超高效液相色谱-串联质谱法同时测定胆汁中15种胆汁酸

建立了同时测定胆汁中15种胆汁酸的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。以蛋白质沉淀的方法对样品进行前处理。以甲醇和0.1%(V/V)甲酸水为流动相对目标物进行梯度洗脱。在电喷雾负离子模式,采用多反应监测进行定性和定量分析。15种胆汁酸在线性范围内线性关系良好,线性相关系数(R2)均大于0.993;目标物的检出限为0.2~2.0μg/L;3个加标水平下的回收率为71.8%~96.5%,相对标准偏差为2.7%~8.5%。方法可用于胆汁中胆汁酸的检测。     

反相高效液相色谱法分析人体胆汁中结合型胆汁酸

根据反相液相色谱的保留值方程ＩｇＫ＇＝ａ＋ｃ．ｃｂ,结合型胆２汁酸的选择性变化规律ｌｇａ＝△ａ＋△ｃｖ．ｃｂ及结合型胆汁酸的标准样品色谱保留值,对人体胆汁中６种结合型胆汁酸进行了定性定量分析。６种结合型胆汁酸的浓度在０～１０．１５ｇ／Ｌ范围２内与相应的色谱峰高成良好的线性关系（相关系数在０．９９９６～０．９９７９之间）。     

高效液相色谱荧光检测法测定人血清中胆汁酸含量

应用反相高效液相色谱－荧光检测技术，发展了人血清中１４种胆汁酸分析的新方法，流动相中加入β环糊精作为添加剂，等度冲洗，一次分析可在６０ｍｉｎ内完成，且可以达到基线分离。由于胆汁酸的紫外吸收弱，采用４－溴甲基－７－甲氧基香豆素作为荧光试剂衍生。激发波长３２０ｎｍ，发射波长３８０ｎｍ。血清样品经预处理，回收率介于６６０％～９１６％之间。在００２５～１５ｍｇ／Ｌ质量浓度范围，色谱峰面积对浓度作线性回归分析，回归系数介于０９９０８～０９９８６之间。方法快速、简单、灵敏度高。     

反相高效液相色谱法测定鼠胆汁中游离与结合型胆汁酸

建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测大鼠胆汁中游离与结合型胆汁酸的方法.以4-溴甲基-7-甲氧基香豆素为衍生剂,月桂酸为內标,Waters Nova C18色谱柱分离,采用甲醇/乙腈和水梯度洗脱,荧光激发波长(λex)330 nm,发射波长(λem)400 nm,內标标准曲线法定量.各胆汁酸在5-2 400μmol/L范围内线性良好,r为0.998 9-0.999 7.最低检出限为1.2-2.5μmol/L.精密度日内在1.05%-3.67%之间,日间在3.16%-6.83%之间.平均回收率为87.8%-106.7%.该方法灵敏、重复性好,分析时间短,线性范围宽,适合于科研工作中对鼠胆汁中各胆汁酸进行定量检测.     

高效液相色谱荧光测定及质谱鉴定分析血清中胆汁酸

利用新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙基苯磺酸酯(BDEBS)作柱前衍生化试剂,在EclipseXDB-C8色谱柱上,采用梯度洗脱对10种胆汁酸(BAs)荧光衍生物进行了优化分离。95℃下在二甲基亚砜(DMSO)溶剂中以柠檬酸钾作催化剂,衍生反应35min后获得稳定的荧光产物,衍生反应完全。荧光激发和发射波长分别为λex=333nm,λem=390nm。采用大气压化学电离源(APCISource)正离子模式,实现了血清中胆汁酸的定性测定。分析物的定量测定采用荧光法进行。线性回归系数均在0.9996以上,检出限为22.36~44.57×10-15mol。     

高效液相色谱／光散射检测器测定肝病病人血清中的胆汁酸

利用反相高效液相色谱／挥发激光散射检测器发展了分析胆汁酸的新方法。采用甲醇和乙酸铵缓冲液混合溶液为冲洗体系，梯度淋洗，１０种甘氨型和牛磺型胆汁酸有２５ｍｉｎ内完成基线分离。方法简单快速，不需衍生，血清榈经预处理，平均回收率为９６．１％，在４－５０，ｇ／Ｌ浓度范围内对峰面积与浓度进行线性回归分析，回归系数０．９９１５－０．９９８２之间可用于正常人和肝硬化病人血清中胆汁酸的测定。     

反相液相色谱结合型胆汁酸的选择性变化规律

本文报道了反相液相色谱(RP-HPLC)和离子对反相液相色谱甘氨型(G)和牛磺型(T)结合胆汁酸的选择性变化规律,首次发现在给定冲洗剂浓度下,G、T对结合型胆汁酸的选择性因子或结合型选择性为常数。本文同时还在反相液相色谱保留值基本方程的基础上讨论了G、T对选择性变化规律的理论依据。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中游离和结合型胆汁酸

建立了高效液相色谱-串联质谱同时测定血清中游离和结合型胆汁酸的方法。血清样品经固相萃取后,在C18色谱柱上梯度洗脱,用负离子多反应监测模式检测。15种胆汁酸在0.10~100.0μmol/L的浓度范围内与响应呈良好的线性,r为0.9990~0.9999;检出限为0.001~0.006μmol/L;本方法的相对标准偏差日内不超过3.0%,日间不超过6.0%;平均回收率为86.0%~110.0%,适合于临床检测血清胆汁酸。     

9-(2-羟乙基)-吖啶酮柱前衍生胆汁酸高效液相色谱分析

采用一种新型紫外、荧光衍生试剂 9 ( 2 羟乙基 ) 吖啶酮 (HEA) ,在缩合剂 1 乙基 3 ( 3 二甲氨丙基 ) 碳酰二亚胺 (EDC·HCl)及碱性催化剂 4 二甲氨基吡啶 (DMAP)的存在下 ,对 1 0种胆汁酸进行柱前衍生 ,并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱 (HPLC)分析。在HypersilBDSC18柱上 ,采用梯度洗脱 ,1 0种胆汁酸衍生物获得了基线分离 ,衍生物的激发和发射波长为λex/λem=40 4/44 0nm。衍生产物稳定性好 ,检测灵敏度高 ,按信噪比S/N =3∶1 ,平均检出限可达 8.3fmol。     

Microdetermination of Bile Acids by High-Performance Liquid Chromatography Equipped with a High Sensitive Conductance Detector

Abstract

Conductimetric detection of bile acids in reversed phase high-performance liquid chromatography is described. The solvent system of the mixture of water and organic solvent containing small amount of basic salts such as ammonium carbonate is found useable by removing the cation with the cation exchange column inserted between the ODS column and the conductance detector. Thus, a few ng of tauro-and glyco-conjugated bile acids can be detected without tedious derivatization and hydrolysis.     

高效液相色谱法测定银杏果中有机酸的含量

建立了反相高效液相色谱测定银杏果中有机酸含量的方法.方法采用ultimate-C18色谱柱,以pH=2.0的磷酸盐缓冲溶液为流动相,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm,在22 min内实现了7种有机酸的基线分离.有机酸的检出限在0.001～0.067μg/mL之间.所建立的方法具有分析速度快、线性范围宽、灵...     

高效液相色谱法测定植物根系分泌物中的有机酸

以小麦为例,建立了植物根系分泌物中有机酸的提取和测定方法。小麦根系分泌物由培根法培育收集,先后经阳离子和阴离子交换树脂提取,旋转蒸发至干后用pH 2.1的稀HClO4溶液溶解、定容,以5 mmol/L H2SO4水溶液为流动相,经Bio-Rad Aminex HPX-87H阳离子交换树脂柱分离,在波长210 nm处紫外检测。在小麦根系分泌物中,有机酸的检测限为1~120 μg/L,日内检测精密度为1.2%~4.7%,日间检测精密度为3.3%~10.6%,不同剂量的加标回收率为82.0%~96.2%,相对标准偏差为0.67%~3.31%。该方法简便快速,灵敏可靠,适用于介质复杂的环境样品中有机酸的测定。     

液相色谱-串联质谱法测定血清中15种胆汁酸

建立了血清中15种胆汁酸的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。血清样品经乙腈沉淀蛋白后,用Capcell Pak C18MG柱分离,以乙腈-醋酸铵缓冲液为流动相进行梯度洗脱,流速0.25 mL/min,进样10μL,采用多反应监测(MRM)定量分析。在定量范围内,15种胆汁酸的线性关系良好,批内、批间的RSD分别为2.3%~12.7%和1.1%~14.3%,回收率在75%~101%之间。应用本法测定了10名健康儿童血清中的胆汁酸含量。该方法的样品处理简单快速,检测准确灵敏,可满足临床血样中胆汁酸含量测定的要求。     

高效液相色谱法测定银杏外种皮中银杏酸的含量

建立了反相高效液相色谱法测定银杏外种皮中银杏酸含量的方法，色谱柱为Inertsil ODS-2，流动相为甲醇-3%Hac溶液（92:8，V/V），流速1.0mL/min；柱温40℃；紫外检测波长310nm；线性范围：0.572-10.30цg（相关系数R=0.9999）；检测限5.2ng(3a)。银杏外种皮提取物经一步硅胶柱层析预处理。实验测得银杏外种皮中银杏酸含量为5.46%；平均回收率为97.5%，RSD为1.9%(n=6)。该方法简便、准确、线性范围宽。     

血清中胆汁酸的高效液相色谱荧光测定及质谱鉴定

在Hypersil C18色谱柱上，利用新型荧光试剂1，2-苯并-3，4-二氢咔唑-9-乙基对甲苯磺酸酯（BDETS）作柱前衍生化试剂，采用梯度洗脱对10种胆汁酸（BAs）荧光衍生物进行了优化分离。95℃下在二甲基亚砜溶剂中以柠檬酸钾作催化剂，衍生反应30min后获得稳定的荧光产物，衍生反应完全。激发和发射波长分别为λex=333nm，λem=390nm。采用大气压化学电离源（APCI）正离子模式，实现了血清中胆汁酸的定性和定量测定。线性回归系数均在0.9996以上，线性范围宽，检出限为12．94—21．94fmol。     

高效液相色谱法测定非天然氨基酸的光学纯度

 以（1- 氟-2,4-二硝基苯基）-5-L-缬氨 酰胺为手性试剂、反相高效液相色谱法测定非天然氨基酸的光学 纯度。梯度洗脱,流动相A：含体积分数为0.1％的三氟乙酸的乙腈,流动相B：体积分 数为0.1％的三氟乙酸水溶液。L-和D-对映体得到良好分离。准确测定了25种非天然 氨基酸L-和D-对映体的光学纯度。