离子色谱中的安培检测方法及其应用

介绍了离子色谱中的安培检测方法(包括恒电位安培检测法、脉冲安培检测法和积分脉冲安培检测法)的原理和应用。脉冲安培检测法与高效阴离子交换色谱结合(HPAEC-PAD)是一种新的分析糖类化合物的方法;积分脉冲安培检测法与高效阴离子交换色谱结合(HPAEC-IPAD)是一种新的氨基酸分析方法。     

阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法分离测定烟草料液中的山梨醇和糖

采用阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法分离测定了烟草料液中山梨醇、葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖,研究了山梨醇和糖在阴离子交换色谱中的保留行为。采用优化的水和氢氧化钠二元梯度淋洗条件,CarboPac PA10阴离子交换色谱柱进行分离,积分脉冲安培检测器检测一次进样测定烟草料液样品中的山梨醇、葡萄糖、果糖、蔗糖和麦芽糖。各组分在测试条件下线性关系良好,线性范围为0.005～20 mg/L,检测限为0.2～1.0 μg/L,加标回收率为95.1%~102.4%,相对标准偏差为1.2%～1.9%。     

高效阴离子交换色谱-脉冲电化学检测方法和应用

评述了高效阴离子交换色谱和脉冲电化学检测方法。内容包括：色谱柱和流动相;糖和氨基酸在色谱柱上的保留行为;脉冲安培法(PAD)和积分脉冲安培法(IPAD);方法在糖和氨基酸分析中的应用。     

阴离子交换-积分脉冲安培检测法分离测定氨基酸注射液中的氨基酸和葡萄糖

 用阴离子交换 积分脉冲安培检测法测定了氨基酸注射液中 1 7种氨基酸和葡萄糖。研究了氨基酸和葡萄糖在阴离子交换中的保留行为。采用了优化的水、NaOH和NaAc三元梯度淋洗条件。在优化的梯度淋洗条件和积分脉冲安培检测条件下 ,氨基酸和葡萄糖的检出限为 0 3pmol～ 1 0 3pmol,线性范围约为 2个数量级。样品加标回收率为 88 3 %～ 1 0 4 6 %。方法简单、灵敏、准确。     

阴离子交换色谱-积分脉冲安培法测定人体尿液中的异黄蝶呤

蝶呤类化合物是细胞代谢过程中的重要辅助因素,可以作为多种疾病早期诊断的标志物.其中,新蝶呤的研究较为深入,临床上已经作为肿瘤标志物用于肺癌~([1])等癌症的诊断,而其它蝶呤类化合物的研究和应用相对较少.目前,蝶呤类化合物的检测主要采用高效液相色谱法~([2]).近年来,高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法(HPAEC-IPAD)已成为测定糖类化合物和氨基酸的较好的分析方法,已经应用于液体调味品~([3])等样品的分析测定.本研究建立了高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法测定人体尿液中异黄蝶呤的分析方法,并将固相萃取技术应用于样品前处理,成功地将大量干扰物质去除.     

缬氨酸产品中微量氨基酸杂质的高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培测定

在优化实验条件下,建立了高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法分离测定缬氨酸产品中微量氨基酸杂质的方法。研究了氨基酸的阴离子交换色谱分离和积分脉冲安培检测。采用优化的水、0.25 mol/LNaOH、1.0 mol/L NaAc三元梯度淋洗条件及35℃柱温实现了19种氨基酸的分离。在最佳条件下,氨基酸的检出限(S/N=3)为3.1~67.1 nmol/L,线性范围约为3个数量级。样品加标回收率为90%~96%。方法可以推广至其它氨基酸产品中微量氨基酸杂质的测定。     

高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法分析糖类化合物影响因素的研究

研究了高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法分离测定糖类化合物的一些影响因素。这些因素包括NaOH淋洗液浓度、色谱柱温度和积分脉冲安培检测的采样电位。实验用AminoPac PA10阴离子交换柱分离糖类化合物。当NaOH淋洗液浓度增大时,糖类化合物的保留值减小,并有洗脱顺序的变化。糖的保留只表现为放热行为,但是每种糖的保留受温度的影响程度不同,即当温度改变时每种糖保留时间的变化程度不同。一般规律是随糖分子增大(依单糖、双糖、三糖、四糖顺序),其保留时间的变化程度增大。通过改变温度可以改善两种相近洗脱糖之间的分离状况。糖的范特霍夫(Van’t Hoff)曲线具有良好的线性关系。积分脉冲安培检测的采样电位增大,糖检测的峰面积增大。通过提高采样电位,可以改善糖的检测。     

植物中游离氨基酸的分析方法

综述了目前用于检测植物(如茶叶、蔬菜、水果、药材及烟草)中游离氨基酸的分析方法,如柱后衍生离子交换色谱法、柱前衍生反相高效液相色谱法、超高效液相色谱法、阴离子交换色谱-脉冲积分安培法、毛细管电泳法、气相色谱法和液相色谱-串联质谱法等。对这些方法的优缺点进行了讨论,同时对未来分析方法的发展提出了展望(引用文献57篇)。     

离子色谱研究获重大突破

中国科学院生态环境研究中心的牟世芬和蔡亚岐研究员及其课题组完成的“高效阴离子交换色谱一积分脉冲安培电化学检测分析新方法的研究”获重大突破，解决了糖和氨基酸分析彼此干扰等难题，灵敏度比现在的国标法高几十到几百倍，获中国分析测试协会科学技术奖。     

高效阴离子交换色谱分离-积分脉冲安培检测法同时测定烟草薄片中的糖和保润成分

建立了阴离子交换色谱分离-积分脉冲安培检测分离测定烟草薄片中糖和保润成分的方法,研究了4种糖成分(葡萄糖、半乳糖、果糖和蔗糖)和5种保润成分(丙二醇、丙三醇、木糖醇、山梨醇和甘露醇)在色谱中的保留行为。以480 mmol/L NaOH淋洗液等度淋洗,Carbopac MA1阴离子交换色谱柱进行分离,积分脉冲安培检测器检测,在所考察浓度范围内,9种化合物在测试条件下线性关系良好,线性相关系数大于0.996,检出限为12.6~39.9μg/L(以3倍信噪比计算),5次平行进样,相对标准偏差为1.1%~3.3%,标准加标回收率在95.4%~104.8%之间。     

Simultaneous determination of amino acids and carbohydrates by anion-exchange chromatography with integrated pulsed amperometric detection

A direct, sensitive, simple and practical method for simultaneous determination of amino acids and carbohydrates by anion-exchange chromatography with integrated pulsed amperometric detection was developed. The retention behavior of amino acids and carbohydrates on the anion-exchange column and the detection of amino acids and carbohydrates at different integrated pulsed amperometric detection waveforms were investigated. The optimized gradient eluent conditions for analysis of 17 amino acids and nine carbohydrates were obtained. Separation time was 100 min. Detection limits for amino acids and carbohydrates were 5.2-207.1 nM under injection volume of 25 microl. The RSDs of peak area were 1.2-3.3%. The calibration graphs of peak area for the analytes were linear over about three orders of magnitude with a correlation coefficient of 0.9950-0.9999. The method was applied to determine amino acids and carbohydrates in a liquid condiment with satisfactory results.     

Simultaneous determination of amino acids and carbohydrates in culture media of Clostridium thermocellum by valve-switching ion chromatography

An improved method for the simultaneous determination of 20 amino acids and 7 carbohydrates using one-valve switching after injection, ion chromatography, and integrated pulsed amperometric detection is proposed. The resolution of the amino acids and carbohydrates in the cation trap column was investigated. In addition, parameters including flow liquid type, flow rate, concentration, and valve-switch timing were optimized. The method is time-saving, effective, and accurate for the simultaneous separation of amino acids and carbohydrates, with a mean correlation coefficient of >0.99 and repeatability of 0.5–4.6% for eight replicates. The method was successfully applied in the analysis of amino acids and carbohydrates in aseptic media and in extracellular culture media of three phenotypes of Clostridium thermocellum.     

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定烤烟中的水溶性葡萄糖、果糖和蔗糖

用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（HPAEC-PAD）测定了烤烟中的水溶性葡萄糖、果糖和蔗糖。采用水浸取及膜过滤法处理烤烟样品,以Dionex CarboPac PA-1阴离子交换柱为色谱柱，0.2 mol/L NaOH水溶液为淋洗液进行分离测定。葡萄糖、果糖和蔗糖的含量与其峰面积的线性关系良好,回收率均在97%以上。方法简便易行,灵敏度高,重现性良好，可以实现对烟草中单糖的快速分离和测定。     

离子色谱-积分脉冲安培检测法同时测定酱油中20种氨基酸和6种糖

建立了梯度淋洗-离子色谱-积分脉冲安培检测法同时测定酱油中20种氨基酸和6种糖的方法，通过对色谱柱温度、pH值、放置时间等实验影响因素的考察，探索出了适合26种组分测定的多级梯度淋洗条件。结果表明，当流速为0.25 mL/min，pH值在5.2~6.7，柱温在35℃时，26种组分在各自的浓度范围内具有良好的线性关系（r² ≥ 0.995）。除了谷氨酰胺、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸外，其他22种组分的检出限均小于0.03 mg/L；在0.20、0.50、2.00 mg/L 3个添加水平下，回收率为84.2%~109%，RSD为2.7%~7.8%。该方法高效、简便、灵敏、准确，可用于酱油中多种氨基酸和糖的同时测定以及掺假辨别技术研究。     

Off-line elimination of carbohydrates for amino acid analysis of samples with high carbohydrate content by ion-exchange chromatography

This paper introduces a new off-line sample preparation that eliminates carbohydrates from amino acid samples containing a high carbohydrate content before analysis by anion-exchange chromatography and integrated pulsed amperometric detection. First, the sample is introduced into a cation-exchange column in the hydrogen form. Carbohydrates are removed completely using 0.02% formic acid as a transfer fluid, while only amino acids are retained. Amino acids are then extracted from the cation-exchange resin by 10 ml of 1 M ammonia. The ammonia collected is evaporated to dryness and the residue redissolved in water containing 20 mg/l NaN3 for injection. All amino acids are recovered following the carbohydrate removal step. The average recovery is 97.2%. The relative standard deviation for seven replicates is less than 5.2%. The usefulness of the method is illustrated with chromatograms of ratafia samples obtained before and after the off-line removal of carbohydrates.     

反相高效液相色谱法测定不同烟叶中的游离氨基酸

用乙醇水溶液提取烟叶中的游离氨基酸并通过阳离子交换柱纯化后,采用OPA(邻苯二甲醛丹酰氯)、FMOC(9-芴基甲氧基羰酰氯)联合在线衍生反相高效液相色谱法对烤烟、白肋烟和香料烟中的游离氨基酸进行了对比研究,发现白肋烟、香料烟和烤烟的烟叶中所含游离氨基酸总量分别为14.0mg/g、7.7mg/g和3.3mg/g;三者在所含主要氨基酸种类上存在显著差别。用该方法考察了不同产地烟叶中游离氨基酸的含量。     

氨基酸的分析方法及其应用进展

 从衍生试剂角度,介绍了不同衍生化氨基酸的分析方法,包括离子交换色谱法、高效液相色谱法、气相谱法和毛细管电泳法,以及无需衍生化的直接分析法高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法,并总结了蛋白质、食品和生理体液样品中的氨基酸分析方法。     

Simultaneous determination of carbohydrates and organic acids in beer and wine by ion chromatography

The simultaneous determination of mono-organic acids and carbohydrates by ion chromatography with both conductometric and pulsed amperometric detection is described. The carbohydrates, such as mannitol, arabinose, glucose, fructose, lactose, sucrose, raffinose, and maltose, as well as monoorganic acids including acetate, glycolate, formate, pyruvate, and fluoride are separated as anions by ion-exchange chromatography with 0.080 mol/L sodium hydroxide eluent at 1 mL/min within 12 min. Carbohydrates are determined by pulsed amperometric detection and mono-organic acids are determined by suppressed conductivity detection. The species in beverages are determined.