两个东亚钳蝎神经毒素cDNA的克隆和序列分析

构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ,用 PCR筛选到两个新的神经毒素全长 c DNA,其开放阅读框(ORF)包括 :信号肽、成熟毒素和 /或额外氨基酸序列 ,它们编码的成熟毒素分别命名为 BmαTX9和 Bm IT( cp) 2 .序列分析表明 ,BmαTX9为抗哺乳动物神经毒素 ;Bm IT( cp) 2为痉挛型昆虫毒素 .文章还对东亚钳蝎神经毒素的命名 ,分类以及进化等问题进行了初步的探讨 .     

丙型肝炎病毒NS5B基因在昆虫细胞中的表达

将含有丙型肝炎病毒（HCV）NS5B基因的转移载体pBlueBac5B与野生型杆状病毒(AcNPV)DNA共转染Sf9昆虫细胞,通过空斑纯化获得带有NS5B基因的重组病毒AcNS5B.提取重组病毒基因组DNA进行Southern分析,发现有一条1.8kb的DNA片段与标记的探针发生杂交.AcNS5B感染Sf9细胞后,在细胞中表达了分子量为66×103的蛋白,用Westernblot方法检查这种蛋白质,能与兔抗HCVNS5B抗血清发生特异的强烈反应.     

分子生物技术在贝类鉴定和分类上的应用

传统的贝类分类的主要依据——形态学、解剖学和生理学等方面在解决分类问题上存在着不足之处,而近十几年来发展起来的分子生物技术作为一种辅助手段,能从DNA水平进行分类研究,解决形态分类上不能解决的问题,从而对生物物种进行系统的分类.目前分子生物技术已出现数十种,比较常用的有蛋白质电泳技术、核苷酸序列分析技术、简单重复序列锚定PCR（Simple Sequence Repeat-Anchored PCR Ampiification,SSR-PCR）、随机扩增多态DNA技术（Random Ampiified Polymorphic DNA,RAPD）等.本文主要从蛋白酶谱分析技术和基于DNA的技术两大方面综述了分子生物技术在贝类鉴定和分类上的应用现状.虽然用分子学方法与用形态学方法在进行分类时有时存在不一致性,但随着技术的进步,理论和实践的积累,将分子方法和传统方法相结合将会越来越好的解决贝类的系统分类问题.     

孢子丝菌分子生物学DNA多态性分型研究

目的研究孢子丝菌DNA分型,并探讨DNA分型技术在临床菌钟鉴定以及流行病学中的应用.方法本实验采用氯化苯法提取DNA,以NS5、NS6为引物用随机扩增DNA多态性(DAPD)方法对临床分离的30株孢子丝菌进行DNA分型.结果30株孢子丝菌的DNA带型不完全相同,具有一定的遗传变异性.30株临床分离的孢子丝菌可进一步分为4型.不同部位取材的菌株间及临床型不同的患者的菌株间DNA型基本相同.结论随机扩增DNA多态性研究发现孢子丝菌具有一定的种内差异.该方法可将临床分离的孢子丝菌分为4型.本研究对病原学诊断探讨感染来源,传播途径等流行病学研究奠定了基础.     

猪肝线粒体DNA的纯化及其限制酶切分析

本文报道了一种纯化猪肝线粒体DNA } mtDNA)的简便方法.用差速离心制备线粒体，然后用1 `oSarkosyl提取粗制的mt DNA,氯仿一异戍醇脱蛋白，最后用Sepharose4B凝胶柱层析纯化mt DNA.对纯化的mt DNA用化学分析、紫外吸收光谱、凝胶电泳和限制酶切等方法进行了鉴定.猪肝mt DNA经限制酶Hindi, Hael, Hinc.y,BamH I和Eco R I酶切分别切割成.4r .6,.r,5, 5和3个片断，经估算猪肝。tDNA的分子鼻约为15.85千碱基对或10. A6 x 10‘道尔顿.     

实时荧光定量PCR检测新生隐球菌DNA方法的建立

以新生隐球菌DNA中一段高度保守序列为目的序列,结合PCR和DNA探针技术优点,设计出特异引物和探针,并优化新生隐球菌荧光定量PCR反应体系,研究出实时荧光定量PCR检测技术检测新生隐球菌DNA的方法.结果显示:标准株及临床样本株新生隐球菌保守序列为124 bp;重组质粒pUCM-T中目的基因片段序列碱基符合率100%;当质粒标准品浓度1.0×103~1.0×107Copies/mL时,相关系数为0.997,有很好的线性关系;各浓度标准品的Ct值变异系数均小于5%,表明此技术的重复性好,用特异性引物扩增可检测出5.0×102Copies/mL的新生隐球菌DNA,说明该方法敏感性很好.     

应用光学生物传感器测定DNA与组蛋白H1的结合常数

用一种新的基于共振镜技术(resonant mirror)的IAsys光生物传感器分别测定了小牛胸腺DNA(ctDNA),鲑鱼精DNA(hsDNA),pUC-18质粒DNA与组蛋白H1相互作用的结合和解离的动力学速率常数(ka,kd)和解离平衡常数(KD).结果表明ctDNA与H1的结合作用最强,其KD值为5.44×10-7mol.L-1,hsDNA,pUC-18质粒DNA与组蛋白H1的KD值分别为73.34×10-7,67.93×10-7mol.L-1.     

浙江天台、宁海县并殖吸虫DNA序列研究

为了解浙江各地肺吸虫的遗传背景,对天台县和宁海县并殖吸虫的虫种进行了DNA序列分析,以期探讨并殖吸虫的虫种命名和其与临床致病的联系.采用DNA测序技术,对两地并殖吸虫囊蚴的核糖体DNA第二间区(ITS2)的基因序列进行测定,并观察囊蚴形态.通过ITS2的基因序列与从GenBank检索到的卫氏并殖吸虫序列比较,结合形态观察,确定天台、宁海县的肺吸虫为卫氏并殖吸虫;而宁海县的并殖吸虫ITS2序列与卫氏并殖吸虫相似,但囊蚴的形态却存在大小之分.     

红山茶高质量基因组DNA的提取

红山茶植物细胞含有大量的多糖、脂质、色素和酚类物质,严重影响基因组DNA的提取.本研究在多次实验的基础上对CTAB法进行了改良,结果表明:采用细胞核被解裂之前加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP),用冰冻异丙醇沉淀基因组DNA等关键技术,可以从山茶属红山茶组56个物种的植物叶片中快速提取高质量的DNA,满足ITS序列测定的需要;用嫩叶提取可获得纯度较高的DNA;样品在-20℃低温下保存对DNA的提取质量无明显影响.     

联苯胺与DNA相互作用的电化学研究及应用

在三羟甲基氨甲烷缓冲溶液中,研究了联苯胺(BZ)与脱氧核糖核酸(DNA)的电化学行为.当DNA不存在时,联苯胺有一对氧化还原峰;但当DNA存在时,则峰电流定量减少.峰电流的减小主要是由于DNA与BZ生成了化合物.在最佳条件下,峰电流的减小与DNA的浓度在7.0×10-5~6.0×10-3g/L呈线性关系,检出限为3.0×10-5g/L.该方法具有较好的回收率和选择性,并已应用于样品中DNA的测定.同时,还讨论了BZ和DNA相互作用的机理.     

膜分离技术及其应用简介

阐述了膜分离过程的特点及分离原理．介绍了膜分离技术在食品业、生物工程、环保、医疗卫生等领域的应用状况和前景．     

研究蛋白质相互作用的新系统——酵母双杂交系统

自酵母双杂交系统创建以来,已经成为研究蛋白质相互作用的重要手段,被广泛用于各个生物学研究领域,揭示了大量未知蛋白质之间的相互作用. 近来,在经典的酵母双杂交系统基础上,又相继提出许多新的研究方法,如:三杂交系统,单杂交系统,逆向双杂交系统,SOS富集系统等等. 酵母双杂交及其衍生系统已经成功地运用于蛋白质之间,蛋白质与DNA、RNA、配体之间的相互作用的研究     

半柔性大分子链穿越微孔行为的研究

采用动态蒙特卡罗模拟方法,模拟半柔性大分子链在电场作用下穿越纳米孔道进入球腔的输运过程. 主要研究电场强度及半柔性大分子链的刚性强度对穿孔过程的影响.发现：平均穿孔时间τ随电场强度的增大而减小,τ与链的长度N满足标度关系τ~N^α,并且电场强度E和弯曲能b对标度指数有显著影响. 研究结果表明,当电场强度为中等时,刚性弱和刚性强的大分子的穿孔过程是完全不同的. 研究半柔性大分子链穿越微孔的行为,有助于更深入认识生物大分子在生命体内的输运过程.     

生物芯片及其研究进展

生物芯片主要有两种类型,分别以分子微阵列和结构微阵列为基础,前者通过原位化学合成和芯片外合成机械点样法构建高密度的探针微阵列,主要用于DNA序列测定,分析基因组突变和多态性位点以及测定基因表达水平和比较同源基因在不同条件下的表达差异等,后者通过电子工业中标准的蚀刻工艺,在片基上构建各种显微结构微阵列,用于样品的分离及分子扩增等,本文阐述了生物芯片在概念,加工制备及应用领域等方面的研究进展。     

吲唑脲类辣椒素受体通道拮抗剂的定量构效关系

研究了吲唑脲类辣椒素受体(TRPV1)通道拮抗剂的定量构效关系(QSAR).首先,采用1H-吲唑异构形式,对27个TRPV1通道拮抗剂分子进行了HF/6-31G*水平上的结构优化,在优化结构上进行了5类拓扑指数和分子静电势及其导出参数的计算.运用多元线性回归方法对这些化合物的生物活性与其分子结构参数进行了关联.对所有化合物采用另一异构形式重复上述过程,以探讨互变异构对QSAR建模的影响.结果表明:互变异构对QSAR结果具有一定的影响,采用1H-吲唑异构形式得到的模型,在质量上均高于采用2H-吲唑异构体,预示着1H-吲唑异构体更有可能是吲唑脲类分子的活性异构形式;分子表面静电势参数结合GETAWAY参数可以较好地用于描述TRPV1通道拮抗剂分子结构与其活性间的定量关系.     

Goertzel算法的一种改进计算结构

针对Goertzel算法的计算结构硬件实现效率低等问题,提出了利用两个FIR滤波器实现Goerztel算法,并且将改进后的计算结构由原来的AR（2）过程推广到一般的AR（p）过程.改进后的计算结构避免了递推运算,能够预确定数据的动态范围进行定标,充分利用了DSP等信号处理器的硬件结构,适合定点处理器的编程.通过在定点DSP处理器TMS320C5510上进行软件仿真,测试结果表明改进计算结构后算法的效率是改进前算法效率的3.7倍.     

DNA随机存储器的设计

近年来,生物大分子在模拟计算领域的研究已经取得了很大的突破,无论是理论模型的研究,还是生化实验的验证,生物分子计算机正蓬勃地展现出它的无可限量的发展前景.DNA随机存储器的研究在整个生物分子计算机研究中是一个重要分支.DNA随机存储器以环状单链DNA分子为存储介质,以4种碱基(腺嘌呤adenine、鸟嘌呤guanine、胞嘧啶cytosine和胸腺嘧啶thymine)对信息进行编码;以DNA分子与各种生化酶(Nicking核酸内切酶、核酸外切酶、聚合酶)间的生化反应来模拟数据的读取和写入.     

基于手持移动设备上的考试平台

通过对移动教育特征的分析,将移动通信技术和现代教育的现况相结合,并根据不同类型的移动通信设备设计并实现了一个基于手持设备的移动教育平台。通过移动通信技术与现代教学手段,将移动教学与传统的网络远程教学相结合,以提高教学效率,增强教和学两个环节的互动性。最后根据移     

香菇135和9015品种遗传多样性的RAPD分子标记研究

通过抗逆性较差的香菇135品种和自然变异抗性新菌株庆元9015品种的RAPD研究,寻找两者间有差异的基因,并对其进行克隆和测序.GenBank查询结果表明,这些片段可能的部分开放阅读框（ORF）与多种生物的水解酶或者信息素受体的部分氨基酸序列有较高的同源性. 这些片段可以作为两者间的特异分子标记.