高效液相色谱法同时测定食品中脂溶性维生素A,D3,E,K3

１引言维生素是维持细胞正常生理功能的营养成分之一。许多维生素是酶的辅基或酶的组成成分，因此，测定食品中维生素的含量是食品营养分析的主要内容之一。脂溶性维生素的分析方法一般采用生物法、分光光度法及薄层色谱法等，但这些方法都只能单独测定食品中的维生素，进入８０年代后，随着高效液相色谱（ＨＰＬＣ）技术在食品分析中的应用，国外许多研究工作者在利用高效液相色谱技术分析脂溶性维生素的研究上作了许多工作，发展了更具选择性的方法如电化学法、质谱法等，并且对同时测定脂溶性维生素的方法作了一些探索。本文旨在综合国内…     

反相高效液相色谱法测定维生素D_2和维生素D_3

提出了用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分离和测定胶囊、油状试剂中维生素D2及维生素D3的含量。样品用甲醇超声提取,提取液用甲醇定容至100mL,经0.45μm滤膜过滤后供HPLC分析。采用Zorbax SB-C18反相色谱柱及C18保护柱作为分离柱,乙腈作为流动相,流量为1.0mL.min-1,在波长265nm处作紫外检测,进样量为20μL。维生素D2和维生素D3的质量浓度在0.50～20mg.L-1范围内与相应的峰面积呈线性关系,测得检出限(3S/N)依次为0.030,0.026mg.L-1。此方法应用于实样分析并在此基础用标准加入法做回收试验,同时进行精密度试验,测得回收率在95.0%～99.4%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.2%～2.6%之间。     

HPLC同时测定保健食品中维生素A、D3、E和β-胡萝卜素

建立了一种同时测定保健食品中维生素A、D3、E、β-胡萝卜素的高效液相色谱法。样品皂化后乙醚提取,旋转蒸干,流动相溶解,HPLC紫外检测。实验结果显示,VA、VD3、VE和β-胡萝卜素的线性范围分别为0.012~500、0.030~500、0.12~500和0.015~500μg/mL,且浓度范围内线性良好;检出限分别为0.24、0.60、2.40和0.30μg/g;相对标准偏差分别为1.9%、3.4%、4.6%和2.9%;VA、VD、VE和β-胡萝卜素的加标回收率为84.8%~119.0%。分析周期在20 min以内,方法适合保健食品样品的分析。     

高效液相色谱法同时测定强化牛奶中的维生素A和D_2

A reversed-phase high performance liquid chromatographic method for the simultaneous determination ofvitamin A and D_2 in fortified milk has been developed. A couple of serially connected columns with μ-Bonda-pak C_(18)(300 × 3. 9mm, 10μm)and Novapak C_(18)(150 × 3. 9mm, 4μm)and methanol/water(96/4)mobile phasewere used. Vitamin A and D_2 were detected at wavelengths of 325nm and 265nm, respectively. By usingsaponification procedure, the recoveries of vitamin A and D_2 were in the range of 90～110%.     

在线二维液相色谱法同时测定婴幼儿和成人配方营养品中的维生素A、D3和E

建立了在线二维液相色谱同时快速测定婴幼儿配方乳品和成人强化乳品中维生素A、D₃和E含量的方法。首先,依据疏水减法模型,选择C8柱和极性嵌合的反相C18柱分别作为一维和二维分离柱,构成正交分离体系,并均以甲醇、乙腈和水作为流动相,检测波长设为263 nm(维生素D₃)、296 nm(维生素E)和325 nm(维生素A)。采用双三元液相色谱的左泵作为一维分析泵,完成维生素A、E的定量和维生素D₃的净化;根据维生素D₃在一维色谱柱上的保留时间,确定切割时间窗口,并以500 μL定量环收集含有维生素D₃的馏分,由双三元液相色谱的右泵将馏分带到二维色谱柱中,以维生素D₂作为内标物,采用内标法完成维生素D₃的定量分析,整个过程在密闭系统中自动化完成。在上述优化条件下测定了婴幼儿和成人奶粉、奶酪及酸奶等强化乳品中3种维生素的含量。经过1.25 kg/L KOH溶液的热皂化和石油醚的萃取,样品萃取液直接进样分析,得到维生素D₃的加标回收率为75.50%~85.00%,并通过配对t检验法与标准方法测定结果进行比较分析,结果差异无统计学意义,表明本方法可同时快速、准确测定婴幼儿及其他配方营养品中维生素A、D₃、E的含量,提高了样品分析效率。     

高效液相色谱法同时测定无骨海鱼中的维生素A、D和E

采用反相高效液相色谱法,以甲醇(49 1)为流动相,对维生素A、D和E混标进行高速紫外扫描,在Nova Pak C18柱上获得分离良好的三维图谱。据此,选择维生素A、D和E各自最大吸收波长325、265和290nm作为检测波长。实验结果表明:无骨海鱼中维生素A、D和E的质量分数分别为0.80、0.17、4.14mg kg,相对标准偏差为3.7%～5.0%。质量浓度0.10～10mg L范围内,维生素A、D、E均呈现良好的线性关系,检出限为0.05～0.62mg L,回收率在90.0%～110%之间。     

超临界色谱法测定化妆品中生育酚及α-生育酚乙酸酯

建立了化妆品中4种生育酚异构体及α-生育酚乙酸酯的超临界色谱分析方法。不同基质类型的化妆品经乙腈水溶液-正己烷溶剂体系按不同的添加顺序进行分散、提取、液液分配后,以二氧化碳为流动相,异丙醇-正己烷(1∶1)为改性剂,利用亚乙基桥杂化颗粒色谱柱(Viridis@BEH,250 mm×4.6 mm,5μm)对目标物和样品杂质进行有效分离,用光电二极管矩阵检测器(SFC-PDA)进行测定。系统考察了提取条件和色谱条件对实验结果的影响。结果表明:4种生育酚和α-生育酚乙酸酯的定量下限(S/N=10)分别为50 mg/kg和25 mg/kg,空白基质加标回收率为81.3%~109.5%,相对标准偏差(RSD)不大于12.8%。该方法前处理简单、快速、准确,可用于各类化妆品中4种生育酚异构体及α-生育酚乙酸酯含量的检测。     

超临界流体色谱同时测定维生素B2,B3和烟酰胺

采用超临界流体色谱同时定量测定维生素制剂中维生素B2(核黄素)、维生素B3(烟酸)和烟酰胺的含量。在CO2流动相中添加15%(体积分数)的甲醇(含0.1%二乙胺),于填充柱上分离,检测波长为268 nm。上述3种维生素在测定范围内,其浓度与相应的峰面积呈良好的线性关系(r＞0.999),平均回收率为97.3%-102.3%;5 min即可完成分析。其日内和日间峰面积测定的相对标准偏差(RSD)小于1.5%。该方法简便,样品前处理简单,可用于上述3种维生素的快速分析。     

在线二维反相色谱法快速测定维生素AD制剂中维生素A、D的含量

建立了在线二维液相色谱法快速同时测定维生素AD制剂中维生素A和D的含量。依据药典对系统适应性的要求,选择一种极性嵌合的C_(18)柱(Accucore polar premium)作为二维色谱柱,再依据疏水减法模型原理和待测样品的脂溶性特点,选择C_8柱作为一维色谱柱,一维和二维分离均采用甲醇、乙腈和水作为流动相。样品经乙醇提取后直接进样分析,采用双梯度液相色谱右泵作为一维分析泵,完成含量较高的维生素A定量及维生素D的净化;采用左泵作为二维分析泵,维生素D及前维生素D在二维色谱柱上实现分离和定量。根据维生素D在一维色谱上的出峰起止时间,确定切割时间窗口,以500μL定量环收集含有目标物的馏分,检测波长分别为264 nm和325 nm。采用外标法完成对维生素D和前维生素D的定量。整个过程在密闭系统中自动化完成。维生素A在0.1~250 mg/L,维生素D在0.02~50.0 mg/L范围内线性关系较好,相关系数(r)大于0.999;维生素D的回收率为89.9%~98.9%,连续进样的精密度和重现性的RSD分别为0.48%和1.2%,表明方法的精密度和重现性较好。