新型吖啶染料-蛋白质光散射体系

研究了四磺酸钠-1,6-己二胺二吖啶(TSHDA)与蛋白质的共振光散射增强作用,建立了一种新的蛋白质共振光散射分析体系.实验考察了吖啶探针浓度、缓冲体系pH对体系共振散射光的影响.在pH=3.0的酸性溶液中,蛋白质分子与TSHDA发生结合作用,共振光散射明显增强,最大散射波长位于460nm,体系散射强度随着探针浓度的增加而增大,蛋白质测定线性范围为0.2-1.2μg/mL,检出限9.7ng/mL.分析了血清蛋白合成样品,浓度为0.4-0.8μg/mL的样品测定回收率为97.5%-103.3%,相对标准偏差1.2%-2.6%.     

光谱法研究钙红-Cu(Ⅱ)络合物与蛋白质的相互作用及其应用

研究了钙红-Cu(Ⅱ)络合物与牛血清蛋白(BSA)作用的共振光散射光谱(RLS)、荧光光谱和电子吸收光谱特征,建立了利用金属配合物作为探针测定痕量蛋白质的方法。钙红-Cu(Ⅱ)-BSA三元络合物的形成导致RLS强度和荧光强度的增大;同时引起电子吸收光谱的强度减小,594 nm处吸收峰消失。在pH5.65～5.75的酸度条件下,钙红-Cu(Ⅱ)络合物与BSA系统在317 nm处有一增强的RLS光谱峰,且增强的RLS强度与BSA的浓度呈线性关系。在实验室确定的优化条件下,RLS强度与BSA浓度的线性范围为0.75～10 μg·mL-1, 线性方程为I=150.88+201.48c(BSA ,μg·mL-1),相关系数r=0.997 3。方法检出限为5.62×10-2 μg·mL-1。该方法成功地用于人工混合样品中BSA含量的测定。对钙红-Cu(Ⅱ)络合物与BSA的作用机制的研究表明,钙红-Cu(Ⅱ)络合物与BSA之间主要存在的是静电引力。     

茜素黄GG共振光谱散射法测定人血清白蛋白

研究了酸性介质中茜素黄GG与人血清白蛋白(HSA)作用产生的共振光散射(RLS)现象.在pH=3.0附近RLS增强信号与一定浓度范围内的HSA呈线性关系,共振光特征峰在414nm.据此建立了一种测定HSA的新方法.线性范围0-5.0mg/L,检出限:24μg/L.     

偶氮胭脂红B共振瑞利光散射技术测定人血清中的总蛋白

在0.1mol/LH2SO4介质中,偶氮胭脂红B(ACB)与蛋白质结合形成的复合物在599nm处产生强烈的共振瑞利光散射信号.在最佳反应条件下,建立了共振瑞利光散射技术测定蛋白质的新方法.该方法对牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)及免疫球蛋白(IgG)测定的线性范围分别为0.25-20.0、0.25-20.0及0.25-25.0μg/mL,检出限均小于0.20μg/mL,且大量存在的常见金属离子、氨基酸等共存物质不干扰测定,用于人血清样品中总蛋白质的测定,结果满意.     

新的光散射体系测定蛋白质的研究

以1,6-己二胺二吖啶为荧光探针,建立了一种新的蛋白质共振散射检测体系。实验考察了该吖啶荧光探针的共振散射特征光谱、散射反应稳定性,研究了缓冲介质pH、探针浓度等参数对测定蛋白质的影响。结果表明,当pH 8.9时,1,6-己二胺二吖啶染料的散射波长为470 nm;加入BSA,反应约9 min后,体系光散射强度达到最大并维持稳定,2 h内无明显变化。当1,6-己二胺二吖啶探针(浓度1.00×10-4mol·L-1)用量为3.00 mL时,蛋白质与1,6-己二胺二吖啶的光散射增强作用显著,共振散射强度随着BSA的增加而明显增强,光散射强度与蛋白质浓度成良好线性关系,线性浓度范围为1.00～5.00 μg·mL-1,检测限(3σ/K)为0.085 μg·mL-1。测定了血清样品,浓度为2.00～4.00 μg·mL-1,回收率为98.0%～101.7%,测定偏差小于1.7％。     

阿特拉津与蛋白质结合反应及其在测定蛋白质中的应用

用共振光散射光谱(RLS)和紫外-可见电子吸收光谱研究了阿特拉津与牛血清蛋白(BSA)之间的相互作用。研究表明,在酸性条件下,阿特拉津与牛血清蛋白依靠范德华力和N/O—H…π氢键生成结合物,从而使阿特拉津的紫外吸收有整体红移的趋势,并且产生强烈的共振散射光增强现象。共振光散射光谱特征和强度与溶液的pH、阿特拉津的浓度、反应温度等有关。在优化的实验条件下, 阿特拉津与牛血清蛋白体系的共振光散射强度与牛血清蛋白的浓度呈线性关系, 据此建立了一种简单、灵敏测定牛血清蛋白的新方法。 该方法的检出限(3σ)为12 ng·mL-1,线性范围为0.05～100 μg·mL-1。该法用于人工混合样品中牛血清蛋白的测定,取得了令人满意的结果。     

桑色素-Ce(Ⅳ)体系共振光散射法选择性测定小牛胸腺DNA

研究了桑色素与Ce(Ⅳ)反应形成的络合物与DNA作用的共振光散射(RLS)特征,发现小牛胸腺DNA(ctDNA)或鲱鱼精DNA(hsDNA)的加入都能使桑色素-Ce(Ⅳ)体系在320 nm处的共振光散射峰增强。在最优条件下,RLS强度与ctDNA的浓度在0～25 μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,检出限为0.3 μg·mL-1;但是RLS强度对hsDNA的浓度却没有线性响应。并且,由于RLS强度对hsDNA浓度的响应值大大低于同浓度的ctDNA,因此可用于hsDNA存在下对ctDNA的选择性测定。将该法用于4种合成样的测定,回收率在93.7%～108.4%之间。     

格拉司琼与磷钨杂多酸相互作用的共振光散射及分析应用

在pH 2.2 BR缓冲介质中, 磷钨杂多酸(PTA)与格拉司琼(GSN)相互作用形成离子缔合物, 不仅引起吸收光谱的变化, 还导致共振散射光谱(RLS)的显著增强并产生新的RLS光谱, 最大RLS峰位于333 nm附近, 其RLS增强程度与格拉司琼浓度成线性关系, 检出限和线性范围分别为12 ng/mL和0.04～3.0 μg/mL。文中研究了反应产物的吸收和RLS光谱特征, 优化反应条件的影响, 据此发展了以磷钨杂多酸为光谱探针的灵敏、简便、快速测定格拉司琼的新方法。将方法用于血清中格拉司琼含量的快速定, 结果满意。讨论了离子缔合反应和RLS增强机理。     

十六烷基三甲基溴化铵敏化孔雀石绿-脱氧核糖核酸的共振光散射增强法测定脱氧核糖核酸

在碱性条件下 ,脱氧核糖核酸 (DNA)对孔雀石绿的共振光散射有增强作用 ,加入十六烷基三甲基溴化铵 (CTMAB)进一步敏化该体系。共振光散射增强的程度与DNA浓度呈良好的线性关系 ,据此建立了测定DNA的共振光散射增强分析方法。在实验条件下 ,最大散射波长 36 4nm处 ,测定小牛胸腺DNA(ctDNA)和鱼精子DNA(fsDNA)的线性范围皆为 0～ 1 5 μg·mL-1,检出限分别为 0 0 5和 0 0 3μg·mL-1。该方法简单、快速、灵敏度高 ,已成功应用于合成样品中DNA含量的测定。     

共振光散射法研究甲萘威与DNA的作用及其应用

通过共振光散射光谱(RLS)和电子吸收光谱的特征,探求了甲萘威与ctDNA的结合方式,实验表明在pH 1.97的条件下,甲萘威与ctDNA既有表面聚集又有嵌入式结合的双重作用,结合形式与二者之间的浓度比有关。在此条件下,甲萘威与ctDNA作用的RLS强度与ctDNA的浓度呈线性关系,据此建立了一种简单快速测定ctDNA的新方法。ctDNA的浓度在0.02～3 μg·mL-1的范围内与RLS强度呈良好的线性关系,线性方程为I= 200.77c(μg·mL-1)+118.91,相关系数r=0.998 9。该方法已成功地用于人工混合样品的测定。     

荧光共振能量转移增敏法测定锌

以巯基乙酸为稳定剂合成了CdTe量子点,并利用其与牛血清白蛋白(BSA)组成了荧光共振能量转移体系,考察BSA(供体)和CdTe量子点(受体)之间的荧光共振能量转移的最佳条件,建立了荧光共振能量转移增敏法测定Zn2+的新方法.在pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,Zn2+能对能量转移体系中CdTe量子点增敏从而测定锌的含量.Zn2+浓度在0.49-4.88μg/mL浓度范围内与CdTe量子点荧光强度呈现良好线性关系(r=0.9996),检出限为0.13μg/mL,RSD为3.2％,平均回收率为99.5％(n=5).方法适用于果汁饮料中微量锌的测定.     

氯酚红共振瑞利散射法测定残留氯霉素

建立了测定残留氯霉素的共振瑞利散射法.在pH 9.25的Tris-HCl缓冲溶液中,氯霉素与氯酚红相互作用后,共振瑞利散射显著增强,在407nm处呈现最高散射强度.氯霉素的质量浓度在0.030-0.260μg/mL范围内与ΔⅠRRS成正比,检出限(3Sb/S)为0.0020μg/mL.该法简便、快速、灵敏,可用于虾及奶粉中氯霉素残留测定.     

共振光散射法测定盐酸羟胺

研究了在醋酸缓冲介质中,盐酸羟胺还原Cu²⁺定量所形成CuSCN的共振散射光谱。确定了散射光强度与溶液中盐酸羟胺浓度的关系。提出了共振散射法测定盐酸羟胺的新方法。方法的检出限为0.04μg/mL,线性范围为0.04—0.80μg/mL。方法用于工业品盐酸羟胺的测定,结果满意。     

二甲苯兰FF-溴化十六烷基三甲基铵-核酸共振光散射光谱研究及分析应用

在pH9.90的Tris-HCl缓冲溶液中,阴离子染料二甲苯兰FF(XCFF)对阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲基铵(CTMAB)与核酸(fsDNA、ctDNA、yRNA)的共振光散射光谱有协同增强作用。考察了影响因素,在优化条件下研究了共振光散射强度与核酸浓度之间的关系,对于fsDNA、ctDNA、yRNA的线性范围分别为0.05—3.0mg/L、0.05—6.0mg/L、0.5—2.0mg/L,检出限分别为24.1、18.4、57.0μg/L。据此建立了一种测定核酸的新方法。     

共振散射光谱法测定药物制剂中盐酸氯丙嗪的含量

在弱酸性溶液中,盐酸氯丙嗪与十二烷基苯磺酸钠反应形成离子缔合物,导致体系的共振散射（RS）强度急剧增强,并产生新的共振散射光谱,最强散射波长为466nm。本文研究了体系的光谱特征、反应的适宜条件和共存物质的影响。在466nm处,盐酸氯丙嗪的浓度在0.266—12.8μg/mL范围内与体系的散射强度有良好的线性关系,检出限（3σ）为0.056μg/mL。据此,建立了一种测定盐酸氯丙嗪含量的简便、快速、高灵敏的共振散射新方法,且已用于盐酸氯丙嗪片剂和针剂中含量的测定,结果满意。     

水溶性硫化铅纳米粒子的合成及应用于汞离子检测

室温下以柠檬酸三纳为稳定剂,在水相中合成了PbS纳米粒子（NP-PbS）。用共振光散射技术（RLS）探索了最佳条件下,体系RLS强度（IRLS）与汞离子浓度在0.001—10μmol/L测定区间内呈现良好的线性（r=0.9941）,据此,建立了测定水中的微量汞的方法。方法的检出限为0.6nmol/L,样品加标平均回收率为100.35%。     

酸性品红共振光散射法测定蛋白质

本文研究了酸性品红 (FA)与蛋白质相互作用所引起的共振光散射 (RLS)光谱 ,在pH 1 88～ 4 4 8范围内 ,加入蛋白质导致酸性品红 (FA)共振光散射增强 ,在 340nm处 ,存在一共振光散射增强峰 ,其散射光强度增加值与蛋白质的浓度呈线性关系 ,据此建立了一种测定蛋白质的共振散射法。方法的线性范围为 0～ 2 5mg·L- 1 ,检出限 0 0 2 3mg·L- 1 。该方法用于人尿样和血样的测定 ,与医院提供结果相符 ,且具有更高的灵敏度。     

用铀试剂Ⅰ共振光散射法测定蛋白质的研究

本文提出一种新的光散射探针染料--铀试剂Ⅰ(ArsenazoⅠ),在pH 3.29 的条件下,ArsenazoⅠ本身只有极弱的光散射,它与蛋白质的结合物有强烈的共振光散射作用.在λ=400 nm处,光散射有最大强度,光散射强度与蛋白质的浓度成正比.据此建立了一种测定蛋白质的新方法.该方法简便、快速、灵敏度高,对HSA的检测限达到60 ng*mL-1, 线性范围达到0～18 μg*mL-1, 用于人体血清样品的分析并同考马斯亮蓝法比较,取得了令人满意的结果. 本文也研究了牛血清白蛋白(BSA)、γ球蛋白、鸡蛋白蛋白、溶菌酶、胃蛋白酶与染料ArsonazoⅠ之间的作用,探讨了共振光散射的机理.     

汉防己碱对成骨肉瘤MG63细胞生长的作用

采用体外细胞培养,结合流式细胞术和MTT方法研究汉防己碱对MG63细胞生长的作用特点.汉防己碱(0.33μg/mL)对MG63细胞仅有轻度抑制作用,细胞存活率保持在88％-97％.汉防己碱浓度依赖性轻度降低cDDP对MG63细胞的IC50；低浓度Tet (0.33μg/mL)明显提升cDDP对MG63/cDDP细胞IC50,但0.5和1.0μtg/mL显著降低cDDP对MG63/cDDP细胞的IC50.汉防己碱对MG63/cDDP细胞则既可增加细胞耐药发展(0.33μg/mL),也可逆转肿瘤细胞对cDDP的耐药性(1.0μg/mL).     

以光散射技术研究啶虫脒的测定及其与DNA的相互作用

研究了啶虫脒与脱氧核糖核酸(DNA)之间的共振光散射(RLS)增强作用。加入啶虫脒导致DNA的共振光散射增强,在316.0 nm处,存在一处共振光散射增强峰。由此建立了一种以DNA为探针检测农药啶虫脒的新方法。体系的最佳条件为,实验选择了pH 1.73为适宜酸度;加入10 μg·mL-1浓度的DNA溶液的体积为 2 mL;在室温条件下,体系的反应需要30 min达到稳定;“啶虫脒-DNA-H₂SO₄”的加药顺序为最佳。该方法适用的线性范围为0～2.25 μg·mL-1,检出限为0.2 μg·mL-1,啶虫脒在河水样品中的回收率为98.0%～102.0%,并探讨了DNA与啶虫脒的相互作用机理：啶虫脒与核酸间的相互作用包含有静电引力,啶虫脒的吡啶基与DNA碱基之间的π—π堆积作用。