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共有20条相似文献,以下是第1-20项 搜索用时 335 毫秒

1.  超声波对木瓜蛋白酶催化活性影响的机理研究  被引次数:4
   陈小丽  黄卓烈  何平  巫光宏  詹福建  丘泰球《应用声学》,2008年第27卷第6期
   木瓜蛋白酶经适当参数的超声波处理后酶活力提高。超声处理后酶的米氏常数Km变小,最大反应速率Vm也减小。超声处理后酶的紫外吸收光谱不变,荧光发射光谱也不改变,而差示光谱出现明显的正峰和负峰。研究结果表明,超声波处理后,木瓜蛋白酶的构型没有改变,而构象发生了变化。本文讨论了超声波影响木瓜蛋白酶活性的可能机理。    

2.  果菠萝蛋白酶在有机溶剂微扰时的分子折叠与活力变化的研究  被引次数:9
   陈清西  颜思旭《高等学校化学学报》,1993年第3期
   本文用荧光、紫外差示及CD光谱研究果菠萝蛋白酶经甲醇、乙醇、乙二醇微扰后的构象与活力变化情况.酶的荧光强度随有机溶剂浓度增大而增强,表明Tyr、Trp微环境发生明显变化。232nm和285nm处出现紫外差吸收正峰。前峰与酶分于折叠的变化有关,而后峰与Tyr、Trp微环境的变化相关.甲醇、乙醇微扰后,天然酶的208 nm和225 nm CD双负峰逐渐加强,而乙二醇微扰后,225nm负峰加强。208nm负峰减弱并红移直至完全消失,说明酶分子完全伸展.    

3.  球状苯基纤维素疏水性吸附树脂分离生物活性蛋白质的研究  
   朱云  朱建华  肖锦《离子交换与吸附》,2000年第16卷第6期
   本文考察了球状苯基纤维素疏水性吸附树脂对三种生物活性蛋白质:精制木瓜酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白的吸附分离情况。研究表明,该树脂对菠蛋白酶的吸附分离情况较好,一步富集倍数和活性回收率高,活性回收率达128%,浓缩倍数达4.4,进一步盐析干燥可制得固体晶状菠萝酶。    

4.  高纯度烟草过氧化物酶(TOPⅠ)光谱特性研究  
   夏炳乐  刘清亮  徐小龙  施春华  李敏莉《光谱学与光谱分析》,2003年第23卷第2期
   采用交换吸附脱色及柱层析新技术,成功地从烟叶中分离和纯化了一种烟草过氧化物酶同工酶(TOPⅠ),并对其进行了一系列光谱特性研究.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测得TOPⅠ分子量为21 888.5,等电点pI为3.5;氨基酸组成分析表明TOPⅠ为一含血红素的酸性蛋白酶.光谱学分析揭示,在402 nm处有一典型的Soret带,在498和636 nm处有特征吸收峰(α,β带),酸度和变性剂对TOPI在紫外可见区的特征吸收峰均产生一定的影响,TOP Ⅰ的荧光光谱测定结果说明TOPⅠ分子中含有Trp残基和Tyr残基以及其自身的独特的光谱学特性.    

5.  高纯度烟草过氧化物酶(TOP I)光谱特性研究  被引次数:1
   夏炳乐 刘清亮 徐小龙 施春华 李敏莉《光谱学与光谱分析》,2003年第23卷第2期
   采用交换吸附脱色及柱层析新技术,成功地从烟叶中分离和纯化了一种烟草过氧化物酶同工酶(TOP I),并对其进行了一系列光谱特性研究。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测得TOP I分子量为21888.5,等电点pI为3.5;氨基酸组成分析表明TOP I为一含血红素的酸性蛋白酶。光谱学分析揭示,在402nm处有一典型的Soret带,在498和636nm处有特征吸收峰(α,β带),酸度和变性剂对TOP I在紫外可见区的特征吸收峰均产生一定的影响,TOP I的荧光光谱测定结果说明TOP I分子中含有Trp残基和Tyr残基以及其自身的独特的光谱学特性。    

6.  层析滤纸拉曼光谱特性研究  
   欧阳雨  冯尚彩  李宝惠《光散射学报》,2012年第24卷第1期
   为了研究层析滤纸在表面增强拉曼光谱和层析技术联用中的影响。在785 nm激发波长下分别测试了层析滤纸, 涂布银胶后层析滤纸的拉曼特征谱, 以及氧化乐果在层析滤纸上的拉曼光谱和表面增强拉曼光谱(SERS)。结果表明, 层析滤纸在800~1500 cm-1光谱区域具有丰富的拉曼特征峰, 分析认为主要来源于纤维素, 并对其进行了归属; 涂布银胶后, 由于银颗粒的作用, 层析滤纸拉曼强度整体降低, 并发生特征峰相对强度的变化; 同时, 氧化乐果在层析滤纸上的SERS谱也表明涂布银胶能够有效抑制层析滤纸拉曼特征峰, 增强待测物质拉曼强度, 但在800~1500 cm-1光谱区域仍需考虑层析滤纸的影响。    

7.  动态高压微射流技术对木瓜蛋白酶活性的影响  
   刘伟  钟业俊  刘成梅  谢明勇  官斌  尹曼  王倩  陈婷婷《高压物理学报》,2010年第24卷第2期
    研究了动态高压微射流技术对木瓜蛋白酶活性的影响,并以荧光光谱为检测手段对木瓜蛋白酶的分子构象进行表征。结果显示,动态高压微射流处理(120~180 MPa)后,木瓜蛋白酶酶活降低。经180 MPa处理1次,木瓜蛋白酶相对酶活降至90.04%。随着处理压力的增加,木瓜蛋白酶分子、酪氨酸残基、色氨酸残基的荧光发射峰位置分别从对照组的334、285、277.5 nm红移至140 MPa处理组的335.5、285.5、278.5 nm,然后回移至180 MPa处理组的334、285、278 nm。在0~4 ℃放置24 h后,酶活进一步降低,木瓜蛋白酶和酪氨酸残基的荧光强度出现波动(降低、上升然后再降低),表明动态高压微射流处理(120~180 MPa)改变木瓜蛋白酶分子构象的效果较为明显,形成的新构象稳定性低。    

8.  超声波处理对脱脂麦胚分离蛋白结构的变化研究  被引次数:4
   Liu B  Ma HL  Li SJ  Tian WM  Wu BG《光谱学与光谱分析》,2011年第31卷第8期
   应用傅里叶红外光谱(FTIR)、荧光光谱研究超声处理对脱脂麦胚分离蛋白(DWGP)结构的变化,建立DWGP高效酶解与其结构变化之间的关系.研究发现,超声处理均可提高DWGP的酶解效果,特别是经超声功率600 W、时间10 min处理后,酶解液抑制活性与对照组相比提高了23.96%.通过荧光光谱发现,超声作用改变DWGP溶液荧光强度,适当超声处理可使蛋白分子伸展、生色基团外露,有助于蛋白酶解后获得活性更高的抑制肽.采用对FTIR谱酰胺I带进行曲线拟合的方法,定量分析了不同超声功率、时间对DWGP二级结构的影响,发现超声作用使β-折叠相对含量下降而β-转角含量增加,这可能是DWGP酶解后获得高效抑制肽的主要原因.    

9.  麦芽酸性磷酸酶与乙醇相互作用的谱学研究  被引次数:1
   徐冬梅  刘广深  王黎明  刘维屏《光谱学与光谱分析》,2004年第24卷第11期
   应用荧光光谱、紫外差光谱等技术研究了麦芽酸性磷酸酶经乙醇变性后活力与分子构象的变化情况,同时应用Lineweaver-Burk双倒数作图法考察了乙醇对酶动力学性质的影响。结果表明,乙醇对酶活力及分子构象有较显著的影响。酶活力随乙醇浓度增大而直线下降,50%的乙醇对酶的抑制率达43.4%;变性后酶的紫外差光谱在213和234nm处出现正吸收峰,表明酶肽链发生变化,酶分子由有序结构变成无规则卷曲;酶内源荧光强度随乙醇浓度的提高而增强,酪氨酸、色氨酸残基微环境在乙醇作用下发生明显变化,表明酶活力的表现与酶分子构象的稳定性和完整性密切相关。乙醇对酶的抑制类型为反竞争抑制。    

10.  光谱法表征蛋白酶K的热变性过程  
   张奇兵  那馨竹  尹宗宁《光谱学与光谱分析》,2013年第33卷第7期
   用不同温度处理蛋白酶K,以变性酪蛋白底物法测定酶活力,稳态/瞬态荧光光谱法和圆二色谱法测定空间构象和二级结构,研究温度对蛋白酶K酶活力和构象的影响。温度由25℃升高至65℃过程中,蛋白酶K的酶活力逐渐降低,半衰期缩短;发射光谱荧光强度降低,峰位由335nm红移至354nm;色氨酸残基同步荧光强度降低,酪氨酸残基同步荧光强度增大;色氨酸残基荧光寿命由4.427 1ns降低至4.032 4ns;α-螺旋百分含量降低。结果表明:采用稳态/瞬态荧光光谱法和圆二色谱法能较简便、准确的描述蛋白酶K的热稳定性变化;蛋白酶K的热变性过程符合三态模型,存在一个中间态;蛋白酶K分子内部存在酪氨酸残基对色氨酸残基的共振能量转移作用;α-螺旋是维系蛋白酶K活性中心构象稳定性的主要结构。    

11.  依赖新辅基PQQ甲醇脱氢酶的研究  
   赵永芳  成汇  张经纬  王银善《武汉大学学报(理学版)》,1999年第2期
   生长在以甲醇作唯一碳源的甲基营养菌(Methylotrophicbacteria)No.2细胞,经超声波破碎,缓冲液抽提,DEAE-和CM-纤维素柱层析等纯化步骤,可得到纯化的甲醇脱氢酶(MDH),其比活力为5.7u/mg.该酶进行不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳后,用相应的试剂分别染色,其蛋白质,酶活性和醌蛋白谱带均呈现一条迁移距离相同的主带.该酶由两个β亚基(60kb)和两个α亚基(10kb)构成,每个α亚基束缚一个新辅基PQQ(吡咯喹啉醌).光谱分析显示,290nm有一肩峰,345nm有一特征峰,400nm有一平台.这些数据表明,MDH是一种依赖PQQ的醌酶    

12.  东方弧菌荧光酶的分离纯化和性质研究  
   王安平 朱文杰《发光学报》,1993年第14卷第3期
   东方弧菌518菌株于20℃摆床液体培养十六小时,菌数达最大,菌体内荧光素酶含量也较高,此时收获菌体.用超声波振动破碎细胞从中提取荧光酶粗液,经DEAE-纤维索和DEAE-sephadex柱层析得到纯化的酶.用葡聚糖凝胶层析法测得该酶分子量为87000道尔顿,用SDS-PAGE法测得该酶两个亚基分子量分别为44000(α)和41000(β). 该酶在pH6.8、18℃时活性最佳,对热不稳定.以FMNH2为底物催化发光反应,最高发射波长为490nm左右.其光谱特征与文献报道的东方孤菌整体发光的光谱相一致.    

13.  荧光假单胞杆菌胞外蛋白酶的纯化及热稳定性  
   母智深  白英  赵广华  胡小松《高等学校化学学报》,2008年第29卷第4期
   从原料乳中分离获得一株荧光假单胞菌Rm12, 该菌株分泌的胞外蛋白酶具有很强的耐热性, 其发酵上清液经过硫酸铵沉淀、阴离子层析、疏水层析和分子排阻层析纯化得到SDS-PAGE均一蛋白酶, 经鉴定确认该酶是一种新的金属蛋白酶, 命名为Ht12, 对Ht12的基本特性和热稳定性进行了研究. 结果表明, 此蛋白酶分子量为45000, 含有较高的脯氨酸和二硫键, N末端氨基酸残基序列为MSKVKDKAIVSAAQAS, Mn2+对蛋白酶活力有促进作用. 该蛋白酶具有较高的热稳定性, 于160 ℃加热20 s, 保留活力3.8%.    

14.  枯草芽孢杆菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶的纯化及性质  
   莫宏春  刘克武  孟延发  江琰  秦岭  宋贤丽《化学研究与应用》,2003年第15卷第3期
   枯草芽孢杆菌通过超声破壁,(NH4)2SO4分段盐析,DEAE SepharoseFF离子交换层析,Blue SepharoseCL 6B亲和层析,SephadexG 200凝胶过滤等纯化步骤,分离出6 磷酸葡萄糖脱氢酶。经PAGE和SDS PAGE检测为单一蛋白区带,比活1 7375IU/mg,纯化倍数72 7,收率13 6%。凝胶过滤法测定表观分子量220KD,SDS PAGE测定亚基分子量50 5KD,可见该酶是由四个相同亚基构成的四聚体。测定最适pH、温度分别为8 5,37℃,底物G6P的Km值0 177mmol·L-1。考察了部分金属离子及EDPA对该酶活性、紫外、荧光光谱的影响。    

15.  无花果多糖的分离、纯化和鉴定  被引次数:19
   吴亚林  黄静  潘远江《浙江大学学报(理学版)》,2004年第31卷第2期
   经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、酶-Sevag法脱蛋白得到粗多糖,再经DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换层析和Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析得到纯化的无花果多糖(FCPS),用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖.红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰.结果表明,所提取的无花果多糖为单一组分的多糖.    

16.  脉冲电场对木瓜蛋白酶影响的荧光光谱分析  被引次数:2
   曾新安  于淑娟  徐娅莉《光谱学与光谱分析》,2007年第27卷第12期
   木瓜蛋白酶溶液在电场强度为50 kV·cm-1,频率1 500 Hz,脉冲宽度40μs的脉冲电场下接受19 800个脉冲处理后,其活性降低了56.5%.文章采用荧光偏光光谱对处理前后的样品进行了分析.处理后酶样的荧光强度明显大于处理前,在峰值位置其荧光强度增加超过50%,峰位从342 nm移到了346 nm左右,其荧光偏振幅度明显减小.由此推断出木瓜蛋白酶经脉冲电场处理后酶蛋白的α-螺旋结构松散拉伸,分子内部的氨基酸残基暴露于分子表面,并有部分发生离解游离于溶液中,导致活性部位的结构发生变化,最终导致酶失活.    

17.  双水相萃取法从风干香肠中分离提取蛋白酶  被引次数:9
   张兰威  陈一  韩雪  杜明  易华西《分析化学》,2008年第36卷第7期
   双水相萃取(ATPS)是近年来发展起来的蛋白纯化方法。为了扩展该方法适应领域,同时为风干香肠形成过程酶系的研究提供具体方法。本实验研究了运用双水相技术分离提取风干香肠中蛋白酶,对构成双水相体系中的PEG分子量、浓度和类型以及盐浓度的影响进行了分析。确定了双水相组成体系为20%PEG1000(m/m)和25%MgSO4(m/m),在此体系中风干香肠的蛋白酶主要分布在上相,最高酶活12.37U/μg;纯化倍数为4.61;回收率为85%。通过分子筛层析对比,表明风干香肠经过双水相分离提取杂蛋白峰被除去,而蛋白酶峰几乎未受到影响,说明该双水相体系萃取香肠中蛋白酶具有良好的专一性。调解双水相pH值对蛋白酶的萃取没有影响,而添加电解质NaCl反而产生不利影响。    

18.  用可见分光光度法测定茶薪菇生长发育中几种与基质利用相关的酶活性  被引次数:1
   傅明辉  孔敏  韩雅莉《光谱学与光谱分析》,2006年第26卷第3期
   用可见分光光度法研究了茶薪菇和雪莲菇不同生长阶段的过氧化物酶、漆酶、蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的活性.结果表明:两种菇的淀粉酶和过氧化物酶都在菌丝生长期最高.可见这两种酶在营养生长期起较大作用,对子实体形成后的影响很小.它们的蛋白酶活力变化相似:菌丝生长期高于子实体生长后期.但两种菇在漆酶和纤维素酶活性方面就有较大差异,从中可看出这两种菇是有一定的生理生化差异的.    

19.  腐蚀法制备工艺对SiC量子点光学性质的影响  
   康杰  宋月鹏  丁紫阳  孙为云  李连荣《化学通报》,2021年第84卷第1期
   通过可控的化学腐蚀法制备碳化硅量子点,以氢氟酸和硝酸的混合液为腐蚀剂腐蚀自蔓延燃烧合成的原始碳化硅粉体,而后经超声空化作用及高速离心层析裁剪获得水相的碳化硅量子点,研究了制备工艺参数对量子点光致发光强度、发射波长等光谱特性及粒子尺寸的影响,结果表明,腐蚀剂组分及其配比是影响量子点光致发光强度的主要因素,而超声振动时间和层析裁剪的离心超重力系数在一定程度上对光致发光强度有影响,二者对光学性能的影响主要体现在特征发射波长的移动、半峰宽、量子点尺寸大小及其粒径分布的均匀性。此外,在腐蚀剂组分调整的过程中发现,以适量的分析纯硫酸替代原腐蚀剂中的部分硝酸,则不仅会引起量子点光致发光强度的变化,而且表面还会偶合上除羧基、羟基外的新官能团巯基。    

20.  酪蛋白与亚硝基红盐的共振散射光谱及其分析应用  
   江波  郭安勇  胡庆红  李湘兰《光谱实验室》,2012年第29卷第4期
   在弱酸性介质中,酪蛋白与亚硝基红盐结合形成的缔合微粒导致体系共振散射强度急剧增加,并产生新的共振散射峰,最强散射峰为514nm处。基于木瓜蛋白酶催化酪蛋白水解,酶的活力在一定条件下与共振散射强度的降低有良好的线性关系,回归方程△I=885.9C+20.35(r=0.9891),检出限为0.01U/mL,建立了一种测定木瓜蛋白酶活力的简便、快速的新方法,并用于嫩肉粉中木瓜蛋白酶活力的测定。    

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