褐藻糖胶及其与胶原复合物的体外抗凝血活性研究

用FTIR、UV对从海带中提取的褐藻糖胶结构进行了分析。采用部分凝血活醇时间、凝血酶原时间和凝血醇时间作为评价标准，对其体外抗凝血活性作了初步的评价，并与肝素的抗凝血活性作比较。结果表明：褐藻糖胶具有类似肝素的多糖结构，具有较好的抗凝血活性，但低于肝素。将褐藻糖胶固定于胶原上，所得的胶原-褐藻糖胶复合物仍具有一定的抗凝血活性。     

褐藻糖胶的分离、化学修饰和清除羟自由基作用研究

用酸法提取褐藻糖胶,经乙醇初步分级得褐藻糖胶HD1和褐藻淀粉HD2;褐藻糖胶HD1经DEAE(二乙氨乙基)-纤维素柱层析,控制洗脱速度1.0mL/min,先经二次水洗脱,然后用0～1.5mol/LNaCl梯度洗脱;浓缩、透析,得褐藻糖胶HDⅠ和HDⅡ;用氯磺酸法合成了硫酸酯化褐藻糖胶HDSⅡ;红外光谱法确定了硫酸酯键的特征吸收。通过Fenton反应产生羟自由基模型,对比研究了褐藻多糖化学修饰前后体外抗氧自由基性质;褐藻糖胶HDⅡ经硫酸化修饰后、通过清除.OH自由基表明,褐藻糖胶组分HDⅡ、HDSⅡ均可作为自由基清除剂。     

基于脂质代谢组学研究褐藻糖胶对黄颡鱼幼鱼的影响

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱 (UPLC-Q-TOF-MS) 技术,结合多元变量数据分析方法,研究0.1%褐藻糖胶喂养黄颡鱼幼鱼1~8周的脂质代谢组学.通过不同喂养时间的黄颡鱼脂质成分的重要性(VIP)值和差异性(P)值,筛选出98个差异性代谢物,其中鉴定出与褐藻糖胶对黄颡鱼随喂养时间变化的影响有重要作用的11种脂质生物标志物,包括Lyso-PC 16∶0、PC 22∶6/16∶0、PE 22∶6/16∶0、PI 18∶0/22∶6、DAG 16∶0/16∶0、DAG 16∶0/18∶1、DAG 18∶1/18∶1、TAG 20∶5/16∶0/18∶3、TAG 20∶4/16∶1/18∶2、TAG 16∶0/18∶2/20∶5 和TAG 18∶2/14∶0/18∶1.研究表明,经0.1%褐藻糖胶喂养不同时期的黄颡鱼中Lyso-PC、PC、PE和PI的含量在第8周时达到最大值;DAG的含量呈现出先减少后增加的变化规律,而TAG的变化不定,TAG 18∶2/14∶0/18∶1、TAG 20∶5/16∶0/18∶3和TAG 20∶4/16∶1/18∶2的含量随着喂养褐藻糖胶时间的延长而增加,而TAG 16∶0/18∶2/20∶5呈减少的趋势.根据上述实验结果,推测褐藻糖胶可能通过调节脂质成分的含量来增加黄颡鱼幼鱼的免疫力.本研究结果为褐藻糖胶对黄颡鱼脂质代谢响应机理的影响的研究提供理论依据.     

不同提取方法所得褐藻糖胶的理化性质比较

通过各种理化性质的测定,对不同提取方法所得褐藻糖胶进行了分析,乙醇沉淀法的测定结果为:总糖含量(76.00±9.00)%、硫酸根含量(11.33±0.47)%、岩藻糖含量(35.60±4.20)%、重均/数均分子量(3.42×104)/(1.21×104);高分子电解质沉淀法的测定结果为:总糖含量(70.00±11.00)%、硫酸根含量(10.80±0.58)%、岩藻糖含量(35.15±2.85)%、重均/数均分子量(1.15×105)/(5.88×104)。高分子电解质沉淀法所得褐藻糖胶粗品和纯化后褐藻糖胶,其高分子电解质残留量分别为(0.12±0.038)%和(0.022±0.002)%。结果表明,乙醇沉淀法所得产品质量优于高分子电解质沉淀法,但是高分子电解质沉淀法具有工艺简单、成本低,更适于工业化生产等优点。     

ICP－AES法检测Sr、Ca、Mg、P在海带多糖中的分布

应用ＩＣＰ－ＡＥＳ技术，检测了Ｓｒ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｐ在海带叶状体的褐藻淀粉、藻酸盐、褐藻糖胶和纤维素等多糖中的分布，发现锶主要存在于褐藻糖胶中［９．６×１０－３（糖干重），占叶状体总锶的４７．２％］，而其他成分中的锶含量都较低。提示锶与维持藻体结构有关。     

褐藻多糖铈配合物对质粒DNA及牛血清白蛋白的裂解作用

以褐藻糖胶、褐藻酸及褐藻演粉为配体，分别与四价的铈（Ce^4 ）结合，形成了水溶性的褐藻多糖铈配合物，在生理中性条件下，它们对牛血清白蛋白（BSA）均有一定的裂解作用，但对质粒DNA（Plasmide DNA）仅有褐藻淀粉铈配合物有非常明显的裂解作用。     

ICP—AES法检测Sr,Ca,Mg,P在海带多糖中的分布

应用ＩＣＰ－ＡＥＳ技术，检测了Ｓｒ，Ｃａ，Ｍｇ，Ｐ在海带叶状体的褐藻淀粉，藻酸盐，褐藻糖胶和纤维素等多糖中的分布，发现锶主要存在于褐藻糖胶中，而其他成分中的锶含量都较低，提示锶与维持藻体结构有关。     

杂合褐藻糖胶寡糖的制备及结构分析

采用热水提取法从海蒿子(Sargassum pallidum)中得到一个杂合的褐藻糖胶(SPF); 采用稀酸水解和低压凝胶渗透色谱(LPGPC)分离得到一系列杂合硫酸寡糖. 结合单糖组成、 甲基化和电喷雾碰撞诱导串联质谱(ES-CID-MS/MS)分析表明, 所得21个寡糖属于杂化岩藻寡糖硫酸酯, 主要由α1→3连接的Fuc及少量β1→4连接的Xyl和β1→6连接的Gal组成; 硫酸基取代位点主要存在于Fuc的C4或C2位、 Xyl的C2位和Gal的C4位; Fuc主要存在于寡糖的非还原端. 实验结果表明, ES-CID-MS/MS 技术可用于各种杂合褐藻糖胶寡糖的结构序列分析. 这些结构多样的硫酸寡糖可进一步点印到糖芯片上, 研究其与蛋白相互作用.     

用离子交换法从海带中提碘

用离子交换法从海带中提碘涉及一系列物理化学过程,有助于学生理解卤素单质及化合物的氧化还原性,了解歧化反应的实用意义,并能初步掌握离子交换剂应用技术。一、原理海带中所含的碘一般以 I~-离子状态存在。用水浸泡海带,I~-离子及其它可溶性有机质如褐藻糖胶等都进入浸出液中。若用海带重量13～15倍的水量浸泡海带,可使浸出液中 I~-离子含量达到0.5～0.55克/升。海带浸出液中褐藻糖胶的存在妨碍碘的提取,应预先除去。一般     

p38 MAPK信号通路在人胚肺成纤维细胞表达I型胶原中的调控作用

目的:探讨P38MAPK信号通路在调控人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖和I型胶原表达中的作用.方法:收集矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM),在体外用含有SiO_2的DMEM培养液和不含Si0_2:的DMEM培养液培养18 h,然后收集培养的AM上清液.用该上清培养HELF,WST-1法检测HELF增殖情况,用免疫细胞化学法检测HELF中I型胶原的表达.结果:经Si0_2刺激的矽肺患者AM培养上清可促进HELF增殖和I型胶原的表达(平均A值为0.304±0.032),与空白对照组(平均A值为0.153±0.021)、对照组(平均吸光度值为0.213±0.021)比较增加,差异有统计学意义(P<0.01);预处理组加入了10μmoI/Lp38 MAPK特异性抑制剂,SB203580后,HELF增殖能力和I型胶原的表达下降(平均A值为0.176±0.020),与处理组相比差异明显(P<0.01).