VEGF、EGFR 及Parkin 蛋白在 鼻咽癌中的表达及三者间的相关性研究

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）、表皮生长因子受体（EGFR）及Parkin 蛋白在鼻咽癌（NPC）中的表达情况以 及三者间的相关性。方法 应用免疫组化SP 法检测48 例NPC 组织和34例正常鼻咽部上皮组织中VEGF、EGFR 及Parkin蛋白的表达,并探讨三者间的相关性。结果 NPC组织中VEGF和EGFR蛋白表达阳性率明显高于正常鼻咽部上皮组织,Parkin蛋白表达阳性率则明显下降,且均有统计学差异（均P＜0.05）。NPC组织中VEGF蛋白表达与NPC患者有无淋巴结转移及临床TNM 分期密切相关（均P＜0.05）,而与患者的年龄、性别、病理类型、T 分期均无关（均P ＞0.05）;EGFR 和Parkin 蛋白表达与NPC 患者有无淋巴结转移密切相关（均P＜0.05）,而与患者的年龄、性别、病理类型、T分期、临床TNM分期均无关（均P ＞0.05）。NPC组织中VEGF和EGFR 蛋白的表达呈正相关（P＜0.05）,Parkin和VEGF、EGFR蛋白的表达无相关性（均P＞0.05）。结论 VEGF、EGFR 及Parkin 蛋白与NPC发生、发展有关,VEGF、EGFR 及Parkin蛋白表达可作为NPC 的预后判断指标,NPC 中VEGF 和EGFR可能起协同作用,而Parkin 则可能单独发挥作用。     

肥大细胞在人乳头瘤病毒感染导致宫颈鳞癌发生发展中的作用研究

目的观察人乳头瘤病毒（HPV）和肥大细胞（MC）在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞癌（SCC）组织中的表达。方法采用S—P免疫组化法检测60例CIN患者、40例SCC组患者和20例子宫肌瘤患者（对照组）组织中MC的表达，同时采用DNA导流杂交基因芯片技术检测各级组织脱落细胞中HPVDNA分型。结果随着宫颈病变程度的加重．高危型（HR）-HPV感染阳性率逐渐增加，分别为10％、55％、65％、85％、100％，其中最常见的高危型HPV感染的基因型为：16、58、52、18。与CINIII组比较，MC密度在CIN11组、SCC组、对照组中的表达明显升高（P〈0．01或0．05），并且MC与肿瘤临床分期和血管转移有关（均P〈0．05）。MC低表达者与高表达者间HR—HPV阳性率的差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HR—HPV感染可以降低MC的表达，癌组织中浸润的MC可以促进肿瘤血管的形成和肿瘤的浸润转移。     

c-Met蛋白在甲状腺癌中的表达及其临床病理意义

目的 检测c-Met 蛋白在甲状腺癌及癌旁甲状腺组织中的表达,并分析c-Met 蛋白表达与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学En Vision二步法检测81 例甲状腺癌组织及52 例癌旁甲状腺组织中c-Met 蛋白的表达。结果 甲状腺癌和癌旁甲状腺组织中c-Met 蛋白阳性率分别为46.9%（38/81）和7.7%（4/52）,两者比较有统计学差异（P＜0.01）。其中甲状腺乳头状癌中c-Met 蛋白阳性率50.8%（31/61）,髓样癌中阳性率60.0%（3/5）,均高于滤泡癌26.7%（4/15）,但均无统计学差异（均P＞0.05）。甲状腺乳头状癌c-Met蛋白表达与患者各项临床病理特征均无相关性（均P＞0.05）。结论 甲状腺癌中c-Met 表达增强,其高表达可能与甲状腺癌发生相关,有望成为抗甲状腺癌治疗的一个潜在靶点。     

Pokemon和p53在乳腺癌组织中的表达及其生物学意义

目的 探讨乳腺癌组织中Pokemon和p53蛋白的表达及其相关性，并分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化En Vision 法检测90 例乳腺癌和相应癌旁组织中Pokemon 和p53 蛋白的表达情况。结果 乳腺癌组织中Pokemon和p53蛋白表达阳性率均明显高于癌旁组织（均P＜0.01）；Pokemon 和p53蛋白的表达与乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移均有关（均P＜0.01），而与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型及分级均无关（均P ＞0.05）。Spearman相关分析显示在乳腺癌组织中，Pokemon 和p53 蛋白表达呈正相关（P＜0.01）。结论 Pokemon 和p53蛋白异常表达可能与乳腺癌的发生、发展有关，联合检测两者对评估乳腺癌生物学行为及预后具有较重要的临床意义。     

肛周脓肿局部组织及外周血中IL-22 的表达及临床意义

目的 探讨细胞因子IL-22 在肛周脓肿局部组织及外周血中的表达和意义。方法 选取50例肛周脓肿患者（肛周 脓肿组）和50例无感染的混合痔患者（对照组）,两组患者均行手术治疗,并术中留取病变组织标本。术后观察患者转归,免疫组织化学法检测IL-22 表达、RT-PCR 法检测外周血单核细胞中IL-22 mRNA 的表达,观察IL-22 表达的变化及其与患者临床病理特征之间的关系。结果 IL-22在肛周脓肿组的表达阳性率高于对照组（P＜0.01）;肛周脓肿组根据不同转归分为治愈组、脓肿复发组、肛痿组,3 组患者IL-22 表达阳性率比较,治愈组显著降低,而肛瘘组最高（P＜0.01）。肛周脓肿组外周血单核细胞中IL-22 mRNA表达水平显著高于对照组（P＜0.01）;在肛周脓肿组中随着疾病的进展,肛瘘组患者外周血单核细胞中IL-22 mRNA表达水平显著高于治愈组（P＜0.01）。肛周脓肿组中IL-22的表达与患者性别、年龄均无关（均P ＞0.05）,而与脓肿直径（P＜0.01）、创面愈合时间（P＜0.05） 及进展为肛瘘有关（P＜0.05）。结论 IL-22在肛周脓肿局部组织及外周血中表达增强,在其发病机制中起了重要作用。     

CXCR4、VEGF-C 和MMP-9在胃癌淋巴结转移中的作用及意义

目的 探讨趋化性细胞受体因子4（CXCR4）、血管内皮生长因子-C（VEGF-C）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在 胃癌淋巴结转移中的作用及意义。方法 应用免疫组化法检测76例人胃癌组织中CXCR4、VEGF-C 和MMP-9 的表达水平,并分析其与胃癌淋巴结转移的关系。结果 CXCR4、VEGF-C 或MMP-9 任一指标表达水平与胃癌淋巴结转移均有显著关系（均P＜0.01）,且这3 项指标两两相关,CXCR4/VEGF-C 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为84.8%（28/33）,高于仅1 项指标阳性表达（11/22,50.0%）及两者联合阴性表达（7/21,33.3%）的患者,差异有统计学意义（均P＜0.01）;VEGF-C/MMP-9 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为80.0%（32/40）,高于仅1 项指标阳性表达（9/19,47.4%）及两者联合阴性表达（5/17,29.4%）的患者,差异均有统计学意义（P＜0.05 或0.01）;CXCR4/MMP-9 联合阳性表达的患者淋巴结转移率为83.3%（30/36）,高于仅1 项指标阳性表达（11/22,50.0%）及两者联合阴性表达（5/18,27.8%）的患者,差异均具有统计学意义（均P＜0.01）。3 项指标共同表达的患者淋巴结转移率高达90.0%。结论 CXCR4、VEGF-C 和MMP-9 在胃癌组织中的表达与淋巴结转移关系密切,如果3项指标均为阳性者淋巴结转移的可能性最大。     

长链非编码RNA UCA1 在胃癌组织中的表达及其效应分析

目的 分析胃癌组织特征长链非编码RNA（lncRNA）表达谱,并探讨长链非编码RNA UCA1 在胃癌中的表达及效 应。方法 采用基因芯片检测6 例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁正常组织LncRNA表达水平,分析胃癌组织特征lncRNA 表达谱,进一步通过定量PCR 检测40 例胃癌及其对应的癌旁正常组织中UCA1的表达并分析淋巴结转移、肿块大小、细胞分化程度及病理分期等临床病理特征的关系。在此基础上,利用siRNA 下调AGS 胃癌细胞内UCA1 表达水平,利用CCK-8 试剂盒检测UCA1干预对胃癌细胞增殖能力的影响。结果 LncRNA 基因芯片检测到胃癌组织1 021条差异＞2倍的lncRNA（P＜0.05）,定量PCR 验证明显差异表达的UCA1在胃癌组织中的表达显著高于正常组织（P＜0.01）。此外,临床病理相关分析显示,UCA1表达水平还与胃癌的细胞分化程度及病理分期相关。分化低的胃癌组织中UCA1表达水平明显高于中、高分化的胃癌组织（P＜0.05）;病理分期Ⅲ/Ⅳ期胃癌组织的UCA1 表达水平明显高于Ⅰ/Ⅱ期的标本（P＜0.05）。此外,下调UCA1 胃癌细胞表达可明显抑制细胞增殖。结论 异常表达的lncRNA 参与了胃癌的发生、发展,其中肿瘤组织上调表达的UCA1是胃癌重要的促癌基因。     

上皮细胞黏附分子在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 探讨上皮细胞黏附分子（EPCAM）在胃癌组织中的表达及其与胃癌浸润转移及预后的关系,以及EPCAM作为胃癌早期诊断、预后判断和治疗靶点的临床价值。方法 应用免疫组织化学法检测436 例胃癌组织及92例癌旁非肿瘤胃黏膜组织中EPCAM 的表达情况,分析并探讨EPCAM 的表达与临床病理参数及预后的关系。结果 在92 例非肿瘤胃黏膜组织中,50例（54.3%）EPCAM 蛋白为阴性表达,42例（45.7%）呈弱阳性表达。在436 例胃癌组织中,EPCAM 蛋白高表达179 例（41.1%）,低表达257 例（58.9%）,主要在细胞包膜表达。EPCAM 蛋白的表达强度与肿瘤部位、肿瘤大小、Lauren 分型、浸润深度、淋巴结分期、TNM 分期、淋巴结转移和远处转移密切相关（均P＜0.01）,而与患者性别、分化程度、组织学类型无关（均P ＞0.05）。EPCAM 高表达患者的5 年生存率（57.2%）明显低于EPCAM 低表达胃癌患者的5 年生存率（17.3%,P＜0.05）。I、II 和III 期EPCAM高表达胃癌患者的5年生存率明显低于EPCAM 低表达患者的5年生存率（P＜0.05）;IV 期EPCAM 高表达和低表达胃癌患者的5年生存率无统计学差异。EPCAM 表达、远处转移和TNM 分期（均P＜0.05）是胃癌的独立预后因素。结论 EPCAM 在胃癌中高表达,且其表达与淋巴结转移、远处转移、肿瘤的TNM 分期显著相关,提示EPCAM 可以作为胃癌的早期诊断的筛查指标以及治疗的靶点之一。     

帕立骨化醇对糖尿病肾病肾小管 上皮间充质转化的干预作用研究

目的 探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DKD）肾小管上皮间充质转化（EMT）的作用及内在机制。方法 将24 只SD 大鼠按随机数字表法分为帕立骨化醇干预组（P 组）、糖尿病肾病组（D 组）和正常对照组（C 组）,每组各8 只。P 组和D 组大鼠腹腔注射链脲佐菌素65mg/kg建立糖尿病肾病模型,造模成功后第2天P 组腹腔注射帕立骨化醇（溶于丙二醇中）0.4滋g/kg,3 次/ 周,D 组予等体积丙二醇;C组仅予等体积丙二醇。4 周后测血、尿生化指标;进行肾脏病理学检查;免疫组化及Western blot 技术检测肾组织E- 钙粘蛋白（E-cadherin）、α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）、转化生长因子-β1（TGF-β1）及Klotho 的表达,并进行指标间的相关性分析。结果 D组大鼠血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）及24 h尿蛋白水平均高于C 组,P 组均低于D 组（均P＜ 0.05）。C 组大鼠肾小管结构完整清晰,无明显病理改变;D 组可见肾小管间质局部炎症细胞浸润,肾小管上皮细胞脱落,小管扩张,基底膜断裂;P 组肾小管间质病理改变较D 组减轻。D 组大鼠肾组织E-cadherin 与Klotho表达低于C组,而P组高于D组（均P＜0.05）;与C 组比较,D 组大鼠肾组织α-SMA、FN 及TGF-β1 表达增加,而P 组表达均较D 组减少（均P＜0.05）。Klotho 表达与E-cadherin呈正相关（r=0.924,P＜0.05）,而与α-SMA、FN 及TGF-β1 均呈负相关（r=-0.806、-0.623、-0.856,均P＜0.05）。结论 帕立骨化醇可抑制糖尿病肾病大鼠肾小管上皮EMT,其作用可能与增加肾组织Klotho表达,同时减少TGF-β1合成相关。     

高糖对小鼠足细胞向间充质细胞 转分化的影响

目的 通过观察高糖环境下小鼠足细胞表达NEPH1、desmin、TGF-β1 和Smad7 的变化,探讨高糖损伤足细胞 的机制。方法 将培养成熟的小鼠足细胞用RandA 1.0 软件完全随机分为高糖1、2、3 组（葡萄糖浓度分别为15、25 和30mmol/L）和对照组（葡萄糖浓度5mmol/L）,倒置显微镜下观察高糖干预前后足细胞的形态变化,采用RT-PCR 和Western blot技术分别检测足细胞NEPH1、desmin、TGF-β1 和Smad7 的mRNA 和蛋白表达变化。结果 与对照组相比,高糖环境下培养48h 后,足细胞形态发生不同程度变化。NEPH1 和Smad7 的mRNA 表达较对照组显著减少（P＜0.05 或0.01）,desmin 和TGF-β1的mRNA 表达较对照组增加（P＜0.05 或0.01）。其中高糖2 组的NEPH1 和Smad7 的蛋白表达较对照组显著减少（均P＜0.01）,而desmin 和TGF-β1的蛋白表达较对照组显著增加（P＜0.01）。小鼠足细胞在高糖培养下NEPH1 mRNA 和desmin mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.993,P＜0.01）;NEPH1 mRNA 和TGF-β1 mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.989,P＜0.01）;TGF-β1 mRNA 的表达和Smad7 mRNA 的表达呈显著负相关（r=-0.996,P＜0.01）。结论 高糖可能通过激活TGF-β/Smad信号通路诱导小鼠足细胞发生表型转化。