LYVE-1 在甲状腺乳头状癌的表达和意义

目的 观察淋巴管透明质酸受体1（LYVE-1）的表达和癌周组织中淋巴管的生成情况在甲状腺恶性肿瘤的变化及转 移中的作用。方法 应用免疫组织化学和real-time PCR方法检测45 例甲状腺乳头状癌中央区、癌周边区和正常甲状腺组织中的LYVE-1及其mRNA 表达情况,并计算淋巴管密度（LVD）。结果 甲状腺乳头状癌周边区LVD 高于甲状腺乳头状癌中央区,而正常组织中很少见LYVE-1 阳性的微淋巴管;甲状腺乳头状癌周边区LVD 与淋巴结转移有密切关系（P＜0.05）。结论 LYVE-1是一种特异性较高的淋巴管内皮特异性标志物,对淋巴管生成促进甲状腺乳头状癌的淋巴结转移。     

黄芩苷对惊厥持续状态幼年大鼠海马IL-lβ、NF-κB表达的影响

目的观察幼年大鼠惊厥持续状态（SC）后海马CA1区神经细胞凋亡以及IL-1β和NF-κB蛋白、MicroRNA表达变化,并了解黄芩苷（BC）对其影响。方法将195只19d龄SD雄性大鼠随机分成生理盐水对照组（NS组）、惊厥持续状态组（SC组）和黄芩苷预处理组（BC组）,每组65只;各组按处死时间点随机分为4、12、24、48和72h组。采用氯化锂-匹鲁卡品化学点燃法制备幼年大鼠SC模型;采用免疫组化法检测大鼠海马中IL-lβ、NF-κB蛋白表达,RT-PCR法检测NF-κBMicroRNA表达,TUNEL法检测神经细胞凋亡数。结果IL-lβ：与NS组（12、24、48和72h分别为11.47±2.51、12.49±2.58、13.19±2.39和12.79±5.30）比较,SC组（12、24、48和72h分别为29.38±5.18、40.09±5.16、35.32±6.59和27.98±4.16）表达增强（均P＜0.01）;与SC组比较,BC组（12、24和48h组分别为21.19±4.54、29.78±4.39和25.91±5.64）表达降低（均P＜0.05）。NF-κB：与NS组（4、12、24、48和72h组分别为45.76±15.41、41.26±6.28、50.61±12.54、51.72±6.52和52.65±7.65）比较,SC组（4、12、24、48和72h组分别为64.06±6.18、71.16±6.49、79.34±11.76、67.07±6.58和65.12±9.66）表达增强（均P＜0.05）;与SC组比较,BC组（4、12和24h组分别为52.65±5.73、56.68±5.37和67.01±9.08）表达降低（均P＜0.05）。NF-κBMicroRNA表达与蛋白表达相似。SC组在惊厥后12h海马CA1区神经细胞凋亡数为（11.38±2.35）个,高于NS组的（6.19±1.48）个（P＜0.01）,48h达到高峰（28.28±5.17）个;BC组在12、24、48和72h时神经细胞凋亡数分别为（8.96±2.21）、（13.07±2.47）、（20.51±4.39）和（17.36±4.12）个,均低于SC组（均P＜0.05）,但高于NS组（6.19±1.48）、（6.59±1.66）、（6.79±1.15）和（6.31±1.47）个（均P＜0.05）。结论幼年大鼠SC后海马CA1区IL-1β和NF-κB表达增强,神经细胞凋亡增加;BC预处理能抑制早期IL-1β和NF-κB蛋白、MicroRNA表达,减少神经细胞凋亡,对幼年鼠SC后脑损伤具有一定的保护作用。     

胆囊癌中PTEN基因异常表达及甲基化的研究

目的 探讨胆囊癌的发生、发展及转移与PTEN 基因异常表达及其基因启动子区异常甲基化的关系。方法 选取胆囊癌标本44 例（胆囊癌组）和胆囊炎标本20 例（对照组）,通过免疫组织化学染色、Western-blot、甲基化特异性PCR法分析两组患者胆囊组织中PTEN 基因表达及启动子区甲基化差异。结果 与对照组相比,胆囊癌组中PTEN 基因表达阳性率明显下降（P＜0.01）,而启动子区甲基化阳性率显著增高（P＜0.01）;胆囊癌组中有淋巴结转移者PTEN 基因表达阳性率较无淋巴结转移者降低（P＜0.05）,而启动子区甲基化阳性率增高（P＜0.05）;胆囊癌分期增高,PTEN 基因表达阳性率降低（P＜0.05）,而启动子区甲基化阳性率增高（P＜0.05）。结论 PTEN 基因低表达是胆囊癌的发生、发展及转移的重要原因之一,其低表达与启动子区过度甲基化有关。     

藤黄酸诱导肺癌细胞H1975凋亡的机制研究

目的 研究藤黄酸（GA）诱导人肺癌细胞H1975凋亡的分子机制,探讨氧自由基（ROS）和JNK信号通路在GA杀伤 肺癌细胞中的作用。方法 以人肺癌细胞H1975为研究对象,MTT法测定GA抑制细胞增殖的作用,Annexin V/PI 双染法测定细胞凋亡率,DCFH-DA 法测定ROS 含量,JC-1探针染色分析线粒体膜电位（MMP）,Western blot检测JNK 信号通路的激活和线粒体凋亡途径相关蛋白表达的变化。结果 GA 呈剂量依赖性抑制H1975细胞的增殖,各实验组细胞存活率与空白对照组比较,均有统计学差异（P＜0.05 或0.01）。1、2.5 和5滋mol/L GA 作用24h 后,细胞凋亡率分别为25.2%、51.8%和75.1%,剪切型凋亡相关蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3 和cleaved PARP 的表达随GA 浓度增高而显著增加,与空白对照组比较,均有统计学差异（P＜0.05或0.01）。GA 作用2h 后H1975细胞ROS 含量显著升高,磷酸化JNK（p-JNK）表达上调（P＜0.05或0.01）。GA 作用16h后各实验组细胞MMP 均明显降低（均P＜0.05）。GA 作用24h后实验组细胞线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bak、Bik表达增加,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达与空白对照组相比明显下降（P＜0.05 或0.01）。结论 GA 具有诱导H1975 细胞凋亡的作用,其可能机制是上调细胞内ROS含量,激活JNK 信号通路,进而引起MMP 降低和线粒体凋亡途径激活。     

视黄醇结合蛋白4与糖尿病视网膜病变的相关性研究

目的 探讨2 型糖尿病（T2DM）患者的视黄醇结合蛋白4（RBP4）水平与糖尿病视网膜病变（DR）的关系。方法 应 用酶联免疫吸附法测定31 例无DR 的糖尿病患者（NDR 组）、33例非增殖性DR 患者（NPDR 组）、34 例增殖性DR 患者（PDR组）和36例无糖尿病的健康体检者（对照组）的血清RBP4 水平,比较4组RBP4水平,并分析其与BMI、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、TG 等的关系。结果 NDR 组、NPDR 组和PDR组患者血清RBP4 水平分别为（18.76±5.17）、（25.33±4.68）、（31.57±5.98）mg/L,与对照组[（11.65±4.32）mg/L]比较,差异有统计学意义（P＜0.05 或0.01）;NPDR 组、PDR组患者血清RBP4水平高于NDR 组,差异有统计学意义（P＜0.05 或0.01）。相关分析显示血清RBP4 水平与BMI、hs-CRP、TG 及HOMA-IR 呈显著正相关（r= 0.714、0.837、0.796、0.801,均P＜0.05）,多元逐步回归分析显示hs-CRP 和HOMA-IR 显著影响RBP4 水平（P＜0.05）。结论 血清RBP4 在糖尿病患者中显著升高,其水平变化与DR 的发生、发展密切相关。     

CXCR4、VEGF-C 和MMP-9在胃癌淋巴结转移中的作用及意义

目的 探讨趋化性细胞受体因子4（CXCR4）、血管内皮生长因子-C（VEGF-C）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在 胃癌淋巴结转移中的作用及意义。方法 应用免疫组化法检测76例人胃癌组织中CXCR4、VEGF-C 和MMP-9 的表达水平,并分析其与胃癌淋巴结转移的关系。结果 CXCR4、VEGF-C 或MMP-9 任一指标表达水平与胃癌淋巴结转移均有显著关系（均P＜0.01）,且这3 项指标两两相关,CXCR4/VEGF-C 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为84.8%（28/33）,高于仅1 项指标阳性表达（11/22,50.0%）及两者联合阴性表达（7/21,33.3%）的患者,差异有统计学意义（均P＜0.01）;VEGF-C/MMP-9 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为80.0%（32/40）,高于仅1 项指标阳性表达（9/19,47.4%）及两者联合阴性表达（5/17,29.4%）的患者,差异均有统计学意义（P＜0.05 或0.01）;CXCR4/MMP-9 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为83.3%（30/36）,高于仅1 项指标阳性表达（11/22,50.0%）及两者联合阴性表达（5/18,27.8%）的患者,差异均具有统计学意义（均P＜0.01）。3 项指标共同表达的患者淋巴结转移率高达90.0%。结论 CXCR4、VEGF-C 和MMP-9 在胃癌组织中的表达与淋巴结转移关系密切,如果3项指标均为阳性者淋巴结转移的可能性最大。     

HBsAg 对脂多糖诱导树突状细胞分泌IL-6和IL-12的影响

目的 研究HBsAg 对脂多糖诱导树突状细胞（DCs）分泌IL-6 和IL-12 的影响。方法 采用重组人粒- 单核 集落刺激因子（rhGM-CSF）联合重组人白细胞介素4（rhIL-4）诱导单个核细胞得到未成熟树突状细胞（iDCs）,分别加入HBsAg1、2、5μg/ml,并设对照组,各组再加入脂多糖诱导为成熟DCs。采用流式细胞术鉴定各组iDCs 的表型（CD11c、HLA-DR）,ELISA 法检测脂多糖诱导后培养上清液中IL-6 和IL-12 的水平。结果 iDCs 的CD11c/ HLA-DR 双阳性率为（83.62±6.89）%,显著高于单纯培养组（20.57±11.19）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。HBsAg 1、2、5μg/ml 组培养上清液中IL-6 分别为（609.36±127.06）、（566.01±173.46）、（295.03±76.08）pg/ml,低于对照组（1356.97±181.78）pg/ml（均P＜0.05）;HBsAg2、5滋g/ml 组IL-12 分别为（854.49±67.92）、（472.09±55.70）pg/ml,低于对照组（1248.78±112.09）pg/ml（均P＜0.05）;1滋g/ml 组IL-12（1103.53±134.15）pg/ml,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 低浓度HBsAg 可下调脂多糖诱导的DCs 细胞因子分泌。     

高糖对小鼠足细胞向间充质细胞 转分化的影响

目的 通过观察高糖环境下小鼠足细胞表达NEPH1、desmin、TGF-β1 和Smad7 的变化,探讨高糖损伤足细胞 的机制。方法 将培养成熟的小鼠足细胞用RandA 1.0 软件完全随机分为高糖1、2、3 组（葡萄糖浓度分别为15、25 和30mmol/L）和对照组（葡萄糖浓度5mmol/L）,倒置显微镜下观察高糖干预前后足细胞的形态变化,采用RT-PCR 和Western blot技术分别检测足细胞NEPH1、desmin、TGF-β1 和Smad7 的mRNA 和蛋白表达变化。结果 与对照组相比,高糖环境下培养48h 后,足细胞形态发生不同程度变化。NEPH1 和Smad7 的mRNA 表达较对照组显著减少（P＜0.05 或0.01）,desmin 和TGF-β1的mRNA 表达较对照组增加（P＜0.05 或0.01）。其中高糖2 组的NEPH1 和Smad7 的蛋白表达较对照组显著减少（均P＜0.01）,而desmin 和TGF-β1的蛋白表达较对照组显著增加（P＜0.01）。小鼠足细胞在高糖培养下NEPH1 mRNA 和desmin mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.993,P＜0.01）;NEPH1 mRNA 和TGF-β1 mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.989,P＜0.01）;TGF-β1 mRNA 的表达和Smad7 mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.996,P＜0.01）。结论 高糖可能通过激活TGF-β/Smad信号通路诱导小鼠足细胞发生表型转化。     

婴幼儿喘息性疾病血红素加氧酶-1与一氧化碳的临床意义

目的探讨血红素加氧酶-1（HO-1）与一氧化碳（CO）在喘息性疾病婴幼儿血清中含量变化及其临床意义。方法收集112例4岁以下喘息患儿,根据《儿童社区获得性肺炎管理指南（2013修订）》分为重症组（存在低氧血症）49例和轻症组（无低氧血症）63例;选择同期同年龄段急性支气管炎患儿58例为对照组。采用双抗体夹心ELISA技术测定患儿血清HO-1含量,应用双波长分光光度法测定患儿血中碳氧血红蛋白（COHb）含量,进行组间比较分析。结果急性期（入院时）3组间HO-1和COHb含量差异均有统计学意义（均P＜0.01）,两两比较,仅重症组（2577.01±879.47）ng/L、（3.84±0.87）%明显高于轻症组（1382.90±731.80）ng/L、（1.17±0.60）%和对照组（1113.73±606.25）ng/L、（1.01±0.54）%（均P＜0.01）。重症组HO-1和COHb含量,均为急性期高于恢复期（均P＜0.01）。急性期重症组HO-1与COHb含量呈正相关（r=0.340,P＜0.05）。结论HO-1和CO可能参与婴幼儿喘息性疾病发展过程,急性重症期两者呈正相关,具有诊断疾病、判断严重程度与预后等临床意义。     

丹红注射液对肝缺血- 再灌注损伤大鼠ICAM-1表达的影响

目的 研究丹红注射液对大鼠肝缺血- 再灌注损伤（HIRI）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）表达的影响,并探讨其作用机制。方法 24 只SD 大鼠随机分为假手术组（Sham 组）、缺血- 再灌注组（I-R 组）和缺血- 再灌注丹红注射液预处理组（DH组）。阻断I-R、DH 组大鼠的门静脉、肝动脉和胆总管20min 后恢复血供,建立肝HIRI 模型。12h 后采血检测各组血清ALT 和AST的含量,显微镜下观察肝组织病理学改变,免疫组织化学法检测肝组织ICAM-1的表达。结果 I-R 组血清ALT、AST 水平较Sham组明显上升（P＜0.01）,肝组织病理学损害严重,ICAM-1 表达上调（P＜0.01）;DH 组ICAM-1表达则较I-R 组明显下调（P＜0.01）,ALT、AST 水平均下降（均P＜0.01）,肝组织病理学损害亦明显减轻。结论 丹红注射液能在一定程度上保护HIRI 后的肝组织,该作用可能与下调ICAM-1 的表达,减轻炎症反应有关。