4 mL 0.2%甲酸水溶液复溶，过0.22μm微孔滤膜后上机分析。以乙腈和0.1%甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱分析，经过Phenomenex Kinetex F5色谱柱分离后采用正离子扫描，多反应监测(MRM)模式进行检测，使用内标法和外标法定量。讨论了前处理过程中提取液的pH值、固相萃取柱种类、净化方式和复溶液的种类对提取效率的影响。采用超...     

超高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽毛发中8种β-受体激动剂

采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法,通过优化β-受体激动剂在毛发中的提取、净化等前处理过程,建立了一种测定畜禽毛发中8种β-受体激动剂含量的方法。样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解,2%甲酸-乙腈溶液提取,MCX固相萃取小柱净化,通过C18色谱柱分离,电喷雾串联质谱多反应监测模式测定。结果表明,8种β-受体激动剂在0.2～10μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.991,回收率在71.5%～114.3%之间,相对标准偏差为1.2%～13%。沙丁氨醇、特布他林、氯丙钠林、莱克多巴胺、拖布特罗和喷布特罗的检出限为0.5μg/kg,西马特罗和克伦特罗的检出限为1.0μg/kg。该方法适用于畜禽毛发中8种β-受体激动剂的定性定量分析。     

高效液相色谱-串联质谱测定猪肉中3种β-受体激动剂残留量

建立一种同时测定猪肉中3种β-受体激动剂残留量的高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)确证分析方法。样品经β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解、乙酸铵缓冲液提取和MCX固相萃取柱净化,采用Agilent ZorbaxSB-C18(2.1mm×150mm,3.5μm)色谱柱,0.1%的甲酸水溶液、甲醇和乙腈作为流动相进行洗脱,高效液相色谱分离,电喷雾离子源电离,正离子多反应监测模式进行检测,内标法定量。3种药物在0.05～1μg/kg浓度范围内线性良好,相关系数r均大于0.999,0.05、0.1、0.5μg/kg3个浓度水平的添加回收率在89.7%～106.7%之间,相对标准偏差为2.4%～8.6%,3种药物的定量限均为0.05μg/kg。方法适用于猪肉中β-受体激动剂残留的确证分析。     

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速筛查动物组织中7种β 受体激动剂残留

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS)快速筛查动物组织中7种β-受体激动剂残留(特布他林、沙丁胺醇、塞布特罗、莱克多巴胺、克伦特罗、溴布特罗、马布特罗)的检测方法。样品经乙酸铵提取,固相萃取净化后,进行UHPLC-Q-TOF-MS测定。根据分析软件,通过理论精确相对分子质量与所测得的精确相对分子质量之间匹配度,以及目标化合物的元素组成分析,结合保留时间、同位素丰度模型和子离子特征,对目标化合物进行确证。结果表明:7种β-受体激动剂在4个加标水平的加标回收率为75%～114%,RSD为4.5%～20.6%。该方法的相关系数(r2)为0.991 4～0.999 9,除克伦特罗的线性范围为0.4～40.0μg/kg,定量下限为0.4μg/kg外,其余化合物的线性范围均为0.2～40.0μg/kg,定量下限为0.2μg/kg。     

阳离子涡流在线固相萃取/液相色谱-串联质谱快速分析猪尿液中16种β受体激动剂残留

建立了液相色谱-串联质谱测定猪尿液中异丙喘宁、氯丙那林、西马特罗、特布他林、妥布特罗、西布特罗、沙丁胺醇、齐帕特罗、克伦特罗、莱克多巴胺、非诺特罗、马布特罗、溴代克伦特罗、马贲特罗、苯乙醇胺A、溴布特罗16种β受体激动剂的全自动分析方法。样品于37℃过夜酶解后,经阳离子在线固相萃取柱(MCX)在3 m L/min涡流下富集,5%氨水甲醇-水(9∶1)洗脱,采用CAPCELL MGⅡ液相色谱柱(150 mm×2.0 mm,3.0μm)分离,0.1%甲酸甲醇-0.1%甲酸(含5 mmol/L甲酸铵)为流动相,电喷雾正离子化监测模式下检测。在该实验条件下,16种β受体激动剂在0.01~50μg/L浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数(r2)不小于0.998 3,检出限(LOD)为0.01~0.025μg/L,定量下限(LOQ)为0.025~0.10μg/L;方法的回收率为62.4%~117.1%,相对标准偏差(RSD)为3.9%~16.3%。将方法用于213份猪尿液中β受体激动剂残留的检测,测定结果表明该方法灵敏、简单,可用于批量猪尿液中16种β受体激动剂的快速确证分析。     

在线净化液相色谱-串联质谱法测定畜禽粪便中7种β2-受体激动剂

建立了同时测定畜禽粪便中福莫特罗、沙美特罗、卡布特罗、克伦异磅特罗、克伦潘特、克伦塞罗和羟甲基克伦特罗7种β2-受体激动剂的超高效液相色谱-串联质谱( UPLC-MS/MS)分析方法。样品经酸性乙腈充分提取后,再用0.2％甲酸溶液稀释,提取液用阳离子交换在线净化柱( HyperSep Retain CX)净化,2％氨水-甲醇溶液将分析物洗脱转入至Hypersil Gold C18分析柱,经色谱分离后,用串联质谱检测。在正离子电喷雾条件下,采用选择反应监测模式检测,以外标法定量。结果表明,7种β受体激动剂在0.5~100μg/L的浓度范围内线性良好,线性相关系数均大于0.9928。取3倍信噪比下,畜禽粪便中7种β2受体激动剂的检出限为1μg/kg,定量限为5μg/kg。在空白猪、鸡粪便中添加5~50μg/kg水平的7种β2受体激动剂,得到平均回收率为67％~112％,其相对标准偏差为2.9％~10.2％。本方法简单快速,适用于畜禽粪便中β2-受体激动剂残留的定量及确证分析。     

液相色谱串联质谱法测定猪肉和猪肝中9种磺胺类药物的残留

建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC/MS/MS)同时测定猪肉及猪肝中9种磺胺类药物残留的检测方法.样品经10％的Na2SO4溶液和乙腈-氯仿(10:1)提取,乙腈饱和正己烷去脂,使用乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)和十八烷基键合相硅胶(ODS C18-N)两种基质分散净化剂净化,采用LC-MS/MS多反应监测(MRM)正离子模式测定,内标法定量.9种磺胺检出限为0.1 ～0.8 μg/kg,在5,10,20μg/kg 3个浓度添加水平,回收率为74.1％ ～ 115.8％,相对标准偏差均小于6.2％(n=6).     

同位素稀释高效液相色谱串联质谱法测定猪肝中地塞米松和倍他米松残留量

建立了同位素稀释高效液相色谱串联质谱法测定猪肝中地塞米松和倍他米松残留量的分析方法。样品经酶解后用乙腈提取,再经C18固相萃取和碳酸钠溶液液液萃取净化,净化后的样品经氮气吹干后用流动相溶解。采用Hypercarb C18柱,以乙腈-水-甲酸(95∶5∶0.5,V/V)混合溶液为流动相,进行高效液相色谱串联质谱分析,同位素内标法定量分析。地塞米松和倍他米松的检出限为别为0.12和0.14μg/kg,定量限分别为0.42和0.47μg/kg。在添加浓度0.75～2.0μg/kg范围内,平均添加回收率为97.3%～111%,批内和批间相对标准偏差(RSD)分别为1.85%～5.65%和2.78%～7.98%。待测物定量离子对峰面积与内标物峰面积比值与标样浓度在10～500μg/L范围内呈良好的线性关系,线性回归系数大于0.9997。     

基于增强型脂质去除固相小柱净化结合液相色谱-串联质谱法测定猪肉和猪肝中的双甲脒农药及其代谢物

建立了采用增强型脂质去除(EMR-Lipid)固相小柱净化结合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定猪肉和猪肝中双甲脒 (AMZ) 及其3种代谢物2,4-二甲基苯胺(DMA)、单甲脒(DMPF)和2,4-二甲基苯基甲酰胺(DMF)残留量的方法。 样品经乙腈蛋白沉淀及盐析提取,通过Captiva EMR-Lipid 过滤小柱净化,滤膜过滤后,采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C₁₈柱(50 mm×2.1 mm,1.8 μm)分离,以0.1%甲酸水溶液与0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子方式扫描,多反应监测模式进行检测。 结果表明,在猪肝与猪肉中AMZ、DMA线性范围为1～200 μg/kg,DMPF和DMF的线性范围为0.1～200 μg/kg,相关系数(R²)均大于0.991;AMZ、DMA、DMPF和DMF的方法定量限(S/N=10)分别为0.6、0.6、0.05、0.05 μg/kg;对空白猪肉和猪肝进行0.1、1、5、50 μg/kg 4个浓度水平的加标实验,回收率在60.2%～127.4%之间,相对标准偏差均低于12%。 该方法简便、快捷,适用于猪肉和猪肝中双甲脒及其代谢物残留量的同时测定。     

Multiresidue analysis of nine β‐agonists in animal muscles by LC‐MS/MS based on a new polymer cartridge for sample cleanup

A novel, sensitive, and reliable LC‐MS/MS method for multiresidue analysis of nine β‐agonists (salbutamol, terbutaline, cimaterol, fenoterol, clorprenaline, ractopamine, tulobuterol, clenbuterol, and penbuterol) in four farm animal muscles was developed. Muscle matrix was extracted with acetonitrile–10% sodium carbonate solution, and then was subjected to cleanup using a SPE cartridge packed with new polymer synthesized in acetone. Chromatographic separation of the components was performed on a Luna C₁₈ column using 0.1% of formic acid in water and acetonitrile. The mass spectrometer was operated in the positive electrospray mode. Good precision and accuracy were obtained for all analytes (except for fenoterol) at the spiked three levels of 1.0, 10, and 50 μg/kg. The decision limit and detection capability of nine β‐agonists ranged from 0.04 to 0.18 and 0.15 to 0.69 μg/kg, respectively. The method developed was successfully applied to the monitoring of nine β‐agonists in pork, beef, mutton, and chicken from Chinese markets.     

The determination of β-agonist residues in bovine tissues using liquid chromatography–tandem mass spectrometry

We aimed to develop a rapid, simple and reproducible method based on LC–tandem mass spectrometry (LC–MS/MS) to analyze β-agonist residues (clenbuterol, zilpaterol, ractopamine and isoxsuprine) in bovine tissues. The method was validated in accordance with the European Council Decision 2002/657/EC. The samples were homogenized, and then 10 mL of an acetate buffer was added to a 5-g sample. The sample was then centrifuged at 12,000 rpm and filtered. Sodium hydroxide (2 m ) was added to adjust pH of the sample that was centrifuged again. The extract was filtered through a solid-phase extraction column. The residue was re-dissolved in 250 μL acetonitrile and then subjected to LC–MS/MS. The separation was done on a C₁₈ column. The mobile phase consisted of 0.1% formic acid in deionized water and 0.1% formic acid in methanol. The mean recoveries of β-agonists were in the range of 84.3%–119.1% with relative standard deviations (%RSDs) of 0.683%–4.05%. Decision limits and detection capabilities of the analytes ranged from 0.0960 to 4.9349 μg/kg and from 0.0983 to 5.0715, respectively. This method was used to detect four β-agonists in 100 bovine muscle, 100 liver and 100 kidney tissues from a slaughterhouse. No residue was found above the maximum residue limit level.     

液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的9种β-兴奋剂残留量

建立了猪组织中9种β-兴奋剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗、妥布特罗、西马特罗和异舒普林)多残留的液相色谱-四极杆/线性离子阱串联质谱(QTrap LC-MS/MS)检测方法。样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解提取,液液萃取净化,以乙腈-甲酸水溶液为流动相,经C18柱分离后用QTrap LC-MS/MS进行多反应监测(MRM)、信息相关采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI)和谱库检索分析。9种β-兴奋剂的线性范围为0.1～50.0 μg/L,线性关系良好(r＞0.99);样品中9种目标物在0.5、1.0和5.0 μg/kg添加水平下的回收率为72.0%～95.1%,相对标准偏差为3.1%～12.1%;方法检出限为0.1～0.2 μg/kg。实际样品检测结果表明,本方法可实现猪组织样本中β-兴奋剂残留量的灵敏、准确的定性和定量分析。     

气相色谱-负化学离子源质谱测定大豆和玉米中12种三唑类杀菌剂的残留量

建立了一种可用于大豆和玉米中12种三唑类杀菌剂残留量测定的分散固相萃取-气相色谱-负化学离子源质谱方法。样品经含1%冰醋酸的乙腈提取,分散固相萃取法净化,采用气相色谱-负化学离子源质谱分时段选择离子监测技术进行测定与确证,外标法定量。12种农药在50～1000 μg/L范围内线性关系均良好;所有农药的方法定量限(LOQ)均低于8 μg/kg;在10,20和40 μg/kg 3个添加水平下所有农药的回收率为70%～130%,相对标准偏差(RSD)≤13.9%。该方法在检测大豆和玉米基质时无干扰现象出现。