单丛茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的光谱学研究

研究了白叶和风凰两种单从茶水提物清除DPPH和ABTS自由基的能力及其光谱学特征.采用分光光度法测定单从茶水提物清除ABTS自由基的测定波长为734 nm,体系稳定时间为6 min;清除DPPH自由基的测定波长为515 nm,体系稳定时间为30 min.单丛茶水提物具有良好的抗氧化活性,能有效、快速地抑制溶液中DPPH和ABTS自由基的形成及其特征吸收峰.在选定的反应体系中,白叶单丛茶(Ⅰ,Ⅱ)、凤凰单丛茶(Ⅲ,Ⅳ)和标准抗氧化剂Trolox对ABTS自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为26.9,25.5,28.0,31.7和85.2 μg·mL-1,说明单丛茶水提物的总抗氧化活性明显优于Trolox.对于DPPH自由基,4种单丛茶的IC50值分别为49.8,41.6,47.3和64.5 μg·mL-1.实验结果显示,单丛茶水提物具有优良的抗氧化活性,且对水溶性自由基的抑制率明显高于脂溶性自由基,作为功能食品具有广阔的开发和应用前景.     

臧红T-Fenton体系荧光光谱法测定黄山贡菊/金菊的抗氧化活性

臧红T能产生特征荧光,其激发波长和发射波长分别为264nm和577nm.酸性介质中,Fenton体系(H2O2-Fe2+)产生的羟自由基能氧化臧红T使其荧光猝灭,而许多花茶的提取物可部分清除溶液中的羟自由基使其荧光猝灭程度降低,据此建立了一种测定黄山贡菊和金菊的抗氧化活性的新方法.本实验采用单因素实验法,对羟自由基体系...     

车前草中多酚的抗氧化活性

采用福林-酚法测定车前草60％乙醇提取物和不同极性部位的总多酚含量,应用DPPH法、ABTS法和邻苯三酚法,研究上述提取物对自由基的清除能力.车前草正丁醇相的总多酚的含量最高,正丁醇相对DPPH自由基和ABTS自由基显示了较强的清除能力,其各相的抗氧化活性大小与总多酚的含量高低顺序一致;而乙酸乙酯相对O2-·的清除能力最强.实验结果表明,车前草60％乙醇提取物及其不同极性部位都具有抗氧化作用,其活性部位为正丁醇相和乙酸乙酯相.     

丹参有效成分体外抗氧化活性比较

研究了丹参水溶性和脂溶性成分体外抗氧化活性。以既可以测定水溶性成分,又可以测定脂溶性成分抗氧化活性的DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)和TEAC(Trolox equivalent antioxidant capacity)法来对丹参的两类主要有效成分进行抗氧化活性测定。采用紫外-可见分光光度法进行分析,以维生素C为阳性对照,首次进行了丹参水溶性和脂溶性成分体外抗氧化活性比较。结果表明:丹参的水溶性成分具有较好的清除DPPH·、ABTS+·(2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium+·)的活性,而脂溶性成分仅显示出很弱的清除DPPH·和ABTS+·的活性。     

硒杂环化合物(4,5-苯并苤硒脑)在金表面上的自组装

为了寻求新的自组装单分子膜体系 ,构建新的功能膜 ,研究了具备平面型的大环共轭硒杂环化合物——— 4,5 苯并苤硒脑 (苯并 [c]硒二唑 ,简称苤硒脑 )在金表面的自组装单分子膜 .通过X射线光电子能谱 (XPS)和电化学手段对其进行表征 .XPS研究结果表明 ,自组装形成单分子膜后 ,苤硒脑分子中Se3d结合能从 5 7.4eV下降到 5 7.1eV ;表明硒杂环化合物是通过金硒键固定在金表面上的 ;电化学循环伏安法实验表明 ,金电极表面上自组装该有机硒后 ,Fe(CN) 63 -/ 4 -的氧化还原峰几乎完全消失 ;以四硼酸钠为底液 ,测得该化合物自组装在金表面上时 ,其还原电位在 - 0 .6 6V ,与在溶液中用裸金电极测得的还原峰电位基本一致 .     

硒对钝顶螺旋藻氧化损伤的拮抗作用的光谱学特性及机制

研究了亚硒酸钠预处理对H2O2氧化胁迫下钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)的生长、藻丝体形态、谱学特性以及细胞内活性氧(ROS)水平的影响,探究硒拮抗氧化胁迫保护螺旋藻的机制。结果显示,H2O2氧化胁迫明显抑制螺旋藻的生长,藻丝体严重受损,可见光吸收440nm峰增强,620和680nm峰降低;荧光发射和激发光谱特征峰强度明显降低,藻胆蛋白特征发射峰由660nm蓝移至650nm;红外光谱透射峰没有发生位移,蛋白质和多肽的特征谱带酰胺Ⅰ带和酰胺Ⅱ带相对强度降低;细胞内ROS相对含量显著性升高。硒预处理24h呈剂量效应地减轻由H2O2胁迫引起的氧化损伤,有效地抑制胞内ROS的过度累积,提高螺旋藻的抗氧化能力,缓解了氧化胁迫对光能捕获和传递等重要生理功能的影响。     

用清除有机自由基DPPH法评价竹叶提取物抗氧化能力

通过对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)溶液吸收光谱、DPPH溶液反应体系的研究,得出以下结论,分光光度法测定DPPH溶液反应体系的测定波长为518.4 nm,反应体系为4.00 mL 257.7 mg·L-1的DPPH溶液中加1 mL不同浓度的抗氧化剂,反应体系加入抗氧化剂后反应时间为40 min;用上述方法研究评价合成抗氧化剂叔丁基对苯二酚(TBHQ)和2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)对DPPH自由基清除率和浓度的关系,以IC₅₀值(清除率为50%时,抗氧化剂的浓度值)作为评价指标,测得合成抗氧化剂和效果最好竹叶提取物样品IC₅₀值分别为,TBHQ(21.14 mg·L-1),BHT(42.09 mg·L-1),M40(108.40 mg·L-1),M40等竹叶提取物可以作为天然抗氧化剂进行开发。     

分光光度法测定克什克腾旗热水泉泉水中的硒

采用硒 -硫氰酸钾 -罗丹明 B-明胶 - OP体系分光光度法 ,在 5 80 nm波长下测定了克什克腾旗热水泉泉水中的硒 ,含量为 8.5 2— 9.0 5 μg·m L-1。回收率为 89%— 10 1%。     

4-甲基-邻苯二胺荧光光度法测定痕量硒

明胶为稳定剂,EDTA-2Na为掩蔽剂,硒与4-甲基-邻苯二胺生成络合物,其激发波长和发射波长分别为442nm和493nm.硒浓度在0.125-0.75μg/mL范围内具有良好的线性关系,检出限为0.46μg/L,此法用于测定银杏叶中的痕量硒,获得满意的结果.     

柚皮苷二氢查尔酮抗氧化活性的构效关系研究

采用DPPH自由基清除实验和Materials Studio软件中的DmoL~3程序对柚皮苷二氢查尔酮的DPPH自由基清除率、几何结构和性质(振动频率、反应活性及热力学性质)进行了理论研究,得到了分子的抗氧化活性数据、稳定几何构型、各原子上的电荷分布、热力学性质、Fukui指数和前线分子轨道参数,计算结果表明柚皮苷二氢查尔酮具有较高的反应活性,分子中酚羟基上的氧原子是影响其反应活性的主要部位,也是发生亲电反应的活性位点,表现出较强的抗氧化性,当柚皮苷二氢查尔酮浓度为0.3mg·mL~(-1)时,DPPH自由基清除率达到86.49%.     

(Au)_核(Ag)_壳纳米微粒-火焰原子吸收光谱法测定过氧化氢

在90 ℃水浴条件下,以粒径为10 nm的纳米金做晶种,用柠檬酸三钠还原硝酸银,制备了平均粒径为30 nm的（Au）核（Ag）壳纳米微粒,用高速离心纯化除去过量的柠檬酸三钠获得了较纯的（Au）核（Ag）壳纳米微粒。在pH 3.8的HAc-NaAc缓冲溶液中,Fe2＋催化H2O2反应产生的羟基自由基可氧化（Au）核（Ag）壳纳米微粒生成银离子。离心后,离心液中的银离子可用火焰原子吸收光谱法在328.1 nm波长处测量。随着H2O2浓度增大,离心液中银离子浓度增加,其吸光度值增加。H2O2浓度在2.64～42.24 μmol·L-1范围内与上清液中银离子的原子吸收值ΔA呈良好的线性关系,回归方程为ΔA=0.014c-0.013 1, 相关系数为0.998 4,检出限为0.81 μmol·L-1 H2O2。当用于水样中H2O2的测定,获得了满意的结果。     

DNA酶裂解-纳米金共振瑞利散射光谱法测定痕量Cu2+

在pH 7.0HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)缓冲溶液中和0.19mol.L-1 NaCl存在下,单链底物DNA(SS)和酶链DNA(ES)在80℃杂交形成双链DNA(dsDNA)。Cu2+可切割dsDNA中的底物链释放出单链DNA(ssDNA),此ssDNA与金纳米粒子(NG)作用形成NGssDNA结合物不被NaCl聚集,而未保护的NG聚集形成较大粒径的聚集体(NGA),在627nm处有一个较强的共振瑞利散射峰。随着Cu2+浓度的增大,该共振瑞利散射峰降低,其降低值ΔI与Cu2+浓度在15～1 250nmol.L-1范围呈线性关系,其回归方程为ΔI=0.17c-2.3,线性相关系数为0.989 5,检出限为8nmol.L-1。据此建立了一个高灵敏、高选择性、简便测定Cu2+的共振瑞利散射光谱分析法。该法用于水样中Cu2+的检测,结果满意。     

流动注射法探究模拟酶催化过氧亚硝酸根氧化酪氨酸的动力学特征

过氧亚硝酸根作为生物体内高活性自由基,能损伤多种生物大分子进而引起一系列重大疾病,对其含量测定和反应机制的研究具有重要意义。过氧亚硝酸根性质活泼,反应速率快,捕捉其动态过程十分困难。本文首次利用流动注射分析仪探究在不同模拟酶血红蛋白和氯化血红素的催化下,过氧亚硝酸根氧化酪氨酸体系的动力学特征。结果表明：过氧亚硝酸根在两种酶催化下氧化酪氨酸的过程均遵循Michaelis-Menten的动力学规律;根据米氏常数K_m和最大初速率V_max,推断其反应机制,经模拟酶催化的过氧亚硝酸根能直接氧化与模拟酶结合后的酪氨酸快速生成酪氨酸二聚体,未生成·OH和O-_2·。此外,我们还检测了不同温度、pH下两种模拟酶催化的速率常数,得到血红蛋白催化该体系的最适条件为25 ℃和pH 8.0,速率常数k_cat=1.035×106 mol·L-1·s-1,氯化血红素适宜在37 ℃和pH 9.5的条件下催化该体系,速率常数k_cat=6.842×105 mol·L-1·s-1;比较动力学参数KHb_m(4.46 μmol·L-1)<KHemin_m(4.90 μmol·L-1),VHb_max(0.072 ΔI_F/s)>VHemin_max(0.026 ΔI_F/s),发现最适条件下血红蛋白的速率常数大于氯化血红素,得到血红蛋白对于该体系的催化活性高于氯化血红素。以上结果为探究酶催化法测定过氧亚硝酸根含量及其反应机理提供动力学参数,对于防治生物体内自由基引起的相关疾病与诊断新技术的开发奠定理论基础。     

刺梨的活性成分含量分布与光谱表征

刺梨是蔷薇科蔷薇属多年生落叶灌木，其果实富含多种生物活性物质，具有重要的药食用价值。采用近红外、紫外-可见、激发发射三维荧光光谱技术系统性表征刺梨鲜果提取物化学组成，探讨不同产地的301个批次刺梨果中总酚、总黄酮、总三萜类物质的含量与自由基清除能力、铁离子还原能力等抗氧化活性的分布特征。结果显示刺梨果中具有高含量的酚类、黄酮类、三萜类物质，分别为9.23~37.45，8.80~27.96和6.91~22.62 mg·g-1 FW(新鲜刺梨果的重量)。刺梨果具有较好的自由基清除活性和还原能力，对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率为14.39%~83.19%、2,2’-联氮基-双-(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)清除率18.50%~68.45%、对铁离子还原能力(FRAP)0.08~0.44 mmol·L-1 TE·g-1 FW。这些物质含量与活性指标数据均服从正态分布，表明实验用的多批次刺梨样本具有多样性、代表性、随机性，并且不同产地的样本提取物的活性成分含量及抗氧化活性没有显著的统计学差异性。提取物样本的紫外-可见、近红外、荧光光谱都具有明显的谱带特征，其光谱数据的主判别变量模型可有效鉴别八个不同产地的刺梨样本。研究表明多光谱技术能够表征提取物的物质组成，可对刺梨鲜果进行快速检测、品质差异判别与产地溯源，为刺梨质量评价、选种和资源开发提供参考。植物提取物的总酚、总黄酮等活性成分含量、抗氧化活性等指标不能准确反映样本的活性物质组成特征性，不能用于样本产地溯源分析。     

一个检测痕量汞离子的鱼精DNA修饰纳米金共振散射光谱法

在pH 7.0 Tris-HCl缓冲溶液及0.017 mol.L-1NaCl介质中,鲱鱼精DNA与10 nm的金纳米粒子形成较稳定的结合物使得金纳米粒子不聚集,体系的散射信号较弱。当有Hg2+存在时,DNA与Hg2+形成更稳定的DNA-Hg2+结合物,金纳米粒子聚集导致572 nm处的共振散射峰增强。在3.87μg.mL-1金纳米粒子-11.7μg.mL-1DNA-pH 7.0~17 mmol.L-1NaCl条件下,Hg2+浓度c在3.3~3 333.3 nmol.L-1范围内与572 nm处的共振散射强度增强值ΔI572 nm成良好线性关系,其回归方程、相关系数、检出限分别为ΔI572 nm=0.019c+5.0,0.999 1,2.5 nmol.L-1。该法用于水样分析,结果与冷原子吸收光谱法一致,相对标准偏差为5.1%。     

药桑不同萃取部位总黄酮与抗氧化活性相关性

采用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH显色法测定药桑总黄酮含量,紫外可见分光光度法测定药桑中总黄酮对DPPH·、ABTS·＋的清除率,SPSS统计软件分析黄酮与抗氧化活性之间的相关性,探讨药桑中总黄酮的含量与抗氧化活性的相关性.结果显示药桑不同溶剂萃取部位中总黄酮含量各不相同,其中乙酸乙酯相总黄酮含量最高,水相中总黄酮含量最低.通过SPPS17.0分析,发现总黄酮的含量与抗氧化活性之间的关系是：与DPPH·清除率呈正相关关系,为显著相关关系,与ABTS·＋清除率呈正相关关系,但相关性不显著.本研究初步确定了药桑中总黄酮的含量与其抗氧化化活性的关系.     

同步荧光光谱比率法检测过氧亚硝酸根及其清除剂的研究

利用同步荧光光谱建立了一种新的荧光比率法检测过氧亚硝酸根(ONOO－)及评价其清除剂的方法。酪氨酸自身有荧光,在pH 8.5的磷酸缓冲溶液中,酪氨酸与CO₂和ONOO－反应生成强 荧光的酪氨酸二聚体,利用同步荧光光谱技术, 在荧光发射光谱中能同时获得酪氨酸单体(λ_em=364 nm)与二聚体的荧光峰(λ_em=406 nm),且两峰的荧光强度的比值与ONOO－的浓度呈计量相 关。结果表明荧光强度的比值不受实验参数改变的影响,与传统的荧光法相比,有利于扩大检测的线性范围,提高灵敏度。荧光强度的比值与ONOO－的浓度在1.60×10－7 mol·L-1～6.00× 10－6 mol·L-1范围内呈线性关系,线性相关系数为0.999,检测限为1.84×10－8 mol·L-1。对浓度为1.00×10－6 mol·L-1 ONOO－ 平行测定8次,其相对标准偏差为2.4％。利用该法测得抗癌药米托蒽醌的IC₅₀为0.065 μg·mL-1。方法简便易行,试剂廉价易得,体系稳定,可作为一种检测ONOO-及筛选其清除剂的方法。     

痕量葡萄糖的双酶催化荧光分析

在HAc-NaAc缓冲溶液中,葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖与溶解氧反应生成H₂O₂;辣根过氧化物酶(HRP)催化H₂O₂氧化过量的KI生成I-₃, I-₃分别与罗丹明S(RhS), 罗丹明6G(Rh6G), 丁基罗丹明B(b-RhB), 罗丹明B(RhB)结合形成缔合物微粒,使得4体系分别在556,556,584和584 nm处的荧光峰强度线性降低。在最佳条件下,葡萄糖的浓度分别在0.083～9.99,0.17～8.33,0. 33～8.33,0. 33～9.99 μmol·L-1范围内与RhS,Rh6G,b-RhB,RhB四体系的荧光猝灭强度呈良好的线性关系,其回归方程、相关系数、检出限分别为ΔF=40.0c+ 3.0,ΔF=23.9c+8.1,ΔF=25.6c+4.2,ΔF=18.4c+ 0.8;0.995 1,0.997 3,0.996 0,0.996 5;0.059,0.17,0.21,0.16 μmol·L-1。RhS催化体系最灵敏、稳定,将其用于人血清中葡萄糖的检测,结果满意。