旱生植物梭梭苹果酸脱氢酶的纯化及其性质的研究

本文采用差速离心法、硫酸铵分级沉淀，ＤＥＡＥ纤维素和半琼脂糖柱层析方法，从旱生植物梭梭体内分离出纯化１０４倍的ＮＡＤ－——ＭＤＨ．该酶等电点为５．７，最适ｐＨ７．１，它对草酰乙酸和ＮＡＤＨ的表观Ｋｍ值分别为８０μＭ和９０μＭ，凝胶过滤法得分子量为６７０００Ｄ．ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电泳法得分子量为３３０００Ｄ，说明该酶是由两个相同亚基组成的二聚体蛋白．该酶的热稳定曲线表明，在５５℃以下时酶活性较稳定．     

悬铃木叶片暗棕色抑菌色素的分离纯化及特性的初步研究

以碱提取、酸沉淀和ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、Ａｌ２Ｏ３及ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析分离纯化等步骤，从悬铃木落叶中制备得到一种暗棕色化合物，经ＰＡＧＥ、ＰＬＣ及ＴＬＣ检测均为单一谱带或单一斑点；该有色化合物熔点２８２．５９～２８３．２９℃，λＫＯＨｍａｘ：２１５ｎｍ，Ｅ１％１ｃｍ：３４８．７，肩峰：２５６ｎｍ，ｐＩ：３．５，对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、巨大芽孢杆菌及枯草杆菌有较强的抑菌活性     

一种新型抗瘤蛋白的分子量测定

从健康牛骨髓中分离纯化了一种新的具有抗肿瘤活性的糖蛋白。为了测定该蛋白质的分子量，作者参照Ｓｈａｐｉｒｏ和Ｗｅｂｅｒ等人的办法，以改进的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得该蛋白质的表观分子量约为６５Ｋｄａｌ。并以蔗糖密度梯离心法印证了这一实验结果。     

醌蛋白——猪肾二胺氧化酶的提取和性质

新鲜猪肾匀浆后，经热处理、盐析、羟基磷灰石和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等纯化步骤，二胺氧化酶的收得率为２３．９％，纯化倍数为４２５．该酶进行凝胶电泳后，经氨基黑、酶活性和ＮＢＴ溶液染色分别得到相对应的蛋白质、酶活性及醌辅基谱带．该酶可与腐胺、尸胺、己二胺、组胺等底物作用，释放出Ｈ２Ｏ２，当底物为腐胺时，最适浓度为５ｍｍｏｌＬ－１，Ｋｍ值为０．５ｍｍｏｌＬ－１，最适ｐＨ为７．０，最适温度为４０°Ｃ．在非酶系统中，该酶可与ＮＢＴ溶液反应，呈现紫色，并随时间延长而加深．经ＳＤＳ板状不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳，得该酶亚基分子量为８．３×１０４．     

一种具高活性的酪氨酸酶基因启动子片段的分离

利用大肠杆菌启动子探测质粒ｐＫＫ２３２－８为载体,经ＨｉｎｄⅢ－ＢａｍＨⅠ完全消化后与ＨｉｎｄⅢ－ＢａｍＨⅠ部分消化的嗜麦芽假单胞菌染色休ＤＮＡ进行体外连接,转化Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１感受态细胞,在含氨苄青霉素（Ａｐ）和氯霉素（Ｃｍ）的选择平板上筛选转化子．从随机挑选的５４株转化子中,获得一株抗氯霉素水平达１０００ｍｇ／Ｌ的转化子Ｅ．ｃｏｌｉＰＡＳＩ,所含重组质粒被命名为ｐＡＳＩ．经限制性酶切分析和杂交分析表明,ｐＡＳＩ质粒上插入了一段来源于嗜麦芽假单胞菌染色体的ＤＮＡ片段,其大小为１．４ｋｂ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明转化子Ｅ．ｃｏｌｉＰＡＳＩ在含Ｃｍ的培养基上,额外表达了一条２２×１０３的ＣＡＴ蛋白质带．将重组质粒ｐＷＳＹ上的嗜麦芽假单胞菌ｍｅｌ基因亚克隆到ｐＡＳＩ上１．４ｋｂ启动子功能片段下游,构建成Ｅ．ｃｏｌｉＡＷＳ工程菌株,使黑色素产率提高了７０．６％．     

TSETV的研制及其与AES联用技术研究

提出了一种简单、有效的微进样装置──钨丝电热蒸发进样装置（ＴＳＥＴＶ），并把该装置与电感耦合等离子体发射光谱（ＩＣＰ－ＡＥＳ）及直流电弧发射光谱（ＤＣ－ＡＥＳ）联用．对该装置本身及与其ＩＣＰ－ＡＥＳ，ＤＣ－ＡＥＳ的联用技术、分折性能作了详细研究．用ＴＳＥＴＶ－ＤＣ系统得到了Ｎｉ，Ｃｏ，Ｃｕ，Ｍｎ，Ｃｒ和Ｍｇ的检出限为１０－８～１０－１０ｇ（１０μＬ进样），相对标准偏差明显优于常规ＤＣ系统．并用该法分析了纯ＮａＣｌ中痕量Ｃｕ及水样中Ｃｕ，Ｆｅ，Ｍｎ，所得结果同ＩＣＰ－ＡＥＳ及石墨炉原子吸收（ＧＦ－ＡＡＳ）所得结果相吻合．用ＴＳＥＴＶ－ＩＣＰ系统得到了Ｍｇ，Ｃｕ，Ｍｎ，Ｃｒ，Ｆｅ，Ｃｏ，Ｎｉ，Ｌａ，Ｎｄ，Ｇｄ，Ｄｙ，Ｙｂ，Ｌｕ和Ｙ的检出限为１０－９～１０－１１ｇ（１０μＬ进样），相对标准偏差低于６％．并用该方法分析了白酒及大米中痕量Ｃｕ，Ｍｎ及江西稀土矿区谷物样品中痕量稀土元素，结果满意．实验表明，ＴＳＥＴＶ具有操作方便，进样量小，能把试样的蒸发和激发过程分开的优点．     

酵母细胞壁主要结构蛋白CWP33的纯化与研究

在酵母Ｃａｎｄｉｄａｕｔｉｌｉｓ细胞壁上发现一种细胞壁主要结构蛋白（ＣＷＰ３３），其分子量为３３×１０３，与其它细胞壁蛋白不同，该蛋白在细胞壁上对胰蛋白酶作用不敏感，而其它细胞壁蛋白组分几乎完全被胰蛋白酶降解．利用这一性质将该蛋白从细胞壁上抽提后，经ＤＥＡＥ－纤维素离子交换柱层析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ凝胶层析得到纯化．经研究ＣＷＰ３３蛋白具有葡聚糖内切酶活性，可以水解地衣糖，但不能水解对硝基苯葡萄糖苷．该蛋白可能具有重要的结构功能．     

微柱在线预富集FI-ICP-AES测定痕量La和Gd

以ＤＣＢ－偶氮胂（全名为３－（２－胂酸基苯偶氮）－６－（２，６－二氯－４－溴）－４，５－二羟基－２，７萘二磺酸）为衍生化试剂，使之负载于碳硅凝胶上，并以此填充微柱．在优化的实验条件下，于ｐＨ４．０的ＮＨ３·Ｈ２Ｏ／ＨＣＯＯＨ缓冲介质中实现了Ｌａ３＋、Ｇａ３＋的在线富集分离和ＩＣＰ－ＡＥＳ测定．对影响在线预富集的各种因素进行了考察；方法的富集倍数为１０倍，检出限为μｇ·Ｌ－１级，分析速度为８次／ｈ．此法用于生物标准试样分析，结果满意     

棕青铜单晶低温电阻—温度特性研究

我们利用ＥＨＴＳ方法首次制备了棕青铜单晶，经ＥＤＳ谱分析，其分子式为Ｋ０．０１ＭｏＯ３研究表明，棕青铜在７７～３００Ｋ温区呈金属导电性，室温电阻率为４．２×１０－４Ω·ｃｍ，电阻－温度系数为３．６×１０－３／Ｋ；真空退火后其电阻率减小，氧退火后电阻车增大两个数量级，且在２５０￣３００Ｋ出现负温度系数。     

抗轮状病毒卵黄免疫球蛋白的制备及其活性

采用婴幼儿轮状病毒抗原免疫产卵母鸡，然后用ＰＥＧ两步沉淀分离鸡卵黄中抗轮状病毒免疫球蛋白，经离子交换层析及凝胶层析纯化抗－ＨＲＶＩｇＹ。此ＩｇＹ经免疫扩散，免疫电镜、ＥＬＩＳＡ检测均证实其具有特异抗ＨＲＶ活性。     

猪瘟病毒石门株E2基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增了猪瘟病毒石门株的Ｅ２基因．扩增片段大小为１１８４ｂｐ，与预期大小一致．经ＳａｃＩ酶切和巢式ＰＣＲ证实了Ｅ２基因的特异性．将Ｅ２基因扩增片段首先克隆至ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，进行全序列测定，将该基因再克隆到表达载体ｐＢＶ２２１．采用温控诱导，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果显示Ｅ２基因获得表达．ＥＬＩＳＡ表明Ｅ２基因表达产物可与猪瘟阳性血清起特异性反应．     

水稻根谷氨酰胺合成酶同工酶某些性质研究

对水稻根两种不同形式的谷氨酰胺合成酶（ＧＳｒａ和ＧＳｒｂ）进行了动力学性质研究．ＧＳｒａ对热比较稳定，而ＧＳｒｂ比较敏感；ＧＳｒａ的最适温度为５５℃，ＧＳｒｂ为４３℃．ＧＳｒａ和ＧＳｒｂ的最适ｐＨ都为７．５．ＧＳｒａ对Ｌ－谷氨酸、羟胺和ＡＴＰ的表观Ｋｍ分别为４．１６、０．６０和０．３４，而ＧＳｒｂ分别为１５．７３、０．６０和０．５８．ＭＳＯ对两者均表现为竞争性抑制作用     

一种鉴定胸腺素高活性小分子组分的灵敏简便方法

用笔者稍加改进的梯度ＰＡＧＥ和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ尿素系统，分别测定自制的胸腺素Ｔ１溶液，观察到一条５．３ｋｕ的电泳谱带．Ｔ１溶液用Ｅ－玫瑰花结法测定时，生物活力较高，是粗抽提溶液的１８１倍     

杆状病毒p35基因延缓昆虫细胞凋亡

构建了以新霉素抗性基因为筛选标记的带有ｐ３５基因的转移载体ｐ３５ＩＥ１Ｎｅｏ，以此载体转染Ｓｆ９细胞，经Ｇ４１８筛选得到染色体上稳定整合质粒ｐ３５ＩＥ１Ｎｅｏ的Ｓｆ９细胞，克隆化培养后取名为Ｓｆ９－３５．经细胞原位杂交实验证明，Ｓｆ９－３５细胞的染色体ＤＮＡ上含有ｐ３５基因；经放线菌素Ｄ处理后的细胞核酸电泳检测，证实Ｓｆ９－３５具有抗凋亡特性能够支持凋亡抑制基因缺失的ｖＡｃΔｐ３５病毒复制；发现ｐ３５基因在细胞内组成型表达只能延缓ｖＡｃΔｐ３５感染及放线菌素Ｄ处理诱发的细胞凋亡的过程，而不能完全阻止其诱发的细胞凋亡．     

人丙型肝炎病毒核心抗原基因的表达和纯化

人丙型肝炎病毒Ｉ型（ＨＣＶ－Ｉ）核心抗原编码区ｃＤＮＡ，全长５７３ｂｐ，编码１９１个氨基酸，被克隆到一种新的表达质粒ｐＲＳＥＴＨｉｓＢ中，转化大肠菌ＢＬ２１菌株，在１ｍｍｏｌＬ－１ＩＰＴＧ诱导３７℃培养５ｈ，核心抗原表达水平达到高峰，表达出分子量２６×１０３的融合蛋白，并在细胞内形成微小晶体．表达水平达到细胞总蛋白的４０％左右，通过纯化，获得的核心抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检查为均一分子量２６×１０３的蛋白，用酶联免疫法进行血清学初步检查，纯化的核心抗原与ＨＣＶ阳性血清显示出强烈的阳性反应，对慢性丙肝病人血清中抗ＨＣＶ抗体的阳性检出率达９３％，而与正常人血清则无阳性反应     

SDS-聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离乳酸脱氢酶

用连续的和不连续的ＳＤＳ－聚丙烯胺凝胶圆盘电泳法（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对乳酸氢酶进行了电泳分离,获得了乳酸脱氢酶同功酶的清晰分离带,证明了不连续的ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法其分离效果优于连续的ＳＤＳ－聚丙烯酰交圆盘电泳法。     

水稻液泡膜H~＋－ATPase的分离纯化及生化性质研究

用差速离心和密度梯度离心的方法，分离水稻液泡膜微囊，测定膜微囊ＡＴＰａｓｅ活性．用５％的ＴｒｉｔｏｎＸ－１００溶膜后的上清液，经ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ柱层析纯化，得到ＡＴＰａｓｅ复合物．生化性质研究结果表明，纯化前后基本相似．酶活性需要Ｍｇ２＋，受Ｃｌ－激活，对叠氮化钠、钒酸盐和寡霉素不敏感，受硝酸盐、ＤＣＣＤ（质子通道抑制剂）抑制，泵质子产生的膜电位△可被质子通道的离子载体ＣＣＣＰ破坏．     

FI-HG-ICP-AES测定痕量镉的研究

提出流动注射（ＦＩ）－氢化物发生（ＨＧ）－电感耦合等离子体（ＩＣＰ）原子发射光谱法（ＡＥＳ）联用技术测定痕量镉．对影响氢化物形成的因素进行了研究．在选择的最佳实验参数下，进样体积为３００μＬ时，本法的检出限为０．２μｇ·Ｌ－１，精密度为１．２％（ｃ＝１０μｇ·Ｌ－１，ｎ＝７）．进样速率达７５样次／ｈ．该法用于茶叶及塑料浸取液中痕量镉的测定，结果满意．     

Suzuki单群的一个特性

设Ｄ是一个２－（ｖ，ｋ，１）设计，Ｇ≤ＡｕｔＤ．如果Ｓｚ（ｑ）Ｇ≤Ａｕｔ（Ｓｚ（ｑ））．且Ｇ作用在Ｄ上是线－本原的．则Ｇ作用在Ｄ上也是点－本原的     

棉铃虫血淋巴凝集素的性质研究

棉铃虫（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓａｒｍｉｇｅｒａ）血淋巴对人的Ａ、Ｂ、Ｏ型红细胞有同等的凝集活性，对兔、小白鼠、豚鼠、蟾蜍、鲫鱼、鸡红细胞有不同的凝集活性，对山羊红细胞无凝集活性．其凝集活性能被Ｄ－半乳糖明显地抑制．对Ｃａ２＋无依赖性．７０℃处理１５ｍｉｎ凝集活性趋于零．棉铃虫核型多角体病毒的诱导使其活性明显增加．化蛹早期及蛹期凝集活性下降．血淋巴凝集素通过盐析、凝胶过滤和纤维素层析得到分离．它在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中表现为单一带，为糖蛋白，分子量为７．０８×１０４．其蛋白质含量为９８．７４％，糖含量为１．２６％．