蛋白质的室温磷光法研究

提出了牛血清蛋白(BSA)和人血清蛋白(HSA)的室温磷光法,蛋白质的磷光主要来自于包埋于其中的色氨酸残基,并对影响其室温磷光强度的的各种因素:如重原子浓度,酸度,除氧剂浓度等进行了详细研究,建立了测定痕量HSA和BSA的室温磷光法.该法是以KI为重原子微扰剂,在水溶液中用Na2SO3化学除氧后,以287nm为激发波长,BSA和HSA在443nm左右的磷光具有较好的重复性和稳定性.在此条件下它们的线性范围分别为:1×10-6-8.6×10-5mol/L和3×10-6-13×10-5mol/L,检出限分别为:2.20×10-7mol/L和4.10×10-7mol/L.同时,还对它们的光谱性质如荧光、磷光寿命,偏振等进行了测量.结果显示BSA中色氨酸残基有两种荧光衰减形式,HSA则只有一种衰减形式,它们的磷光属于长寿命磷光,都能引起光的偏振.     

ARS-Al(Ⅲ)与蛋白质作用的分光光度研究

在 p H4 .0的 Britton- Robinson缓冲溶液中 ,茜素红 S(ARS) - Al( )与牛血清白蛋白 (BSA)生成红色复合物 ,吸收峰波长λmax=5 1 5 nm,比金属离子络合物本身红移 80 nm。表观摩尔吸光系数ε=2 .0 4× 1 0 5L· mol-1 · cm-1 。吸光度值在 BSA的质量浓度 2 0— 1 80 mg· L-1 范围内呈线性关系。所拟定的方法有较好的灵敏度 ,可以用于实际生物样品中蛋白质含量的测定     

利福平与人血清白蛋白作用的荧光光谱

蛋白质是一类重要的生物大分子, 它不仅是构成细胞内原生质的主要成分, 也是生命现象的物质基础. 对于蛋白质的探索是最复杂的课题之一. 以荧光光谱为手段, 文章研究了药物利福平(Rifampicin capsules)与人血清白蛋白(HSA)的作用, 测量发现利福平和人血清白蛋白的色氨酸残基的结合位置为R=2.567 nm, 临界距离R0为2.433 nm. 利福平-HSA的Lineweaver-Burk猝灭曲线的离解常数Kd=19.42×10-6 mol·L-1且结合常数Ks=5.149×104 L·mol-1.     

蒜氨酸与牛及人血清白蛋白的相互作用

运用荧光光谱和同步荧光光谱法,研究在pH 7.40的Tris-HCI缓冲体系下,蒜氨酸与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)的相互作用。采用荧光分光光度计,以280nm为激发波长,扫描300~500nm范围的荧光发射光谱;分别设置波长差Δλ=15nm和Δλ=60nm扫描同步荧光光谱图;用Stem-Volmer和Lineweaver-Burk方程及热力学方程处理数据。荧光光谱法结果表明蒜氨酸能猝灭BSA及HAS的荧光;得到蒜氨酸与BSA反应的结合常数在298和310K时分别9.81×10~2和6.15×10~2 L·mol~(-1);与HSA反应的结合常数在298和310K时分别2.21×102和6.84×10~2 L·mol~(-1);蒜氨酸与两种蛋白的反应均为自发进行;与BSA的作用力为静电作用而与HSA的作用为疏水作用力;同步荧光光谱表明,蒜氨酸与BSA作用过程中主要影响酪氨酸残基,对HSA中的两种氨基酸残基均有影响。实验结果为研究蒜氨酸与生物小分子物质相互作用的机制提供了一定的理论依据。     

酸性棕SR分光光度法测定血清白蛋白

在BrittonRobinson酸性缓冲溶液中,加入非离子表面活性剂阿拉伯胶,能使酸性棕SR(ASR)与血清白蛋白形成复合物,最大吸收波长为610nm,比ASR红移165nm。采用分光光度法研究了该结合反应的最佳条件,并据此建立了一种测定血清蛋白的新方法。λ=610nm时,εBSA=623×104L·mol-1·cm-1,εHSA=723×104L·mol-1·cm-1;牛血清白蛋白(BSA)在0～910mg·L-1,人血清白蛋白(HSA)在0～952mg·L-1范围内服从比尔定律。检出限分别为BSA572mg·L-1,HSA515mg·L-1。对6个人血清蛋白总量平行6次测定,相对标准偏差18%～44%,回收率936%～1091%,并对5只小白鼠的血清蛋白总量进行了测定。     

芦丁钐配合物与血清白蛋白的相互作用

在生理pH值条件下,用荧光光谱法(FS)研究了芦丁钐配合物(rutin-Sm)与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)之间的结合反应.探讨了rutin-Sm对BSA和HSA的荧光猝灭过程的猝灭机理,以Lineweaver-Burk双倒数方程分别计算了不同温度下rutin-Sm与BSA和HSA的结合常数(KLB)和热力学参数,并判断rutin-Sm与BSA和HSA结合的作用力类型;实验结果表明:rutin-Sm与BSA和HSA结合形成复合物,导致BSA(HSA)内源性荧光猝灭是由于分子内的非辐射能量转移而引起的静态猝灭;以Lineweaver-Burk方程计算rutin-Sm与HSA和BSA的结合常数KLB分别为:rutin-Sm-HSA,295 K:6.830×105L·mol-1;310 K:4.665×105L·mol-1;rutin-Sm-BSA,295 K:6.540×105L·mol-1;310 K:3.265×105L·mol-1;芦丁钐配合物与BSA之间的作用力主要为范德华力、氧键;而与HSA之间的作用力主要为静电引力.同时用同步荧光光谱法探讨了rutin-Sm对BSA和HSA构象的影响.进一步证明芦丁钐配合物在体内能够被血清白蛋白存储和转运.     

流动注射化学发光法灵敏检测牛血清白蛋白

基于牛血清白蛋白(BSA)在碱性介质中对luminol-H2O2体系化学发光的增敏作用,结合流动注射化学发光技术提出了一种快速、灵敏检测BSA的新方法。在优化条件下,检测BSA的线性范围为2.5×10-9～1.0×10-6 mol·L-1,检出限为5.8×10-10 mol·L-1,样品检测速率达112个·h-1。对1.0×10-7mol·L-1 BSA溶液重复测定11次,相对标准偏差RSD为0.8%。该方法已成功应用于实际样品牛血清中BSA含量的测定。结合化学发光光谱和紫外可见吸收光谱,对luminol-H2O2-BSA体系可能的反应机理进行了探讨。     

中草药中微量锗和钼的同时测定

本文采用硅藻土 TBP反相萃取层析 分光光度法同时测定了中草药中的锗和钼的含量 ,获得了锗、钼含量较高的中草药。中草药样品经处理、消化后 ,用盐酸将试样中HCl浓度调至 6mol·L-1,加入以负载有磷酸三丁酯 (TBP)的烷基化硅藻土做固定相的层析柱。用 4mol·L-1盐酸以 0 5mL·min-1的流速洗脱锗 ,苯基荧光酮 CTMAB分光光度法测定锗 ,Ge PF CTMAB络合物的λmax=5 10nm ,摩尔吸收系数ε510 =1 6 7× 10 -5L·mol-1·cm-1。用 0 5mol·L-1盐酸以 0 5mL·min-1的流速洗脱钼 ,苯基荧光酮 CTMAB分光光度法测定钼 ,Mo PF CTMAB络合物的λmax=5 2 5nm ,摩尔吸光系数ε52 5=1 16× 10 -5L·mol-1·cm-1。该方法可对样品中的锗和钼同时测定 ,简便易行 ,具有较高的灵敏度 ,而且能有效地避免共存离子的干扰。     

荧光法研究3-羟基-2-萘甲酸与人血清白蛋白的相互作用

在pH 7.4、0.05mol·L~(-1) Tris-HCl缓冲液及室温条件下,用荧光光谱法、分光光度法研究了3-羟基-2-萘甲酸与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。研究表明,3-羟基-2-萘甲酸与人血清白蛋白以摩尔比1:1结合,其结合常数为3.28×105mol~(-1)·L.根据Foerster非辐射能量转移机理,求算了给体(HSA色氨酸残基)与受体(3-羟基-2-萘甲酸)间距离r为4.74nm。     

吡罗红为底物的辣根过氧化物酶催化荧光反应测定葡萄糖

吡罗红在辣根过氧化物酶催化下可被过氧化氢氧化而使其荧光猝灭。在pH 7.2中性介质中,稳态催化速率由酶和底物浓度决定,催化体系服从Michaelis-Menten方程,用Lineweaver-Burk作图法求得米氏常数、最大反应速度、催化常数分别为2.4×10~(-5)mol·L-1,2.5×10~(-6)mol·L-1s-1,75.8 s-1。在最佳反应条件下,荧光F0/F的猝灭程度与过氧化氢浓度在0-3.6×10~(-7)mol·L-1范围内成线性关系,检测限为6.3×10~(-9)mol·L-1;当与葡萄糖氧化酶联用时,可定量检测葡萄糖,线性关系为0-8.0×10~(-7)mol·L-1,检测限为3.4×10~(-8)mol·L-1。方法用于分析人血清中葡萄糖含量,分析结果与苯酚-4-氨基安替比林法基本一致。     

基于蛋清栅介质的超低压双电层薄膜晶体管

新一代环保、生物兼容性电子功能器件受到了广泛关注.本文采用具有高质子导电特性的天然鸡蛋清作为耦合电解质膜制备双电层薄膜晶体管，该薄膜晶体管以氧化铟锡导电玻璃为衬底和底电极，以旋涂法制备的鸡蛋清为栅介质，以磁控溅射沉积的氧化铟锌为沟道和源漏电极.实验结果表明，这种基于鸡蛋清的栅介质具有良好的绝缘性，并能在其与沟道界面处形成巨大的双电层电容，从而使得该类晶体管具有超低工作电压（1.5 V）、低亚阈值（164 mV/dec）、大电流开关比（2.4×10⁶）和较高的饱和区场效应迁移率（38.01 cm²/（V· s））.这种以天然鸡蛋清为栅介质的超低压双电层TFTs有望应用于新型生物电子器件及低能耗便携式电子产品.     

基于蛋清栅绝缘层的高性能C_(60)有机场效应晶体管(英文)

采用生物材料(蛋清)作为栅绝缘层制备了基于C60为有源层的有机场效应晶体管。器件展现出了合理的电学特性,场效应迁移率和阈值电压分别为2.59 cm2·V-1·s-1和1.25 V。有机场效应晶体管展现良好性能的原因是蛋清具有较高的介电常数及热退火后形成的光滑表面形貌。实验结果表明,对于制备有机场效应晶体管来说,蛋清是一种有前途的绝缘层材料。     

热作用下蛋白及全血光学特性变化的实验研究

利用自行研制的双积分球系统 ,对不同温度 (37℃～ 80℃ )加热后的蛋白及人全血的光学特性参数 (对波长为 6 32 8nm的光而言 )进行了实验研究。结果表明 :热作用下生物样品生理特性的改变可用光学特性参数的变化来描述。不同的热剂量作用下 ,样品形态及结构的改变是不同的 ,相应的光学特性参数 (吸收系数与散射系数 )变化也不同 ;相同热作用下 ,样品成分的不同 ,导致样品光学特性参数的改变也存在差别。光学检测技术可望为热疗的实时无损监测提供一种新的手段。     

傅里叶变换近红外反射用于鸡蛋蛋品质的研究

鸡蛋的无损检测技术一直以来都是蛋品质检测领域的重要研究课题,建立相应的检测技术对蛋鸡育种和蛋品质监测具有实际意义.文章利用近红外光谱仪测定保存时间不同的鸡蛋,探讨了蛋白高度、哈氏单位、气室直径、气室高度近红外模型的可行性,并运用无偏最小二乘法建立了鸡蛋蛋白高度、鸡蛋气室直径、气室高度的近红外测定模型,蛋白高度、气室直径与气室高度的测定模型的决定系数R2分别为0.867,0.821,0.865,RMSECV分别为0.476,0.014与0.479.对33个鸡蛋样品的模型验证的R2分别为0.873,0.861,0.895.鸡蛋新鲜度主要指标的预测值与实际值间的差异不显著(P＞0.05),所建模型具有较好的准确性与预测能力,能够满足蛋品新鲜度快速无损检测的要求.     

人体血清中胆红素荧光光谱初步分析

利用分子荧光和紫外-可见吸收光谱仪分别测定了在模拟生理条件下的胆红素、胆红素和牛血清白蛋白混合溶液的荧光光谱和吸收光谱,同时也测定了一些体检者血清样品的荧光发射光谱。实验结果表明:不同情况下的胆红素溶液具有不同的荧光光谱和吸收光谱;血清白蛋白对胆红素荧光具有增敏效应。此外,初步认为所测得的人体血清样品位于约524 nm处的荧光不是主要来自于人体血清中白蛋白结合形式的胆红素组分贡献。     

芦丁与血清白蛋白结合作用的热力学研究(I)

在生理pH值条件下,研究了芦丁与牛血清白蛋白和人血清白蛋白之间的结合作用。通过荧光法确定了芦丁与血清白蛋白的荧光猝灭机制,根据热力学方程讨论了两者间的主要作用力类型。芦丁对血清白蛋白的荧光猝灭机制为静态猝灭。确定了不同温度下该结合反应的结合常数和结合位点数,并根据热力学方程求得了结合反应的热力学参数。两者结合的主要作用力类型是氢键和Vander Waals力。芦丁在体内能够被血清白蛋白存储和转运,且结合时对蛋白质构象无影响。     

Effect of Denaturating Agents on the Structural Alterations and Drug-Binding Capacity of Human and Bovine Serum Albumin

Sulindac (SDC) is a nonsteroidal anti-inflammatory drug, useful in the treatment of chronic and acute inflammatory conditions. The binding of SDC to human serum albumin and bovine serum albumin was studied by fluorescence spectroscopy and the results compared with those obtained for human and bovine serum albumin destabilized with urea and guanidine hydrochloride. SDC interacts with serum albumin within the hydrophobic subdomain IIA and/or IB. The analysis of the binding constants shows that the studied albumins preserve their binding capacity in the presence of destabilizing/denaturating agents. The denaturation coefficient has been calculated to estimate the degree of denaturation of protein.     

酸性品红共振光散射法测定蛋白质

本文研究了酸性品红 (FA)与蛋白质相互作用所引起的共振光散射 (RLS)光谱 ,在pH 1 88～ 4 4 8范围内 ,加入蛋白质导致酸性品红 (FA)共振光散射增强 ,在 340nm处 ,存在一共振光散射增强峰 ,其散射光强度增加值与蛋白质的浓度呈线性关系 ,据此建立了一种测定蛋白质的共振散射法。方法的线性范围为 0～ 2 5mg·L- 1 ,检出限 0 0 2 3mg·L- 1 。该方法用于人尿样和血样的测定 ,与医院提供结果相符 ,且具有更高的灵敏度。     

Zincon as resonance Raman probe for quantitative evaluation of proteins

This paper demonstrates the potential of using a resonance Raman (RR) based method for the quantitative evaluation of protein concentrations. This method was applied to determine the concentration of bovine serum albumin (BSA) protein using zincon. In the protein–zincon liquid mixture, the number of unbound zincon molecules decreased markedly as the protein concentration increased because of the high affinity of zincon for proteins. We successfully detected very low concentrations of BSA (∼1 ng/ml) using this method, which demonstrates its great potential for the detection of proteins over a much wider range of concentrations in proteomic studies. This new RR‐based method allows the detection of proteins in lower concentration than with the UV–vis‐based and other protein assays commonly used in biochemical laboratories. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

芦丁与血清白蛋白的作用研究

采用荧光光谱和紫外光谱研究了抗炎药物芦丁与牛血清白蛋白 (BSA)和人血清白蛋白 (HSA)的相互作用。通过二者荧光光谱的变化 ,求得药物与白蛋白作用的形成常数。探讨了它们之间的主要作用力类型。