旱生植物梭梭苹果酸脱氢酶的纯化及其性质的研究

本文采用差速离心法、硫酸铵分级沉淀，ＤＥＡＥ纤维素和半琼脂糖柱层析方法，从旱生植物梭梭体内分离出纯化１０４倍的ＮＡＤ－——ＭＤＨ．该酶等电点为５．７，最适ｐＨ７．１，它对草酰乙酸和ＮＡＤＨ的表观Ｋｍ值分别为８０μＭ和９０μＭ，凝胶过滤法得分子量为６７０００Ｄ．ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电泳法得分子量为３３０００Ｄ，说明该酶是由两个相同亚基组成的二聚体蛋白．该酶的热稳定曲线表明，在５５℃以下时酶活性较稳定．     

受乳糖启动子控制的基因表达过程的优化

借助于ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法，对乳糖诱导的由乳糖启动子控制的大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶σ７０因子基因表达过程进行了优化研究．结果表明，含此融合基因的大肠杆菌菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＧＥＭＤ的生长量达到ＯＤ６００ｎｍ＝１．０时，用终浓度为０．０８％的乳糖进行连续５ｈ的诱导，可使大肠杆菌ＲＮＡ聚合酶σ７０因子基因的表达量达到最大，并达到ＩＰＴＧ同样的诱导效果．流加低浓度的乳糖溶液能增加σ７０因子的合成量，但是促进作用不很显著．     

人丙型肝炎病毒核心抗原基因的表达和纯化

人丙型肝炎病毒Ｉ型（ＨＣＶ－Ｉ）核心抗原编码区ｃＤＮＡ，全长５７３ｂｐ，编码１９１个氨基酸，被克隆到一种新的表达质粒ｐＲＳＥＴＨｉｓＢ中，转化大肠菌ＢＬ２１菌株，在１ｍｍｏｌＬ－１ＩＰＴＧ诱导３７℃培养５ｈ，核心抗原表达水平达到高峰，表达出分子量２６×１０３的融合蛋白，并在细胞内形成微小晶体．表达水平达到细胞总蛋白的４０％左右，通过纯化，获得的核心抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检查为均一分子量２６×１０３的蛋白，用酶联免疫法进行血清学初步检查，纯化的核心抗原与ＨＣＶ阳性血清显示出强烈的阳性反应，对慢性丙肝病人血清中抗ＨＣＶ抗体的阳性检出率达９３％，而与正常人血清则无阳性反应     

模拟污水中氮、磷对水稻幼苗过氧化氢酶和乙醇酸氧化酶的影响

以水稻为材料，研究了不同浓度的模拟污水中Ｎ、Ｐ对幼苗过氧化氢酶（Ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ，ＥＣ１．１１．１．６）、乙醇酸氧化酶（Ｇｌｅｃｏｌａｔｅｏｘｉｄａｓｅ，ＧＯ，ＥＣ１．３．３．１）、过氧化物酶（Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＰＯＤ，ＥＣ１．１１．１．７）和叶绿素含量的影响．结果表明：低浓度Ｎ、Ｐ（分别；在０～４．２８ｍｍｏｌ·Ｌ－１、０～０．２ｍｍｏｌ·Ｌ－１范围）可诱导ＣＡＴ活性增大，而后下降，Ｎ、Ｐ浓度分别超过８．５６ｍｍｏｌ·Ｌ－１和０．４ｍｍｏｌ·Ｌ－１后，活性又升高；ＰＯＤ的活性变化与ＣＡＴ变化很相似．Ｎ、Ｐ浓度分别在０～６．４２ｍｍｏｌ·Ｌ－１、０～０．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１范围，ＧＯ活性随Ｎ、Ｐ浓度增高而活性下降，超过６．４２ｍｍｏｌ·Ｌ－１、０．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１后，则随Ｎ、Ｐ浓度增大而增大．这可能是高浓度Ｎ、Ｐ可提高水稻的光呼吸的结果．另外，污水中Ｎ、Ｐ抑制叶绿素的合成，使叶绿素的含量降低；低浓度污水Ｎ、Ｐ促进根生长，高浓度Ｎ、Ｐ抑制根生长     

新显色剂2－［2－（6－硝基－苯并噻唑）偶氮］－5－〔（N，N－二羧甲基）氨基］苯磺酸与钯显色反应的研究及其应用

本文报道了新显色剂２－［２－（６－硝基－苯并噻唑）偶氮］－５－［（Ｎ，Ｎ－二羧甲基）氨基］苯磺酸（简称６－ＮＯ２－ＢＴＡＤＣＡＢＳ）的合成，研究了试剂与钯的显色反应．结果表明，在０．４ｍｏｌ／ＬＨ３ＰＯ４介质中，６－ＮＯ２－ＢＴＡＤＣＡＢＳ与Ｐｄ２＋形成蓝色的１：１配合物．在阴离子表面活性剂，十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）存在下，最大吸收波长６３７．８ｎｍ．钯浓度在０—１．２μｇ／ｍｌ范围内符合比尔定律．用双波长法测定，表观摩尔吸光系数ε６３７．８－５１０．０＝６．１２×１０４．许多共存离子不干扰测定，所建立的方法无需掩蔽剂和分离即可直接测定钯催化剂中的钯，结果满意．     

猪肾胆绿素还原酶活性基团的修饰

报道采用专一性试剂ＤＴＮＢ、ＮＥＭ、磷酸吡哆醛以及２，３－丁二酮对胆绿素还原酶活性进行修饰．当这几种试剂分别与该酶反应后，酶活性大幅度降低；而当预先加入ＮＡＤＰＨ或胆绿素，酶活性明显受到保护．这些结果表明，半胱氨酸、赖氨酸和精氨酸残基与该酶同ＮＡＤＰＨ和胆绿素结合、以及胆绿素还原成胆红素的反应有关，是该酶活性必需的基团     

一种鉴定胸腺素高活性小分子组分的灵敏简便方法

用笔者稍加改进的梯度ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ尿素系统，分别测定自制的胸腺素Ｔ１溶液，观察到一条５．３ｋｕ的电泳谱带．Ｔ１溶液用Ｅ－玫瑰花结法测定时，生物活力较高，是粗抽提溶液的１８１倍     

超氧化物歧化酶活力测定曲线的线性化研究

用从猪红细胞制备的ＣｕＺｎ－ＳＯＤ，采用黄嘌呤氧化酶－ＮＢＴ法、改良的邻苯三酚自氧化法、经典的邻苯三酚自氧化法、ＮＢＴ光还原法及肾上腺素自氧化法等５种方法，得到５条典型的酶活力测定曲线，寻找到２种测活曲线直线化的数学处理方法，使ＳＯＤ测活工作变得更简便     

Raji细胞腺苷脱氨酶的纯化

经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００凝胶柱层析和羟基磷灰石柱层析从Ｒａｊｉ细胞中纯化ＡＤＡ达电泳纯。酶纯化３３６倍，比活力达３５５１５Ｕ／ｍｇ蛋白，回收率为２２．８３％；经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００凝胶过滤法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得ＡＤＡ的分子量分别为３７．０ＫＤ和４２．８ＫＤ；以腺苷或脱氧腺苷为底物测得Ｋｍ值分别为１６６．６７μｍｏｌ／Ｌ和１０１．９５μ     

根霉胞外羧甲基纤维素酶和β－葡糖苷酶的纯化研究

采用柱层析等步骤纯化了根霉Ｇ７的羧甲基纤维素酶及β－葡糖苷酶，回收率分别为４．５％和１９．６％．二种酶的最适酶反应温度都为５５°Ｃ，并都能在较大ｐＨ范围内保持稳定，其中羧甲基纤维素酶具有很高的耐热性，在１００°Ｃ水浴中保持１ｈ也仍可检测出约２０％的酶活性，最适反应ｐＨ为７．０～７．５；而β－葡糖苷酶的热稳性较差，其最适反应ｐＨ为５．０．该两种酶的分子量分别为２．５×１０４和９．５×１０４，而Ｋｍ值则分别为７．４０ｍｇｍＬ－１和０．２１３ｍｇｍＬ－１．